Molecular Research Center

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品Pai名称：  

测序实验流程：
生存期
在细胞一代中，细胞能倍增3～6次，经历三个阶段：
1. 潜伏期(latent phase) ：
接种 经过 悬浮期(细胞质回缩,胞体呈圆球形) 贴壁。
初代培养细胞 经过 10～24小时或更多时间。
连续细胞系和癌细胞系 经过 10～30分钟 贴附。
贴附现象是一个非常复杂和受多种因素的影响。
影响细胞贴附：底物表面不干净，影响细胞贴附。
利于细胞贴附：底物表面带有阳性物质与特殊物质:
纤粘连蛋白(fibronectin FN)、
细胞表面蛋白(cell surface proteinCSP)
这些物质有的存在与细胞表面,有的来自血清。
潜伏期特点：
长短与细胞接种密度、种类、使用的培养基性质有关。
(1)细胞贴附后进入潜伏期,细胞无增殖。少见分裂相，细胞有运动活动。
(2)初代培养 细胞潜伏期约为24～96小时或更长，
连续细胞系和肿瘤细胞潜伏期约6～24小时。
(3)细胞接种密度大潜伏期短。
(4)细胞出现分裂相增多时，标志细胞进入指数增生期。
实验用品 
1. 种类︰ 
1.1. 细胞培养实验用品均为无菌，除了玻璃容器与pasteur pipet 外，其它均为塑料无菌 
制品。 
1.2. TC 级培养盘表面均有coating 高分子物质以让细胞吸附，培养容器种类有Tflask, 
plates, dishes, roller bottle 等，依实验需要使用。 
1.3. plastic sterile pipet: 1 ml, 2 ml,5 ml, 10 ml, 25 ml 
1.4. 塑料离心管: 15 ml, 50 ml，均有2 种不同材质，其中polypropylene (PP) 为不透 
明材质，polystyrene (PS) 为透明材质，可依实验需要而选择适合材质之离心管。 
1.5. glass pastuer pipet: 9 inch，用以抽掉废弃培养液等。 
1.6. 玻璃血清瓶(Pyrex or Duran glassware)：100 ml, 250 ml,500 ml,1000 ml 
2. 清洗︰ 
2.1. 新购玻璃血清瓶先以0.1~0.05 N HCl 浸泡数小时，洗净后才开始使用。 
2.2. 用过之玻璃血清瓶，以高压蒸汽灭菌，洗净后分别用一次与二次去离子水冲洗干 
净，勿加清洁剂清洗。 
3. 灭菌︰ 
3.1. 实验用玻璃血清瓶以铝箔纸包覆瓶盖，高压蒸汽灭菌121 oC, 15 lb, 20 分钟，置于 
oven 中烘干。 
3.2. 实验用玻璃pasteur pipet 以干热灭菌170 oC, 4 小时。 
3.3. 液体或是固体废弃物可用10 % hypochloride 溶液(次氯酸，即漂白水) 或是蒸汽高 
压灭菌121 oC, 15 lb, 20 分钟处理。
【生物分子】 抗生素/抗真菌素 维生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖类 白三烯 前列腺素 药物结合物 抗氧化剂 药理活性化合物 类固醇激素结合物 半抗原反应 半抗原载体结合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 亲和素/链霉亲和素
【蛋白质/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封闭肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 细菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 细胞质蛋白 总蛋白 膜蛋白 核蛋白 细胞裂解和提取物 线粒体蛋白 细胞裂解 组织提取 重组细胞因子 
【常用生化试剂】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物学缓冲液 蛋白生化缓冲液 去垢剂 染色试剂 溶剂 酸碱 化学试剂 其它生化试剂
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR试剂 PCR对照 特异性PCR试剂盒 PCR克隆试剂盒 RNA 载体及构建 PCR克隆载体 M13克隆载体 细菌克隆载体 文库及构建 cDNA文库 基因组文库 噬菌体展示文库
【酶】限制性内切酶 蛋白酶 核酸酶 激酶 聚合酶 连接酶
【cDNA及合成纯化】cDNA全长基因 RNA cDNA合成 cDNA相关试剂
【核酸/蛋白合成】Oligo纯化 核酸合成柱 核酸合成试剂
【克隆与表达】克隆基因 克隆试剂盒 克隆筛选
【表达分析】 Northern印迹分析 分支DNA和mRNA定量
【蛋白分析】 PAGE凝胶制备 蛋白电泳试剂 预制蛋白凝胶
【核酸纯化】 DNA凝胶纯化 DNA提取纯化 PCR产物纯化
【RNAi技术】 siRNA 反义寡核苷酸 RNAi定量 RNAi文库
【蛋白检测】 Western印迹 报告基因检测 蛋白检测试剂盒
【实验动物】 转基因动物 小鼠 大鼠 模式动物
【临床检测试剂】 生化检测 遗传学检测 血液检测
【相关检验试剂】 食品安全检测 药品安全检测
【蛋白纯化】 蛋白提取 蛋白透析 蛋白定量 蛋白稳定
【细胞培养】 血清 血清替代物 细胞培养基 细胞 细胞株 感受态细胞 新鲜细胞分离
【干细胞】 干细胞/祖细胞 原代细胞 干细胞培养基
【蛋白修饰】 蛋白标记 载体蛋白结合 其它
【细胞生物学检测】 细胞凋亡 细胞分离 细胞增殖
【药物筛选】 荧光素细胞活力/增殖/毒性检测
【免疫检测】 放射性免疫检测 化学发