195-17991 SuperSep Phos-tag 丙烯酰胺预制胶

SuperSep Phos-tag^™丙烯酰胺预制胶

SuperSep Phos-tag^™丙烯酰胺预制胶,内含50uMPhos-tag丙烯酰胺,可用于磷酸化蛋白的分离。预制胶中含有锌作为金属离子，无需特异性磷酸化抗体或者同位素标记，在中性凝胶缓冲液中保存稳定性很好，结果条带清晰。预制胶打开包装即可直接使用。根据实验条件,Phos-tag预制胶有多款丙烯酰胺浓度和孔数可选,提供专门适合BioRad和Life Technologies电泳槽尺寸的预制胶。

Phos-tag^™磷酸化亲和电泳原理

SuperSep Phos-tag丙烯酰胺预制胶产品特点：

■ 即开即用 - 节约Z宝贵的时间
■ 根据磷酸化程度分离磷酸化蛋白
■ 分离效果好，条带清晰
■ 无需磷酸化特异性抗体和放射性同位素标记

SuperSep Phos-tag丙烯酰胺预制胶案例：

(1）分离磷酸化和去磷酸蛋白

(2）去磷酸化过程

SuperSep Phos-tag丙烯酰胺预制胶产品列表

1、适用于Bio-Rad电泳槽的预制胶

2、适用于Life-technology电泳槽的预制胶

3、适用于wako电泳槽的预制胶（>90 x 85 x 1 mm）

SuperSep Phos-tag丙烯酰胺预制胶使用须知

样品制备：
Phos-tag SDS-PAGE对于蛋白样品中的杂质非常敏感，尤其是螯合剂，钒酸，无机盐，表面活性剂这类物质。
强烈建议在Phos-tag SDS-PAGE之前通过TCA沉淀或渗析法降低杂质含量。

转膜前处理：
另一个必须的步骤是在转膜前，用EDTA去除凝胶中的金属离子（Mn2+或者Zn2+）； 该步骤可提高蛋白的转膜效率。

1. 分别准备10 mmol/L 含EDTA和不含EDTA 两种1x transfer buffer。
2. 将凝胶浸泡在含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer，至少20分钟，温和摇晃。更换新缓冲液，重复3次。
3. 将凝胶浸泡在不含10 mmol/L EDTA的1x transfer buffer，10分钟，温和摇晃。
4. 转膜操作*。

* 建议用湿法转膜，以提高转膜效率。

SuperSep Phos-tag丙烯酰胺预制胶质量控制

每一批SuperSep Phos-tag™，出厂前均据产品规格进行测试，以保证可分离磷酸化和非磷酸化蛋白，且分离程度在正常参数内。

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