乙脑IgM试剂盒

乙脑IgM试剂盒

  (我司还提供疟疾、登革热、基孔肯雅热、克维锥虫、RK39和黄热病等检测试剂盒，咨询）

乙脑IgM试剂盒【预期用途】

诊断自动化公司日本脑炎IgM ELISA测SY于暴露于日本脑炎病毒（JEV）是用于检测人血清中的IgE抗体对JEV衍生的重组抗原（JERA）（1-4）的ELISA测定系统。这个测试是为了帮助诊断人类暴露于日本脑炎病毒（JEV）。它不是为了筛选血液或血液成分，仅用于专业的体外诊断用途。该试剂盒尚未针对疫苗诱导的血清学转换研究进行优化。

【概要和说明】

暴露于JEV会导致一些具有许多症状的疾病，包括脑炎（5-8）。日本脑炎IgM ELISA使用称为JERA的重组抗原，其可用作JEV感染的快速血清学标记。 JERA蛋白是重组抗原，其由来自JEV抗原不同部分的一段肽组成。

【测试原理】

日本脑炎IgM ELISA由一个酶促扩增的“两步”夹心型免疫测定法组成。在该测定中，将JE检测阴性对照（代表非反应性血清），JE检测IgM阳性对照（代表反应性血清）和未知血清样品在已经用抗人IgM抗体包被的微孔中孵育，然后孵育分别与JEV衍生的重组JERA和正常细胞抗原（NCA）。血清样品用用于JE检测IgM的样品稀释缓冲液稀释。孵育和洗涤后，用用辣根过氧化物酶（HRP）标记的JERA特异性抗体处理孔。在第二次孵育和洗涤步骤后，将孔与四甲基联苯胺（TMB）底物温育。然后加入酸性停止溶液，通过在450纳米处的吸光度测量来确定底物的酶转换程度。高于某个阈值时，JERA和对照孔的吸光度比准确地确定是否存在JEV抗体。

提供的材料

日本脑炎IgM ELISA试剂盒含有96孔（12×8条）的一个板的足量试剂。试剂盒包含以下试剂：

日本脑炎IgM ELISA特异性材料：

1. 用于人IgM的涂层微滴度条：箔袋中的带状载体，其中包含在每个孔中涂覆有人IgM抗体的96个聚苯乙烯微量滴定孔。储存于2-8℃直至准备使用。抗人IgM包被的孔用于从人类样品中捕获IgM抗体。

2. 用于IgM型A的样品稀释缓冲液：一瓶，25mL，用于血清稀释，然后用于测定。储存于2-8℃直至准备使用。

（注意：如果看到任何沉淀物，就很好地涡旋管以获得均匀的溶液，然后使用。）

3. JE阴性对照：一个小瓶，50μL或两个小瓶，每个热灭HX清30μL。 JE检测阴性对照也有助于监测试剂盒的完整性。储存于2-8℃，直至使用多达7天。在使用前快速旋转小瓶以收集底部的内容物。

（注意：对于长期储存，血清可以进一步等分，体积较小并储存在-70℃。）

4. JE IgM阳性对照：一个小瓶，50μL或两个小瓶，每个热灭HX清30μL。 JE检测IgM阳性对照将有助于监测试剂盒的完整性。储存于2-8℃，直至使用多达7天。在使用前快速旋转小瓶以收集底部的内容物。

（注意：对于长期储存，血清可以进一步等分，体积较小并储存在-70℃。）

5. 用于IgM的即用型JE抗原（JERA）：一管（3 mL）即用型JERA溶液。储存于2-8℃直至准备使用。

6. 用于JE IgM的即用型正常细胞抗原（NCA）：即时使用NCA溶液的一管（3mL）。储存于2-8℃直至准备使用。

7. 准备使用JE IgM的酶偶联物-HRP：1瓶，6mL预稀释的HRP缀合的黄病毒反应性单克隆抗体（mAb），按照以下步骤使用。储存于2-8℃直至准备使用。

8. 10X洗涤缓冲液：一瓶，120 mL洗涤缓冲液用于本程序的所有洗涤步骤。储存于2-8℃直至准备使用。

9. EnWash：一瓶，20毫升EnWash，用于加入此程序的酶偶联物-HRP之间的洗涤步骤之间。储存于2-8ºC直到准备使用。

10. 液体TMB底物（显色剂）：在此程序中使用一瓶9 mL液体底物。储存于2-8℃直至准备使用。

（注意：基材应始终保持在防光的瓶子中。）

11. 终止液：一瓶，6 mL用于停止反应。储存于2-8℃直至准备使用。

注意：强酸，戴防护手套，面罩和安全眼镜。按照安全规定和规定处理所有材料。

材料需要但不提供

1. 能够在450nm下进行吸光度测定的ELISA分光光度计（DAX 800）

2. 生物或高等级的水

3. 真空泵

4. 洗板机（DAX 50）

5. 加湿孵化器或水浴

6. 10μL单通道移液器，50-200μL单通道和多通道移液器。

7. 聚丙烯管

8. 石蜡膜

9. 定时器

10.离心机

警告和注意事项

1. 制备控制所用的所有人类源材料对HIV 1、2、丙型肝炎和乙肝表面抗原抗体均呈阴性。然而，没有测试方法可以确保的效率。因此，所有人类控制和抗原都应作为潜在的传染物质处理。疾病控制ZX和国家卫生研究所建议在生物安全级别2上处理潜在的传染性病原体。

2. 彻底了解这个包的插入是成功使用该产品所必需的。可靠的结果只有通过精确的实验室技术和准确的包装插入才能获得。

3. 不要在单个分析中混合各种各样的试剂盒成分。

4. 不要在标签上显示到期日后使用任何部件。

5. 避免试剂在储存和孵化过程中暴露在过热或阳光直射下。

6. 有些试剂可能会形成轻微沉淀物，在使用前轻轻搅拌。

7. 不完全洗涤会对结果和检测精度产生不利影响。

8. 为了减少潜在的测定漂移由于在底物孵育时间的变化，应注意到威尔斯以相同的顺序和速度使用添加TMB溶液加入终止液。

9. 避免试剂的微生物污染，尤其是现成的酶结合辣根过氧化物酶。避免污染和酶-辣根过氧化物酶共轭TMB底物溶液。

10. 穿着防护服，眼睛保护和一次性手套进行检测。事后彻底洗手。

11. 对每个试剂、标准品、对照品或标本使用干净的一次性吸管头。

12. 用一次性吸水纸覆盖工作区域。

警告：潜在的生物危害性物质

这个试剂盒可能含有由人血清或血浆制成的试剂。除非另有说明，所用血清或血浆已热灭活。处理所有的血清和试剂盒，如果它们含有传染性病原体的话。在执行所有程序的过程中遵守预防微生物危害的规定，并遵循适当的标本处理标准程序。

化学性危害

材料安全数据表（MSDS）可用于本试剂盒的所有组件。回顾所有适当的MSDS进行试验之前。避免在测试过程中手、眼睛或粘膜之间的所有接触。如果确实发生了接触，参照适用的MSDS适当处理。

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