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样品:心脏(小鼠)溶于30μg 伯:抗PPARγ(BS-0530R)1/300稀释 次级:IrDyE800 CW山羊抗小鼠IgG 1/20000稀释 预测波段大小:57 kD 观察波段大小:51 kD
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Sample: HeLa(人)细胞裂解物在30μg 原发性:抗-PPARγ(BS-0530R)1/1000稀释 次级:IrDyE800 CW山羊抗兔IgG 1/20000稀释 预测波段大小:57 kD 观察波段大小:57 kD 
Sample: 30μg(人)细胞裂解液 原发性:抗-PPARγ(BS-0530R)1/1000稀释 次级:IrDyE800 CW山羊抗兔IgG 1/20000稀释 预测波段大小:57 kD 观察波段大小:57 kD 
样品:胃(小鼠)溶于30μg 原代:兔抗PPARγ(BS-0530R)1:300稀释; 次级:IrDyE800 CW山羊抗小鼠IgG 1/20000稀释 预测波段大小:57 kD观察波段大小:55 kD 
组织/细胞:小鼠肺组织;4%多聚甲醛固定和石蜡包埋; 抗原提取:柠檬酸缓冲液(0.01M,pH 6),15min煮沸,用3%过氧化氢阻断内源性过氧化物酶30min;37℃下阻断缓冲液(正常山羊血清,C-00 05)20 min; 孵育:抗PPARγ多克隆抗体,未结合(BS-0530R)1:200,在4°C过夜,随后与二级抗体(SP-023)和DAB(C-00)染色结合。
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空白控制(蓝线):U251 原代抗体(绿线):兔抗PPARG/PPAR-γ抗体(BS-0530R) 稀释度:1μg/10 ^ 6细胞; 同种型对照抗体(橙色线):兔IgG。 二抗(白蓝线):山羊抗兔IgG FITC 稀释度:1μg/次。 协议 用70%乙醇(4℃过夜)固定细胞,然后在冰上用90%的冰冷甲醇渗透30分钟。在室温下用一次抗体染色细胞30分钟。然后在1×PBS/2% BSA/10%山羊血清中孵育细胞以阻断非特异性蛋白质-蛋白质相互作用,然后在室温下用抗体15分钟。第二抗体在室温下使用40分钟。进行20000个事件的采集。 |