乳酸脱氢酶(兔肌)CAS号:9001-60-9产品概述:
乳酸脱氢酶(兔肌)
英文名称:LAD;LDH;Lactic dehydrogenase(rabbit muscle)
其他名称:L-乳酸脱氢酶;乳酸去氢酵素
CAS号:9001-60-9
级别:BR
分子量:132000
活力:≥30u/mg
性状(以下信息仅供参考):粉末。酶反应:乳酸盐+辅酶I=丙酮酸盐+还原辅酶I+H+ 。等电点pI 4.6。在25℃,pH 5.0~11.0时稳定;在pH小于5时,120分钟后没有活力(放置同样时间,在pH 5.0时有活力,在pH 6.0时有84%活力)用途:
本品仅供科研,不得用于其它用途。(以下用途仅供参考)丙酮酸盐的检定
保存:2~8℃
公司优势:
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Western Blot操作方法:
1.培养细胞蛋白质样品的制备:
1)在合适的盐浓度下,应保持蛋白质的溶解性和可重复性。
2)选择合适的表面活性剂和还原剂,破坏所有非共价结合的蛋白质复合物和共价键二硫键,使其形成一个各自多肽的溶液。
3)尽量去除核酸,多糖,脂类等干扰分子。
4)防止蛋白质在样品处理过程中的人为的修饰,制备过程应在低温下进行,以避免细胞破碎释放出的各种酶类的修饰(建议加入合适的蛋白酶YZ剂)
5)样品建议分装成合适的量,然后冷冻干燥或直接以液体状态置-80℃中保存,但要注意不要反复冻融。
2.组织样品的制备:
手术切除的组织块迅速置于预冷的0.95生理盐水中,漂洗数次,以清洁表面的血迹,将组织称量后切成几个较小的组织块放入机戒组织匀浆器中,按组织净重,裂解液=1:10的比例,加入相应体积的裂解液进行匀浆,离心收集上清(如有粘稠物可超声处理,具体方法见细胞培养的样品制备,也可以冷冻干燥降解核酸后,将冻干的蛋白质样品溶解在适当的上样 buffer中,混匀后静置3小时使样品中的蛋白质充分的溶解,有5分钟即可,4度离心收集。)加入Laemmli样品缓冲液(视蛋白样品浓度,以1:1或1:2的比例混合)QL混匀,样品置100度的水浴箱水浴加热3-5分钟,10000g离心10分钟,取上清液,将其转入另一洁净的试管中,至此,电泳样品已准备就绪(样品即可立即使用也可也可以分装冻存,-20℃存放的样品可稳定保持数月。)
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