内布拉斯加犊牛腹泻病毒抗体特异性产品特点:
研究领域:肿瘤 心血管 细胞生物 免疫学 发育生物学
抗体来源:Mouse
克隆类型:Monoclonal
克 隆 号:7H1
交叉反应:Human,
产品应用:IHC-P=1:200-800 IHC-F=1:500-1000 ICC=1:100-500 IF=1:500-1000 (石蜡切片需做抗原修复) not yet tested in other applications.optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
分 子 量:14kDa
细胞定位:分泌型蛋白 细胞核 细胞浆 细胞膜
性 状:Lyophilized or Liquid
浓 度:1mg/ml
免 疫 原:Recombinant human Cystatin C Protein:
亚 型:IgG
纯化方法:affinity purified by Protein G
储 存 液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存条件在20℃储存一年。避免重复冻融循环。冻干抗体在室温下稳定至少一个月,保持在20℃以上一年以上。当在无菌pH 7.4、抗体130M或抗体稀释液中重组时,抗体在2-4℃下稳定至少两周。
文献引用:
内布拉斯加犊牛腹泻病毒抗体特异性背景:
基质金属蛋白酶(MMP)家族的蛋白质参与细胞外基质在正常生理过程中的分解,如胚胎发育、生殖和组织重塑,以及在疾病过程中,如关节炎和转移。大多数MMP分泌为非活性的前蛋白,当被胞外蛋白酶裂解时被激活。该基因编码一种降解IV胶原的酶,它是基底膜的主要结构成分。该酶在子宫内膜月经破裂、血管化调节和炎症反应中起作用。该基因的突变与温彻斯特综合征和Nodulosis Arthropathy Osteolysis(NAO)综合征有关。发现了两个编码不同亚型的转录变体。[由RefSeq提供]。
功能:
泛素金属蛋白酶参与多种功能,如血管重塑、血管生成、组织修复、肿瘤浸润、炎症和粥样斑块破裂。以及降解细胞外基质蛋白,也可以作用于几个非基质蛋白,如大内皮1和β型降钙素基因相关肽促进血管收缩。同时在GLY-LYU键上切割吻。似乎在心肌细胞死亡途径中起作用。通过调节GSK3-β的活性参与心肌氧化应激。体外切割GGSK-β。
PEX是MMP2的C端非催化性片段,具有抗血管生成和抗肿瘤的作用,YZFGF2和玻连蛋白的细胞迁移和细胞黏附。血管表面的整合蛋白/β3配体。
异构体2:介导CYK/IKKA的蛋白水解,并通过诱导炎性NF-κB、NFAT和IRF转录途径激活线粒体核应力信号来启动原发性先天免疫应答。
Subunit:
相互作用(通过C-末端血凝蛋白样结构域包含整合素α-v/BETA-3);相互作用促进血管生成血管和黑色素瘤细胞的血管浸润。相互作用(通过C-端PEX域)与TIMP2(通过C-末端);相互作用YZ降解活性。与GSK3B相互作用。
亚细胞定位:
异构体1:分泌,细胞外空间,细胞外基质。膜。细胞核。注释=在血管生成的血管和黑色素瘤的膜表面上用整合素α/β3共定位。在线粒体、微纤丝和心肌细胞的细胞核中发现。
异构体2:Cytoplasm。线粒体。
组织特异性:
由正常皮肤成纤维细胞产生。PEX在多种肿瘤中表达,包括胶质瘤、乳腺癌和前列腺癌。
翻译后修饰:
多个位点上的磷酸化调节酶活性。PKC体外磷酸化。前肽由MMP14(MT-MMP1)和MMP16(MT-MMP3)处理。自催化裂解在C-末端产生抗血管生成肽,PEX。这种处理似乎通过结合整合素/BETA3促进。
疾病:
MMP2的缺陷是Turg -温彻斯特综合征(TWS)的原因[MIM:259600 ];也称为多ZX溶骨性结节病和关节病(MONA)。TWS是常染色体隐性骨溶解综合征。严重骨质疏松和骨质减少。皮下结节通常不存在。托雷温彻斯特综合征与一些额外的特征相关,包括粗面、角膜混浊、增厚斑块、色素过多的皮肤、多毛症和牙龈肥大。然而,这些特征并不总是存在,并偶尔观察到其他骨溶解综合征。
相似性:
属于肽酶M10A家族。
包含3型纤连蛋白II型结构域。
包含4个血红素结合蛋白样结构域。
1.FAK 局部粘着斑激酶,是一种酪氨酸激酶;肿瘤细胞的侵袭性生长是一个多步骤的复杂过程,有多种生物化学因子参与其中,局部粘着斑激酶(focal adhesion kinase, FAK)介导的信号转导系统就是其中Z为重要的细胞信号转导途径之一。肿瘤细胞必须黏附于细胞外基质,通过促进依赖于PTK激酶活性的细胞外基质信号转导,进而影响细胞的黏附、运动与迁移。
2.粘着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)是整合蛋白介导的信号转导中的重要成员,有酪氨酸蛋白激酶活性,并可自身磷酸化;为信号分子的FAK,还与细胞内其他信号转导通路存在串话(crosstalk),直接参与了细胞多种功能的调节。
3.尽管FAK的确切功能尚不清楚,但若干实验均提示FAK可能有两个作用,一是在细胞铺展和移动时,FAK参与粘着斑形成和调节;二是FAK参与信号转导过程,以告知细胞核其细胞已锚定了。近年有关FAK在细胞凋亡中的作用也业已肯定。
多聚甲醛固定,石蜡包埋(小鼠脑);用柠檬酸钠缓冲液(pH6.0)煮沸15min后获得抗原;用3%过氧化氢阻断内源性过氧化物酶20分钟;阻断缓冲液(正常山羊血清)37℃30min;用(MMP2)多克隆抗体进行抗体孵育在4℃下,在1∶400的夜晚,TICORE,未结合(BS-0412R),然后按照SP试剂盒(兔)(SP-023)指令和DAB染色进行操作。
空白控件(蓝色行):Hela(蓝色)。
原代抗体(绿线):兔抗MMP2抗体(BS-0412R)
稀释度:1μg/10 ^ 6细胞;
同种型对照抗体(橙色线):兔IgG。
二抗(白蓝线):山羊抗兔IgG FITC
稀释度:1μg/次。
协议
用80%甲醇(5℃-20℃)固定细胞,室温下用0.1% pB-TWEN渗透20分钟。在室温下用一次抗体染色细胞30分钟。然后在1×PBS/2% BSA/10%山羊血清中孵育细胞以阻断非特异性蛋白质-蛋白质相互作用,然后在室温下用抗体15分钟。第二抗体在室温下使用40分钟。进行20000个事件的采集。