广州吉妮欧提供荧光定量PCR服务
: : 罗
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随着时间的推移,病程不是一成不变的,而以人本身作为研究的对象来深入探讨疾病发生机制是无法快速完成的。因此借助于动物模型的间接研究,将疾病在动物体内重现,有助于更方便,更有效地认识疾病的发SF展规律。我公司为广大科研单位及科研工作者提供一个快捷方便的实验条件,对多种疾病进行相关的实验动物造模服务,特别是移植性肿瘤疾病动物模型。欢迎广大科研工作者及单位相关实验事宜。
*部分 疾病动物模型
一.肿瘤动物模型
根据肿瘤动物模型的制备方法或者来源分为三大类
1. 自发性肿瘤动物模型
优点:发病机制及机理较接近人。缺点:数量及种类非常有限,无法满足实验的需要。
2. 诱发性肿瘤动物模型
优点:发病机制及机理也较接近人。缺点:几乎所有诱发剂对人体都有很大的伤害性,对实验人员存在较大的风险;实验周期非常长,且诱发成功的时间不一致,无法在同一条件下大批量实验。
3. 移植性肿瘤动物模型
优点:可以在同一条件下大批量移植,实验周期较短,对动物的治病机制亦与人类相似,已成为目前应用Z为广泛的造模方法。
模型类型 | 移植部位 | 细胞类别 |
肺癌 | 肺脏 皮下 | |
癌 |
皮下 | |
结肠癌 | 结肠壁 皮下 | |
肝癌 | 门静脉 肝脏 皮下 | |
胃癌 | 胃体 皮下 腹腔 | |
直肠癌 | 直肠壁 皮下 | |
乳腺癌 | 乳腺 皮下 | |
肾癌 | 肾实质 肾被膜 皮下 | |
膀胱癌 | 膀胱壁 皮下 | |
黑色素瘤 | 皮下 | |
多发性瘤 | 腔 血管内 皮下 | |
二.其它疾病动物模型
模型种类 | |
糖尿病 | 自发性 动物自然发生的疾病, 与人类某种疾病有相似之处 ,或通过遗传育种培养而保留下来的疾病动物。db /db 小鼠由 C57BL KsJ 近亲交配株常染色体隐性遗传衍化而来 ,属 2 型糖尿病模 型。一个月时开始贪食及发胖, 继而产生高 血糖、高血胰岛素, 胰高血糖素也升高。 诱发性 通过化学药物特异性破坏胰岛β 细胞,Z常用的药物有链脲佐菌素和四氧嘧啶,具有造模 稳定,快速。 |
肝损伤 | 导致的肝损伤主要有化学性肝损伤、药 物性肝损伤、免疫性肝损伤和酒精性肝损伤等类 型,其临床表现为肝坏死、脂肪肝、肝纤维化、肝硬 化以及肝癌等。 1. 化学性 常用化学性肝有害物质有四氯化碳 (CCl4 )、氨基半乳糖(D-gal)、硫代乙酰胺、黄曲霉 素等。 2. 药物性 对乙酰氨基酚、异烟肼、环孢素 A、四环素和雷公藤等。 3. 免疫性 卡介苗(BCG)加脂多糖(LPS)诱导法,刀豆蛋白 A(ConA)诱导法。 4. 酒精性 动物过量饮酒可造成 肝脏不同程度的损害,轻度发展为脂 肪肝、肝纤维化 ,重度可发展为肝硬变或肝细胞癌。 |
脂肪肝 | 脂肪肝成为国内高发疾病, 普通人群的发病率约为 10%左右, 已出现逐年升高的趋势。目前Z常用的方法是高脂饮食,该方法简便、 重复性好、 价格低廉、 动物死亡 率低、 复制率高。 |
乙肝 | 通过显微注射法将HBV 基因组注入核内,建立血清中可稳定复制和表达 HBsAg的 HBV 转基因小 鼠 。可用于开展抗病有害药物和乙 肝发病机制的研究工作。 |
脊髓损伤 | 脊髓损伤是一种致残率很高的疾 病, 给家庭、社会均带来沉重的负担。 随着工业、建筑业和交通 运输的飞速发展, 脊髓损伤患者数量呈逐年上升趋势。常用的造模方法有以下几种 1. 脊髓撞击伤模型 2. 脊髓压迫伤模型 3. 脊髓横断损伤 4. 脊髓牵拉损伤模型 5. 脊髓缺血性损伤 |
脑中风 | 脑中风是又称脑血管意外,是世界上Z重要的致死性疾病之一。以脑部缺血及出血性损伤症状为主要临床表现的疾病,具有极高的病死率和致残率,主要分为出血性脑中风和缺血性脑中风,以脑梗塞Z为常见。 1. 缺血性 线栓法、开颅电凝法、光化学法、微栓子栓塞法、去除大鼠脑左侧皮层血管法 2. 出血性 自体血注入法、自发性、胶原酶注入法 |
实验室收费标准
表1.实验动物代养收费标准
动物品种 | 饲养管理费(元/只/天) |
小鼠 | 2 |
大鼠 | 4 |
免疫缺陷鼠(裸鼠,nod-scid) | 4 |
疾病模型鼠 | 5 |
备注:EVC笼位4元/只/天
表2. 动物实验常规操作收费标准
操作项目 | 费 用 |
小鼠(元/只/次) | 大鼠(元/只/次) |
注射 | 1.5 | 2 |
灌胃 | 3 | 3 |
采血 | 3 | 3 |
剖检 | 10 | 10 |
备注:1. 表中注射为腹腔、皮下、肌肉、皮内注射
2. 上述注射、灌胃、采血均为单次。
表3. 动物实验特殊操作收费标准
操作项目 | 费 用 |
小鼠(元/只/) | 大鼠(元/只/) |
门静脉注射 | 50 | 50 |
实质注射 | 30 | 30 |
肝脏实质注射 | 30 | 30 |
尾静脉(1次/天) | 10 | 10 |
糖耐量实验 | 100 | 100 |
畸胎瘤实验 | 3000/珠细胞 多应用于干细胞的多能性评价 |
表4. 动物实验重复操作收费标准
尾静脉注射 | 费 用 |
小鼠(元/只/) | 大鼠(元/只/) |
单次 | 10 | 10 |
2-5次/天 | 50 | 50 |
6-10次/天 | 80 | 80 |
表5. 模型鼠收费标准
鼠种 | 费 用(元/只/) |
价格(元/只/) | Z低购买量(只) |
C57 | 200 | 20 |
裸小鼠 | 350 | 16 |
Nod-scid | 500 | 16 |
注:细胞及其他费用另算。
CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。在细菌及古细菌中,CRISPR系统共分成3类,其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白(Cas蛋白)共同发挥作用,而Ⅱ类系统只需要一种Cas蛋白即可,这为其能够广泛应用提供了便利条件[1]。
目前,来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用Z为广泛。Cas9 蛋白(含有两个核酸酶结构域,可以分别切割DNA 两条单链。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物,然后通过PAM序列结合并侵入DNA,形成RNA-DNA复合结构,进而对目的DNA双链进行切割,使DNA双链断裂。
由于PAM序列结构简单(5’-NGG-3’),几乎可以在所有的基因中找 到大量靶点,因此得到广泛的应用。CRISPR-Cas9系统已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物细胞,是目前ZGX的基因组编辑系统[1]。
通过基因工程手段对crRNA和tracrRNA进行改造,将其连接在一起得到sgRNA(single guide RNA)。融合的RNA具有与野生型RNA类似的活力,但因为结构得到了简化更方便研究者使用。通过将表达sgRNA的原件与表达Cas9的原件相连接,得到可以同时表达两者的质粒,将其转染细胞,便能够对目的基因进行操作
CRISPR与RNAi的区别:
方法 | 靶标 | 质粒构件 | 基因下调 | 基因敲除 | 基因定点突变或多点突变 | 基因组改变 | 遗传密码子改变 | 表型改变 |
RNia(siRNA,shRNA | mRNA(转录水平) | 简单 | YES | | NO | NO | NO | NO |
CRISPR | DNA序列(基因组水平) | 简单 | | YES | YES | YES | YES | YES |
TALEN | DNA序列(基因组水平) | 复杂 | | YES | YES | YES | YES | YES |
技术优势: ※操作简单,靶向精确性更高。
※可实现对靶基因单个位点或多个位点同时敲除。
※也可同时对多个靶基因进行敲除。
※可应用于任何物种。
※CRISPR/Cas9系统是由RNA调控的对DNA的修饰,其基因修饰可遗传。
※拥有CRISPR/Cas9腺病毒/慢病毒系统,对分裂期和非分裂期细胞均有感染作用。
客户提供:
1.物种、基因名称或者基因ID;
2.提供靶细胞。