微量双链 DNA 定量试剂盒1mL成分产品介绍:
微量双链 DNA 定量试剂盒1mL成分使用方法:
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂:7 M 醋酸铵、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液.
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5~10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷无水乙醇,-20℃放置 30~60 分钟。
7. 离心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注:通过第 5~8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP,如要 完全将其除去时,乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用苯酚抽 提除去蛋白质时,请在第 8 步之后进行。
微量双链 DNA 定量试剂盒1mL成分确定洗膜温度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此条件下的Z佳洗膜温度比 Tm 低 5-12℃,一般情况下可以在 55℃进行洗膜。Oligo 探针可以室温洗膜。 四、预杂交步骤 预杂交就是用不含探针的超级杂交液跟印迹膜进行孵育,其目的是用所含 的非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物将印 迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭,否则这些位点会吸附标记的探 针,造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的 6× SSC 溶液中,使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋Z好预先封口,再剪掉一角, 留一个小口),按每平方厘米印迹膜加 0.2 mL 超级杂交液的比例沿小口 加入超级杂交液,然后用塑料封口机将口封牢。 3. 将此塑料袋浸没入温度设定在Z佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中,保 温 1-2 小时,延长到 12-16 小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停 的摇动状态中,使超级杂交液与印迹膜充分接触。
杂交步骤:
1. 如果标记的探针是双链核酸,则需经变性处理。具体操作是:根据探针浓 度和杂交所需探针的量计算出所需的探针体积,取出所需体积的探针到一 干净的硅化的塑料离心管中,加入等体积的本产品,吹打混匀后室温放置 5 分钟变性后,将探针样品放入冰浴中冷却,加入 0.05 倍体积的自备的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等体积的自备的 0.4 M 的 HCl 溶液。 将探针样品保存在冰浴中直至需要。如果是单链 DNA 或 RNA 探针,则 不需变性,直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率 而定,一般要求终浓度不能低于 1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷 贝基因,探针的加入量应加大,而对于检测克隆的基因片段,则探针的量 可减少。如果是放射性探针,应将此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3. 在选定的杂交温度下继续保温,时间一般为 6-12 小时。 六、洗膜步骤。注意在下面的所有操作过程中,一定不要使印迹膜干燥。
辅酶Ⅰ(+4°C)Coenzyme IBR90%1g
GE859-250MGG-418 sulfate [Geneticin]108321-42-2250MG74
ER1161BfmI (SfcI)200 units3
SM0613O`RangeRuler 50bp DNA Ladder, ready-to-use
埃文斯蓝5gLBE05鼠抗人CD5单抗66
L0663-5GLysozyme 溶菌酶12650-88-35g
饼酮肟50g
Phosphoramidon
酚红 Chlorophenol Red Ind 5g
化硝基四氮唑蓝 Chloride, NBT BR 250mg
玫瑰红B Rose Red B AR 25g
玫红酸 Rhodo acid AR 25g
依帕司他 Epalrestat 82159-09-9 >99%
依帕司他 Epalrestat 82159-09-9 >99%
盐酸表 Epirubicin HCl 56390-09-1 >98%,BR
盐酸表 Epirubicin HCl 56390-09-1 >98%,BR
小鼠可溶性肌球蛋白重链1(sMHC-1)ELISA试剂盒 ,英文名: sMHC-1 ELISA Kit
大鼠甲状旁腺激素(PTH)ELISA检测试剂盒RatParathyroidhormone,PTHELISAKit 96T/48T
人蛋白酶激活复合体亚基2(PSME2)免疫试剂盒 Human PSME2 ELISA kit
Ratovariancancermarker-CA125ELISAKit大鼠卵巢癌标志物CA125ELISA试剂盒规格:96T/48T
G-B细胞活力和凋亡检测试剂盒50次
MousesolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISA试剂盒小鼠可溶性血管内皮细胞蛋白C受体(sEPCR)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠基脲敏感性胺氧化酶(SSAO)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人鳞状上皮细胞癌抗原2(SCCAg-2)免疫试剂盒 Human SCCAg-2 ELISA Kit
Porcineadiponectin,ADPELISAKit猪脂联素(ADP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
石蜡切片组织βAMYLOID蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒10/20次
HumanRelaxin,RLNELISA试剂盒人松弛肽/松弛素(RLN)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanTumornecrosisfactorβ,TNF-βELISAKit人坏死因子β(TNF-β)ELISA试剂盒规格:96T/48T
鸡FMS样酪酸激酶3(Flt3)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人乙肝表面抗原大蛋白(HBV-LP)免疫试剂盒 Human Hepatitis B Virus Large Surface Protein,HBV-LP ELISA kit
人抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒 ,英文名: AT ELISA Kit
RatFolicacid,FAELISA试剂盒大鼠叶酸(FA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanenkephalin,ENKELISA试剂盒人脑啡肽(ENK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanHepatitisDvirusIgM,HDVIgMELISAKit人丁型肝炎IgM(HDVIgM)ELISA试剂盒规格:96T/48T
微量双链 DNA 定量试剂盒1mL成分大鼠碳酸酐酶(CA)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人脱-γ-羧基凝血酶原(DCP)免疫试剂盒 Human des-gamma-carboxy-prothrombin,DCP ELISA Kit
植物可溶性糖含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样
RatsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISA试剂盒大鼠可溶性凋亡相关因子(sFAS/Apo-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanintestinalfattyacidbindingprotein,iFABPELISA试剂盒人肠脂肪酸结合蛋白(iFABP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanmyosinlightchainkinase,MLCKELISAKit人肌球蛋白轻链激酶(MLCK)ELISA试剂盒规格:96T/48T