小牛胸腺 DNA 溶液1mL介绍产品介绍:
小牛胸腺 DNA 溶液1mL介绍使用方法:
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂:7 M 醋酸铵、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液.
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5~10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷无水乙醇,-20℃放置 30~60 分钟。
7. 离心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注:通过第 5~8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP,如要 完全将其除去时,乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用苯酚抽 提除去蛋白质时,请在第 8 步之后进行。
小牛胸腺 DNA 溶液1mL介绍确定洗膜温度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此条件下的Z佳洗膜温度比 Tm 低 5-12℃,一般情况下可以在 55℃进行洗膜。Oligo 探针可以室温洗膜。 四、预杂交步骤 预杂交就是用不含探针的超级杂交液跟印迹膜进行孵育,其目的是用所含 的非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物将印 迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭,否则这些位点会吸附标记的探 针,造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的 6× SSC 溶液中,使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋Z好预先封口,再剪掉一角, 留一个小口),按每平方厘米印迹膜加 0.2 mL 超级杂交液的比例沿小口 加入超级杂交液,然后用塑料封口机将口封牢。 3. 将此塑料袋浸没入温度设定在Z佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中,保 温 1-2 小时,延长到 12-16 小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停 的摇动状态中,使超级杂交液与印迹膜充分接触。
杂交步骤:
1. 如果标记的探针是双链核酸,则需经变性处理。具体操作是:根据探针浓 度和杂交所需探针的量计算出所需的探针体积,取出所需体积的探针到一 干净的硅化的塑料离心管中,加入等体积的本产品,吹打混匀后室温放置 5 分钟变性后,将探针样品放入冰浴中冷却,加入 0.05 倍体积的自备的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等体积的自备的 0.4 M 的 HCl 溶液。 将探针样品保存在冰浴中直至需要。如果是单链 DNA 或 RNA 探针,则 不需变性,直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率 而定,一般要求终浓度不能低于 1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷 贝基因,探针的加入量应加大,而对于检测克隆的基因片段,则探针的量 可减少。如果是放射性探针,应将此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3. 在选定的杂交温度下继续保温,时间一般为 6-12 小时。 六、洗膜步骤。注意在下面的所有操作过程中,一定不要使印迹膜干燥。
三(羟甲基)甲基甘安酸Tricine SolarbioBR5g
V0990-100MGVancomycin xy7nochloride 盐酸万古霉素1404-93-9100mg43
ER1411ApaI3000 units3
P0380-25GL-Proline L-脯安酸147-85-325g
崩溃酶100g
三录化锑(*)Antimony trichloride (*)AR500g
SM1331GeneRuler 1 kb Plus DNA Ladder154
J588-5GEPPS (HEPPS) N-2-羟以级派嗪-Ni3-丙磺酸16052-06-55g
4-录-1-奈酚5g
聚乙二醇 20000250g
奎宁 Quinine sulfate 进分 25g
D-α-丙胺酸 D-α-alanine BR 1g
L-α-丙酸 L-α-alanine BR 5g
β-丙酸 β-alanine BR 25g
卡维地洛 Carvedilol 72956-09-3 > 99%,EP
卡维地洛 Carvedilol 72956-09-3 > 99%,EP
卡维地洛 Carvedilol 72956-09-3 > 99%,EP
卡维地洛(标准品) Carvedilol 72956-09-3 HPLC>98%,标准品
小鼠抗凝血酶Ⅲ抗体(AT-Ⅲ)ELISA试剂盒 ,英文名: AT-Ⅲ ELISA Kit
大鼠核因子κB受体活化因子配基(RANKL)ELISA检测试剂盒RatreceptoractivatorofnuclearfactorkappaBligand,RANKLELISAKit 96T/48T
人胆红素氧化代谢物 免疫试剂盒 Human Biopyrrin ELISA Kit
Ratplaet-derivedgrowthfactor,PDGFELISAKit大鼠血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
GST融合蛋白阳性表达点状印迹筛选试剂盒10次
Mousethyroxine,T4ELISA试剂盒小鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人磷酸葡萄糖酸脱氢酶(PGD)免疫试剂盒 Human phosphogluconate dehydrogenase,PGD ELISA kit
PorcineCorticosterone,CORISAKit猪皮质同/肾上腺同(CORT)ELISA试剂盒规格:96T/48T
水质污染ATP生物发光法定量检测试剂盒50次
Humanrudimentalbovineserumalbumincheck-upELISA试剂盒人的牛血清白蛋白残留检测ELISA试剂盒规格:96T/48T
humanUDP-glucoseceramideglucosyltransferaseELISAKit人尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
猴胰岛素(INS)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胰蛋白酶原Ⅱ(Try-Ⅱ)免疫试剂盒 Human Trypsinogen-2,Try-ⅡELISA Kit
人抗神经节苷脂抗体(GM1)ELISA试剂盒 ,英文名: GM1 ELISA Kit
Ratgrowthhormone,GHELISA试剂盒大鼠生长激素(GH)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humaneyemuscleantibody,EMAbELISA试剂盒人抗眼肌抗体(EMAb)ELISA试剂盒规格:96T/48T
Humanhypoxia-induciblefactor1α,HIF-1αELISAKit人低氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小牛胸腺 DNA 溶液1mL介绍大鼠脱氢表雄酮酯(DHEA-S)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人微管相关蛋白2(MAP-2)免疫试剂盒 Human MAP-2 ELISA Kit
血清游离胆固醇(FC)含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样
RatP-SelectinELISA试剂盒大鼠P选择素(P-Selectin/CD62P)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanInterleukin11,IL-11ELISA试剂盒人白介素11(IL-11)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanMotilin,MTLELISAKit人血管活性肠肽(VIP)ELISA试剂盒规格:96T/48T