鲱鱼精 DNA 溶液1mL特点产品介绍:
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鲱鱼精 DNA 溶液1mL特点使用方法:
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂:7 M 醋酸铵、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液.
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5~10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4(pH 4.5)。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL(2.5 倍)的冷无水乙醇,-20℃放置 30~60 分钟。
7. 离心回收沉淀,用 70%的冷乙醇清洗沉淀,真空干燥。
8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注:通过第 5~8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP,如要 完全将其除去时,乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用苯酚抽 提除去蛋白质时,请在第 8 步之后进行。
鲱鱼精 DNA 溶液1mL特点确定洗膜温度:
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液,在此条件下的Z佳洗膜温度比 Tm 低 5-12℃,一般情况下可以在 55℃进行洗膜。Oligo 探针可以室温洗膜。 四、预杂交步骤 预杂交就是用不含探针的超级杂交液跟印迹膜进行孵育,其目的是用所含 的非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物将印 迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭,否则这些位点会吸附标记的探 针,造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的 6× SSC 溶液中,使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中(塑料袋Z好预先封口,再剪掉一角, 留一个小口),按每平方厘米印迹膜加 0.2 mL 超级杂交液的比例沿小口 加入超级杂交液,然后用塑料封口机将口封牢。 3. 将此塑料袋浸没入温度设定在Z佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中,保 温 1-2 小时,延长到 12-16 小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停 的摇动状态中,使超级杂交液与印迹膜充分接触。
杂交步骤:
1. 如果标记的探针是双链核酸,则需经变性处理。具体操作是:根据探针浓 度和杂交所需探针的量计算出所需的探针体积,取出所需体积的探针到一 干净的硅化的塑料离心管中,加入等体积的本产品,吹打混匀后室温放置 5 分钟变性后,将探针样品放入冰浴中冷却,加入 0.05 倍体积的自备的 1 M 的 Tris-Cl 溶液(pH 7.2)以及等体积的自备的 0.4 M 的 HCl 溶液。 将探针样品保存在冰浴中直至需要。如果是单链 DNA 或 RNA 探针,则 不需变性,直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中(先用剪 刀剪一小口,加入探针后用热封机封口)。探针的加入量视探针标记效率 而定,一般要求终浓度不能低于 1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷 贝基因,探针的加入量应加大,而对于检测克隆的基因片段,则探针的量 可减少。如果是放射性探针,应将此塑料袋套在另一塑料袋之中,以避免 杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3. 在选定的杂交温度下继续保温,时间一般为 6-12 小时。 六、洗膜步骤。注意在下面的所有操作过程中,一定不要使印迹膜干燥。
DL-苏安酸DL-ThreoninepR5g
V0990-1GVancomycin xy7nochloride 盐酸万古霉素1404-93-91g44
ER1421Bme1390I (ScrFI)500 units3
T8625-25GL-Threonine L-苏安酸72-19-525g
D-Ribose10g
琼脂条Article agarBR250g
SM1332GeneRuler 1 kb Plus DNA Ladder167
J562-100gTAPS,Free Acid29915-38-6100g
4-Acetylbipxenyl
Pectin, from citrus peel100g
基脲盐酸盐 Semicarbazide hydrochloride AR 25g
三乙酸 nitriloriacetic acid AR 250g
辛可宁 Cinchonine 进分 25g
秋水仙碱 Colchicine BR 1g
卡立普多 Carisoprodol 78-44-4 >99%,USP,BR
卡立普多 Carisoprodol 78-44-4 >99%,USP,BR
卡立普多 Carisoprodol 78-44-4 >99%,USP,BR
卡立普多(标准品) Carisoprodol 78-44-4 HPLC>98%,标准品
小鼠骨粘连蛋白(ON)ELISA试剂盒 ,英文名: ON ELISA Kit
大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ(PPAR-γ)ELISA检测试剂盒RatPeroxisomeProliferator-activatedreceptorγ,PPAR-γELISAKit 96T/48T
人臂板蛋白3A(Sema 3A)免疫试剂盒 Human Sema 3A ELISA Kit
Ratverylateappearingantigen,VLAELISAKit大鼠迟现抗原(VLA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
N-Ras鸟苷酸酶活性分析试剂盒6次
PorcineInsulin,INSELISA试剂盒猪胰岛素(INS)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Rat follistatin (FS) ELISA Kit 大鼠卵泡抑素(FS)ELISA试剂盒
humanthyroidstimulatingimmunoglobulin,TSIELISAKit 人甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humananti-nucleolusantibody,ANAELISA试剂盒人抗核仁抗体(ANA)ELISA试剂盒规格:96T/48T
植物糖类总量铁比色法定量检测试剂盒20次
humanUDP-glucoseceramideglucosyltransferaseELISAKit人尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)ELISA试剂盒规格:96T/48T
猴可溶性血管细胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人胰蛋白酶(trypsin)免疫试剂盒 Human trypsin ELISA Kit
人抗杀菌通透性蛋白抗体(BPI-Ab)ELISA试剂盒 ,英文名: BPI-Ab ELISA Kit
RatHaptoglobin,Hpt/HPELISA试剂盒大鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanFactorⅧ-relatedAntigen,FⅧAgELISA试剂盒人第八因子相关抗原(FⅧAg)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanICEprotease-activatingfactor,IRAPELISAKit人ICE蛋白酶激活因子(IRAP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
鲱鱼精 DNA 溶液1mL特点大鼠脱氧酚/脱氧啉(DPD)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
人微管相关蛋白tau(MAPT)抗体免疫试剂盒 Human microtubule-associated protein tau (MAPT) antibody ELISA kit
血清游离胆固醇(FC)含量测试盒 可见分光光度法 50管/48样
RatProteinPhosphatase,PPELISA试剂盒大鼠蛋白磷酸酶(PP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanInterleukin10,IL-10ELISA试剂盒人白介素10(IL-10)ELISA试剂盒规格:96T/48T
HumanMothersagainstdecapentaplegichomolog7,Smad7ELISAKit人Smad7ELISA试剂盒规格:96T/48T