中华根瘤菌通用PCR检测试剂盒规格

应用案例

中华根瘤菌通用PCR检测试剂盒规格样品 DNA 的制备
1.用自选方法纯化样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒 DNA 提取试剂盒兼 容。。也可以选购本公司的一管式病毒 DNAout 或其升级版柱式病毒 DNAout。 本试剂盒免费赠送 15 次 DNA 病毒裂解液SY装（一管式病毒 DNAout 的成分）。
稀释阳性对照（以 10E2-10E7 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供可以直接使用的长为 86bp 的 DNA 片段作为阳性对照。
2.标记 6 个离心管，分别为 7，6，5，4，3，2。
3.用带芯枪头分别加入 45 μL 模板稀释液（用带芯枪头，下同）。
4.在 7 号管中加入 5 μL 1×10E8 拷贝/μL 的阳性对照，充分震荡 1 分钟，得1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。5.换枪头，在 6 号管中加入 5 μL 1×10E7 拷贝/μL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
6.换枪头，在 5 号管中加入 5 μL 1×10E6 拷贝/μL 的阳性对照到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
7.换枪头，在 4 号管中加 5 μL 1×10E5 拷贝/μL 的阳性对照到 4 号管中，得1×10E4 拷贝/μL 的阳性对照。放冰上待用。
8.重复上面的操作直到得到 6 个稀释度的阳性对照。放冰上待用。设置 qPCR 反应（20  μL 体系，在样品制备室进行）
9.在 PCR 管中加入下列成分（待测样品需要做三次重复，下表只列出一次。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后*后加）

注意事项
1．基础程序；
2．扩增温度和延伸温度；
3．反应时间；
4．循环次数；
5．PCR 反应液的配制；
6．PCR技术的基本原理；
7．PCR的反应动力学；
8．PCR扩增产物；
9．PCR反应体系与反应条件。
普通PCR反应流程：

准备物品：
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀释液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                   1份
需要自备的器材：
1．仪器：分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯（DEPC）水处理的灭菌离心管、吸头（10 µL、200 µL、1000 µL）、灭菌双蒸水。
肿
2,6-Difluoro-4-formylpxenylboronic acid, pinacol ester 870717-92-3  Humaestoterone，TELISAKit人睾同(T)ELISA试剂盒规格：96T/48T

2-甲砜基乙酸乙酯 Ethyl 2-(Methylsulfonyl)acetate,97% 4455-15-6 5G 通用试剂  大鼠促性腺激素YZ激素(GnIH)ELISA试剂盒 ，英文名： GnIH ELISA Kit

酸性磷酸酶测试盒/ACP测试盒 比色法 50管/48样 国产  The swine major histocompatibility complex class III (MHC III /SLA III) ELISA Kit 猪主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHCⅢ/SLAⅢ)ELISA试剂盒

Oxysophoridine氧化槐定碱5克BR，98%  ELISA 小鼠凋亡因子BAX(mouse BAX) 48T/96T 进口分装

500904-61-0吉非罗齐相关物质AGeMfibrozil Related CoMpound A;(E,Z)-2,2-dimetxyl-5-[2,5-dimetxyl-4-(propene-1-yl)pxenoxy]valeric acid  CLIAKitforLMA(Humanai-livercellmembraneaibody)ELISAKit人抗肝细胞膜抗体规格：48T/96T
3-Propoxycarbonylpxenylboronic acid 850568-78-4  ELISAKitBGP/Gehrelin大鼠脑肠肽规格：48T/96T

盐酸育亨宾 Yohimbine Hydrochloride (≥98%,HPLC) 65-19-0 20MG 标准品  大鼠3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶(HMGCS)ELISA试剂盒 ，英文名： HMGCS ELISA Kit

DL-正亮酸/DL-正白酸/DL-正闪白基酸/DL-己酸/DL-原亮酸/DL-2-基正己酸/2-基己酸/ BR，98.5% 25克 国产/进口  Mouse somal cell derived factor 1A (SDF-1a/CXCL12) ELISA Kit 小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒

阿卡糖，英文名或英文缩写：Acarbose，级别：AR，98%，规格：20次/160ul/支  MouseColonCancerAigen,CCAELISAKit 小鼠结肠癌抗原(CCA)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

铋醋内 wo7ium BISMUTHcTq 13-99-4  CLIAKitforHumaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit人晚期糖基化终末产物受体规格：48T/96T
指示选择性培养基基础10克保存：-20℃  小鼠25羟基胆固醇(25-OHC)ELISA试剂盒 ，英文名： 25-OHC ELISA Kit

20769-85-12-溴-2-甲基2-Bromo-2-metxylpropionyl bromide  牛甘胆酸(CG)ELISA检测试剂盒Bovinecholyglycine,CGELISAKit 96T/48T

酸钾shēng huà shì jì容量：1克  人B群链球菌多糖抗体(IgG)免疫试剂盒 Human Ai-Group B Septococcal Type III Capsular Aibody IgG ELISA Kit

2，3-二基丁烷　标准品 2,3-DIMqTHYLBUTcNq 1979/9/8  英文名称MouseEGFELISAKit小鼠表皮生长因子(EGF)规格：96T/48T

碳酸铜shēng huà shì jì容量：RT5克  冰冻切片脂肪酸费斯克勒(Fischler)染色试剂盒50次
乳酸过氧化物酶，英文名或英文缩写：Lactoperoxidase from bovine milk，级别：0.2OD/each primer，规格：1克  Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine,MECELISA试剂盒人粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)ELISA试剂盒规格：96T/48T

9003-1-4聚酸Poly(acrylic acid)  组织游离胆固醇酶连续循环荧光定量检测试剂盒20次

Isomalto-oligosaccharide低聚麦芽糖1克AR  Humanglucocoicoidreceptor-α，GR-αELISAKit人糖皮质激素受体α(GR-α)ELISA试剂盒规格：96T/48T

3,5-二溴水杨全 3,5-Dibromosclicylcldqhydq 90-29-2  人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Histaminediphospate组胺嶙酸盐5克BR，98%  猪激素敏感性脂肪酶(HSL)免疫试剂盒 Pig hormone sensitive lipase,HSL ELISA Kit
D更生梅素500克BR，95%  ELISAKitS-100小鼠S100蛋白规格：48T/96T

(磺酸钠)  Chickeoxoplasmacirculatingaigen,TCAELISAKit鸡弓形虫循环抗原(TCA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

GibberellinA3赤霉酸200uUSP级，95-105%  人己糖激酶(HK)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

申标准溶液 crsqnic 7440-38-  小鼠肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)免疫试剂盒 Mouse Pulmonary Surfacta-associated protein C,SP-C ELISA kit

DL-脯酸shēng huà shì jì容量：RT100克  血栓素A2合成酶(TX-A2)ELISA试剂盒 ，英文名： TX-A2 ELISA Kit

PCR 法 DNA 探针标记试剂盒5次方法使用方法：
一、交换反应 1. 实验前需自备的试剂：7 M 醋酸铵、乙醇、70%乙醇等
2. 在微量离心管中制备下列反应液.
3. 37℃反应 30 分钟。
4. 70℃加热 5～10 分钟使酶失活。
5. 加入 10 μL 的 7 M CH3COONH4（pH 4.5）。如使用 CH3COONa 做 乙醇沉淀时使其终浓度达 300 mM。
6. 加入 87.5 μL（2.5 倍）的冷无水乙醇，-20℃放置 30～60 分钟。
7. 离心回收沉淀，用 70%的冷乙醇清洗沉淀，真空干燥。
8. 用适当 Buffer 溶解沉淀。 注：通过第 5～8 步操作几乎可以除去大部分未反应的[γ-32P] ATP，如要 完全将其除去时，乙醇沉淀后用凝胶过滤等方法精制即可。如需用苯酚抽 提除去蛋白质时，请在第 8 步之后进行。
PCR 法 DNA 探针标记试剂盒5次方法确定洗膜温度：
一般使用 0.1×SSC 做洗膜液，在此条件下的Z佳洗膜温度比 Tm 低 5-12℃，一般情况下可以在 55℃进行洗膜。Oligo 探针可以室温洗膜。 四、预杂交步骤 预杂交就是用不含探针的超级杂交液跟印迹膜进行孵育，其目的是用所含 的非特异性 DNA 分子(鲑精 DNA 或小牛胸腺 DNA)及其它高分子化合物将印 迹膜上会非特异地吸附探针分子的位点封闭，否则这些位点会吸附标记的探 针，造成高背景。
1. 将结合了靶分子的硝酸纤维素印迹膜或尼龙印迹膜浸泡于自备的 6× SSC 溶液中，使其充分湿润。
2. 将湿润的印迹膜置于一塑料杂交袋中（塑料袋Z好预先封口，再剪掉一角， 留一个小口），按每平方厘米印迹膜加 0.2 mL 超级杂交液的比例沿小口 加入超级杂交液，然后用塑料封口机将口封牢。 3. 将此塑料袋浸没入温度设定在Z佳杂交温度的恒温水浴中或杂交炉中，保 温 1-2 小时，延长到 12-16 小时亦可。注意保温过程中塑料袋应在不停 的摇动状态中，使超级杂交液与印迹膜充分接触。
杂交步骤：
1. 如果标记的探针是双链核酸，则需经变性处理。具体操作是：根据探针浓 度和杂交所需探针的量计算出所需的探针体积，取出所需体积的探针到一 干净的硅化的塑料离心管中，加入等体积的本产品，吹打混匀后室温放置 5 分钟变性后，将探针样品放入冰浴中冷却，加入 0.05 倍体积的自备的 1 M 的 Tris-Cl 溶液（pH 7.2）以及等体积的自备的 0.4 M 的 HCl 溶液。 将探针样品保存在冰浴中直至需要。如果是单链 DNA 或 RNA 探针，则 不需变性，直接使用。
2. 将单链探针或变性后的双链探针加入到完成了预杂交的杂交袋中（先用剪 刀剪一小口，加入探针后用热封机封口）。探针的加入量视探针标记效率 而定，一般要求终浓度不能低于 1-2 ng/mL。如果检测基因组中的单拷 贝基因，探针的加入量应加大，而对于检测克隆的基因片段，则探针的量 可减少。如果是放射性探针，应将此塑料袋套在另一塑料袋之中，以避免 杂交袋发生遗漏、污染工作环境。
3. 在选定的杂交温度下继续保温，时间一般为 6-12 小时。 六、洗膜步骤。注意在下面的所有操作过程中，一定不要使印迹膜干燥。
盐酸-L-胱安酸xy7nochloric acid-L-cystinepR5g

C7902-100GCalcium Chloride 录化钙10035-04-8100g42

SM1571NoLimits 2500bp DNA Fragment185

P0507-100GPVP 40 聚乙烯咯烷酮9003-39-8100g

二硫赤鲜醇5g
录化金(+4℃)(阴凉)Gold chloride (+4 ℃)AR1g

SM0223pUC19 DNA/MspI (HpaII) Marker, ready-to-use181

C4146-100GCM Cellulose 羧甲基纤维素9000-11-7100G

1-耐基磷酸钠1g

酶水解酪素100g
钯碳加氢催化剂  Palladium carbon hydrogenation catalysts  0.1  25g

铋酸钠  sodium bismuthate  AR  250g

玻璃纤维  Glass fiber    500g

沉降硫  precipitated sulfur  CP  500g
醋酸阿拉瑞林/丙氨瑞林   Alarelin Acetate  79561-22-1  >98%,BR

阿仑磷酸钠  Alendronate Sodium  121268-17-5  >99%,USP

阿仑磷酸钠  Alendronate Sodium  121268-17-5  >99%,USP

阿仑磷酸钠  Alendronate Sodium  121268-17-5  >99%,USP
小鼠酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA试剂盒 ，英文名： M2-PK ELISA Kit

大鼠钙调磷酸酶(CaN)ELISA检测试剂盒Ratcalcineurin,CaNELISAKit 96T/48T

人α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)免疫试剂盒 Human α-glucosidase ELISA Kit

英文名称MouseICAM-3ELISAKit小鼠细胞间粘附分子-3(ICAM-3)规格：96T/48T

SiRNA大量SperfusinX脂质体局灶法动物转染试剂盒5次

rabbitHyaluronicacid,HAELISA试剂盒兔子透明质酸(HA)ELISA试剂盒规格：96T/48T
Mousecarbonicanhydrase,CAELISAKit小鼠碳酸酐酶(CA)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠肌球蛋白(Myosin)ELISA检测试剂盒MouseMyosinELISAKit 96T/48T

人抗链球菌溶血素O抗体(IgG)免疫试剂盒 Human anti-streptolysin O antibody IgG ELISA Kit

Rabbitlymphocytefunctionassociatedantigen3,LFA-3ELISAKit兔淋巴细胞功能相关抗原3(LFA-3/CD58)ELISA试剂盒规格：96T/48T

细胞蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒-LEPTIN10/20次

Humanurinarybladdercancerantigen,UBCELISA试剂盒人膀胱癌抗原(UBC)ELISA试剂盒规格：96T/48T
鹅固醇合成急性调节蛋白(StAR)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

人血小板激活因子乙酰水解酶2，细胞质(PAFAH2)免疫试剂盒 Human Plaet-activating factor acetylhydrolase 2, cytoplasmic(PAFAH2)ELISA kit

人抗可溶性肝抗原抗体(SLA)ELISA试剂盒 ，英文名： SLA ELISA Kit

RatImmunoglobulinM,IgMELISA试剂盒大鼠免疫球蛋白M(IgM)ELISA试剂盒规格：96T/48T

HumanFreeerythrocyteproloporphyrin,FEPELISA试剂盒人游离原卟啉(FEP)ELISA试剂盒规格：96T/48T

Humanintegrin-linkedkinase1,ILK-1ELISAKit人整合素连接激酶1(ILK-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
PCR 法 DNA 探针标记试剂盒5次方法大鼠髓磷脂碱性蛋白(MBP)ELISA试剂盒 ，英文名： MBP ELISA Kit

人胃蛋白酶(Pepsin)ELISA检测试剂盒HumanPepsinELISAKit 96T/48T

鹿环磷酸鸟苷(cGMP)免疫试剂盒 Deer cyclic Guanosine monophosphate,cGMP ELISA Kit

CLIAKitforPRL(Rabbitprolactin)ELISAKit兔子催乳素规格：48T/96T

石蜡切片组织CYP1A2蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

ELISAKitCALD人钙调结合蛋白规格：48T/96T