液相内毒素清除剂100 次特点导致核酸降解的常见非酶因素原因:
机制溶液中残留重金属离子 磷酸二脂键的断裂 长期存放/光照产生的自由基 磷酸二脂键的断裂 UV 形成嘧叮二聚体 DEPC 使 RNA 中没配对的腺嘌呤羧甲基化,但对 双链核酸危害小 高温和低 pH 脱嘌啉反应(depurination) EB 导致可见光对 DNA 的光氧化 (photooxidation) 酚 其氧化产物使磷酸二脂键断裂 甲酰胺溶液 酸化后(pH 5)引起 RNA 降解 醚 残留过氧化物使磷酸二脂键的断裂 醇 残留重金属离子使磷酸二脂键的断裂 4℃ 短期保存的温度 -20℃ 如果溶液中有盐,将使核酸产生大量断裂 -70℃ 长期保存的温度,但冷凝状态下自由基 的破坏更活跃。
液相内毒素清除剂100 次特点产品介绍:
使用方法:
1. 将 10-30 mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到 50 mL 塑料离心管中。
2. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟,弃上清(血浆)。
3. 将 20 mL 溶液 A 加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将 6 mL 的溶液 B 和 4 mL 加入到离心管中,剧烈震荡 30 秒。
5. 12000-15000 g 室温离心 3-5 分钟,将上清液(为无色或浅红色)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过 25 mL,否则下一步不能加入等体积的溶液 C。为防止污染,Z好留少量上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有 DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
6. 加入等体积的溶液 C,充分颠倒混匀。
7. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后 12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加 25 mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 重复步骤 8 一次。
10. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的后续反应。
11. 将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入 1mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。
12. 12000-15000 g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern 杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳,因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA 产量产率测定:将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260 的 RNA=40 μg/mL),进而计算出 RNA 的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA 产量/组织用量)。人血 RNA 产率一般为 2-5 ug/mL。
15. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 2.0 左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR 等反应。
特点:
1. 常温保存时间长达半年,方便了拭子样品的野外采集和长途运输。
2. 使用广泛,适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、拭子等。
3. 价格实惠,提供的试剂足够保存 200 个拭子样品。
4. 跟各种纤维棉拭子兼容。但使用本公司专用拭子效果更佳(因为所有优化都是在此专用 拭子的基础上完成的,80801B 包装含 200 只专用拭子)。
5. 保存的拭子可以用柱式拭子 DNAout(CAT#:80801)提取其 DNA,从一个拭子一般 可以提取到 0.5 ug 左右的 DNA。
6. 一个样品可以用一个微型离心管保存,Z大程度地避免了样品间的交叉污染。
7. 试剂本身安全环保无毒。
兔(ADR)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human insulin-like growth factor 2 (IGF-2) ELISA Kit 人胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒
Humananti-typhusantibodyELISAKit 人抗斑疹伤寒抗体(anti-typhus-Ab)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanglycosylation-dependentcelladhesionmolecule-1,GlyCAM-1ELISA试剂盒人糖基化依赖的细胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织丁酰胆碱酯酶活性化学发光法定量检测试剂盒20次
humanmitogenactivatedproteinkinasekinase6,MKK6ELISAKit人丝裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)ELISA试剂盒规格:96T/48T
小鼠可溶性CD80(sCD80)ELISA试剂盒 ,英文名: sCD80 ELISA Kit
鸡α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA检测试剂盒Chickenα-GlucosidaseELISAKit 96T/48T
人Ⅳ型胶原(Col Ⅳ)免疫试剂盒 Human Collagen Type Ⅳ,COL Ⅳ ELISA Kit
英文名称MouseMGα1ELISAKit小鼠α1微球蛋白(MGα1)规格:96T/48T
冰冻切片组织CYTOCHROMEC蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次
RatComplementfragment4a,C4aELISA试剂盒大鼠过敏毒素/补体片断4a(C4a)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠雌激素受体(ER)ELISA试剂盒 ,英文名: ER ELISA Kit
Mouse aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III NT) ELISA Kit 小鼠Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠C反应蛋白(mouse CRP) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforLH促黄体生成素规格:48T/96T
通用型HPV6(HUMANPAPILLOMAVIRUS-6)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次
ELISAKitBNP猴子脑钠素/脑钠尿肽规格:48T/96T
MG-63, 人骨肉瘤细胞 Human
非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3
CD1D & B2M Others Human 人 CD1D & B2M Heterodimer 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
大鼠癌细胞;SHZ-88 肝癌细胞,BEL-7405细胞 MEF细胞,早代小鼠胚胎成纤维细胞
人微血管内皮细胞HMMEC
CEACAM5 Others Human 人 CEACAM5 / CD66e 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
肾系膜细胞生长添加物MCGS
TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
大鼠肺血管平滑肌细胞完全培养基 100mL
C6/36细胞,蚊子细胞 A-704(人肾癌细胞) 非洲绿猴肾细胞系/HCV-NS;Vero-HCV-NS
NRG1 Protein Canine 重组狗 NRG1-alpha 蛋白 (ECD)
L-O2(人正常肝细胞) 5×106cells/瓶×2 角膜上皮细胞Many types of cell
CNTFR Others Human 人 CNTFR / CNTFR-alpha 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0396NCI-H226(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2
人脉络丛上皮细胞微小RNAHCPEpiC miRNA5 μg
6T-CEM细胞,T细胞白血病 人巨细胞性肺癌细胞,801-D细胞 细胞
猫肾细胞;CRFK
ADAM15 Others Human 人 ADAM15 / MDC15 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0396NCI-H226(人肺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2
CNTFR Others Human 人 CNTFR / CNTFR-alpha 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人脉络丛上皮细胞微小RNAHCPEpiC miRNA5 μg
6T-CEM细胞,T细胞白血病 人巨细胞性肺癌细胞,801-D细胞 细胞
猫肾细胞;CRFK
ADAM15 Others Human 人 ADAM15 / MDC15 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
液相内毒素清除剂100 次特点22RV1(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-H043人肝实质细胞完全培养基100mL 人骨骼肌成肌细胞微小RNAHSkMM miRNA5 μg
CM-R097大鼠皮下脂肪细胞完全培养基100mL
CTLA4 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CTLA4 / CD152 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
UI-1细胞,人前列腺癌细胞 大鼠小肠隐窝上皮细胞,IEC-6细胞 人气管平滑肌细胞HTSMC
HOS(人骨肉瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
小鼠颗粒细胞MGC