一步法96 孔板单菌落质粒DNAout（ 离心法）5次特点

一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 离心法)5次特点产品介绍：

一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 离心法)5次特点导致核酸降解的常见非酶因素原因：
机制溶液中残留重金属离子 磷酸二脂键的断裂 长期存放/光照产生的自由基 磷酸二脂键的断裂 UV 形成嘧叮二聚体 DEPC 使 RNA 中没配对的腺嘌呤羧甲基化,但对 双链核酸危害小 高温和低 pH 脱嘌啉反应(depurination) EB 导致可见光对 DNA 的光氧化 (photooxidation) 酚 其氧化产物使磷酸二脂键断裂 甲酰胺溶液 酸化后(pH 5)引起 RNA 降解 醚 残留过氧化物使磷酸二脂键的断裂 醇 残留重金属离子使磷酸二脂键的断裂 4℃ 短期保存的温度 -20℃ 如果溶液中有盐,将使核酸产生大量断裂 -70℃ 长期保存的温度,但冷凝状态下自由基 的破坏更活跃。
一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 离心法)5次特点使用方法:
1. 将 10-30 mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到 50 mL 塑料离心管中。
2. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟，弃上清(血浆)。
3. 将 20 mL 溶液 A 加入到血液细胞沉淀中，用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将 6 mL 的溶液 B 和 4 mL 加入到离心管中，剧烈震荡 30 秒。
5. 12000-15000 g 室温离心 3-5 分钟，将上清液(为无色或浅红色)转移到另一干净离心管中。注意：转移的液体不要超过 25 mL，否则下一步不能加入等体积的溶液 C。为防止污染，Z好留少量上清液。下层有机相一般呈深红色，中间层为白色，含有 DNA，蛋白质和其他细胞破碎物，避免触及或吸取。
6. 加入等体积的溶液 C，充分颠倒混匀。
7. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中，每次转移后 12000-15000 g 室温离心半分钟，弃穿透液。
8. 加 25 mL 通用洗柱液，室温离心半分钟，弃穿透液。
9. 重复步骤 8 一次。
10. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要，否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的后续反应。
11. 将离心吸附柱转移到一个新的离心管中，加入 1mL RNA 洗脱液，室温放置 1-2 分钟。
12. 12000-15000 g 室温离心半分钟，离心管中溶液即为 RNA 样品，可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测：如果需要做 Northern 杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳，因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子（BioTechniques，28：414，2000）。
14. RNA 产量产率测定：将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度（1 OD260 的 RNA=40 μg/mL），进而计算出 RNA 的产量（浓度 X 体积)和产率(RNA 产量/组织用量)。人血 RNA 产率一般为 2-5 ug/mL。
15. RNA 纯度测定：无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 2.0 左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响 RT-PCR 等反应。

一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 离心法)5次特点特点：
1. 常温保存时间长达半年，方便了拭子样品的野外采集和长途运输。
2. 使用广泛，适用于各种拭子样品，包括口腔拭子、鼻腔拭子、拭子等。
3. 价格实惠，提供的试剂足够保存 200 个拭子样品。
4. 跟各种纤维棉拭子兼容。但使用本公司专用拭子效果更佳（因为所有优化都是在此专用 拭子的基础上完成的，80801B 包装含 200 只专用拭子）。
5. 保存的拭子可以用柱式拭子 DNAout（CAT#：80801）提取其 DNA，从一个拭子一般 可以提取到 0.5 ug 左右的 DNA。
6. 一个样品可以用一个微型离心管保存，Z大程度地避免了样品间的交叉污染。
7. 试剂本身安全环保无毒。

兔交联物(PY)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装

Human insulin (INS) ELISA Kit 人胰岛素(INS)ELISA试剂盒

Humanbacterialvaginosis,BVELISAKit 人细菌(BV)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

HumanGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISA试剂盒人糖原磷酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISA试剂盒规格：96T/48T

组织蛋白磷酸酶2A(PP2A)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次

Humanmonocytechemotacticprotein3,MCP-3ELISAKit人单核细胞趋化蛋白3(MCP-3/CCL7)ELISA试剂盒规格：96T/48T

小鼠巨嗜细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2)ELISA试剂盒 ，英文名： MCP-1/CCL2 ELISA Kit

鸡巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA检测试剂盒ChickenAlternativemacrophageactivation-associatedCCchemokine1,AmAC-1ELISAKit 96T/48T

人Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)免疫试剂盒 Human N-terminal procollagen Ⅲ propeptide,PⅢNP ELISA Kit

英文名称MouseTie-1ELISAkit小鼠Tie-1规格：96T/48T

冰冻切片组织ERBETA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒10/20次

ratCorticosterone,CORISA试剂盒大鼠皮质同/肾上腺同(CORT)ELISA试剂盒规格：96T/48T

大鼠垂体腺苷酸环化酶激活肽(ADCYAP1)ELISA试剂盒 ，英文名： ADCYAP1 ELISA Kit

Human STAT3 Protein Inhibitory molecule (PIAS3) ELISA Kit 人STAT3蛋白YZ分子(PIAS3)ELISA试剂盒

Rattissueinhibitorsofmetalloproteinase1,TIMP-1ELISAKit 大鼠基质金属蛋白酶YZ因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforCISAKit大鼠降钙素规格：48T/96T

细胞纤维二糖酶(cellobiase)活性比色法定量检测试剂盒20次

RatDopamineD1receptor,D1RELISAKit大鼠多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒规格：96T/48T

LncaP, 人前列腺癌细胞 Human

人肺细胞;HLF-a

CD8B Others Human 人 CD8B / P37 / LEU2 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

大鼠肝细胞;BRL 胆囊癌细胞，GBC-SD细胞 CBRH7919细胞，大鼠肝癌细胞(wistar大鼠)

小鼠心肌细胞MCM

LRRTM4 Others Human 人 LRRTM4 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

肝动脉平滑肌细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

TRIB2 Others Human 人 TRIB2 / TRB2 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)

人恶性色素瘤细胞;A-375 [A375]

RBL-2H3细胞，白血病细胞 永生化鼻咽上皮细胞系,NP69-SV40T细胞 CL-0232TF-1(人血白血病细胞)5×106cells/瓶×2

ZG仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-E2

TGFBI Others Human 人 BIGH3 /

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR / CAR 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

CL-0383MDA-MB-436(人癌细胞)5×106cells/瓶×2

人角膜上皮细胞总RNAHCEpiC tRNA

ZR75-1细胞，人癌细胞 129小鼠ES细胞,D3细胞 WM35, 人色素瘤细胞

MV3(人色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2

HUAEC Pellet 人脐动脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 神经细胞培养基NM-prf

CL-0383MDA-MB-436(人癌细胞)5×106cells/瓶×2

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR / CAR 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

人角膜上皮细胞总RNAHCEpiC tRNA

ZR75-1细胞，人癌细胞 129小鼠ES细胞,D3细胞 WM35, 人色素瘤细胞

MV3(人色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2

HUAEC Pellet 人脐动脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 神经细胞培养基NM-prf

一步法96 孔板单菌落质粒DNAout( 离心法)5次特点HPF-c 人类肺成纤维细胞(HPF) 500,000cells 腮腺细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

脑膜细胞Many types of cells包装：5 × 105次方(1ml)

RBP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 RBP4 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

HELF细胞，人胚肺成纤维细胞 鼠胚成骨细胞,3T3-E1细胞 CL-0146LTEP-a-2(人肺腺癌细胞)5×106cells/瓶×2

TM3(小鼠间质细胞) 5×106cells/瓶×2

小鼠淋巴细胞白血病;L1210