柱式分枝杆菌 DNAout50 次成分导致核酸降解的常见非酶因素原因:
机制溶液中残留重金属离子 磷酸二脂键的断裂 长期存放/光照产生的自由基 磷酸二脂键的断裂 UV 形成嘧叮二聚体 DEPC 使 RNA 中没配对的腺嘌呤羧甲基化,但对 双链核酸危害小 高温和低 pH 脱嘌啉反应(depurination) EB 导致可见光对 DNA 的光氧化 (photooxidation) 酚 其氧化产物使磷酸二脂键断裂 甲酰胺溶液 酸化后(pH 5)引起 RNA 降解 醚 残留过氧化物使磷酸二脂键的断裂 醇 残留重金属离子使磷酸二脂键的断裂 4℃ 短期保存的温度 -20℃ 如果溶液中有盐,将使核酸产生大量断裂 -70℃ 长期保存的温度,但冷凝状态下自由基 的破坏更活跃。
柱式分枝杆菌 DNAout50 次成分使用方法:
1. 将 10-30 mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到 50 mL 塑料离心管中。
2. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟,弃上清(血浆)。
3. 将 20 mL 溶液 A 加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将 6 mL 的溶液 B 和 4 mL 加入到离心管中,剧烈震荡 30 秒。
5. 12000-15000 g 室温离心 3-5 分钟,将上清液(为无色或浅红色)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过 25 mL,否则下一步不能加入等体积的溶液 C。为防止污染,Z好留少量上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有 DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
6. 加入等体积的溶液 C,充分颠倒混匀。
7. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后 12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加 25 mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 重复步骤 8 一次。
10. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的后续反应。
11. 将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入 1mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。
12. 12000-15000 g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern 杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳,因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA 产量产率测定:将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260 的 RNA=40 μg/mL),进而计算出 RNA 的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA 产量/组织用量)。人血 RNA 产率一般为 2-5 ug/mL。
15. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 2.0 左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR 等反应。
特点:
1. 常温保存时间长达半年,方便了拭子样品的野外采集和长途运输。
2. 使用广泛,适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、拭子等。
3. 价格实惠,提供的试剂足够保存 200 个拭子样品。
4. 跟各种纤维棉拭子兼容。但使用本公司专用拭子效果更佳(因为所有优化都是在此专用 拭子的基础上完成的,80801B 包装含 200 只专用拭子)。
5. 保存的拭子可以用柱式拭子 DNAout(CAT#:80801)提取其 DNA,从一个拭子一般 可以提取到 0.5 ug 左右的 DNA。
6. 一个样品可以用一个微型离心管保存,Z大程度地避免了样品间的交叉污染。
7. 试剂本身安全环保无毒。
a FABP Adipocyte Fatty Acid Binding Protein 脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白 48T/96T
Human high mobility group protein 1 (HMG-1) ELISA Kit 人高迁移率族蛋白1(HMG-1)ELISA试剂盒
rabbitInsulin-likegrowthfactor1,IGF-1ELISAKit 兔子胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforAISAKit大鼠抗胰蛋白酶规格:48T/96T
线粒体酸脱氢酶(SDH)活性比色法定量检测试剂盒20次
protein1/monocytechemotacticandactivatingfactor,MCP1/MCAFELISAKit兔子单核细胞趋化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠成纤维细胞生长因子13(FGF13)ELISA试剂盒 ,英文名: FGF13 ELISA Kit
Human T cell receptor (TCR) ELISA Kit 人T细胞受体(TCR)ELISA试剂盒
RatSolubleprotein-100,S-100ELISAKit 大鼠S100蛋白(S-100)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforCRF(Humancorticotropin-releasingfactor)ELISAKit人促肾上腺皮质激素释放因子规格:48T/96T
细胞血管紧张素Ⅰ转化酶2(ACE2)活性比色法定量检测试剂盒20次
RatcytochromeP450,CYP450ELISAKit大鼠细胞色素P450(CYP450)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠肠型脂肪酸结合蛋白(FABP2)ELISA试剂盒 ,英文名: FABP2 ELISA Kit
Human alpha 2 macroglobulin (alpha 2-MG) ELISA Kit 人α2巨球蛋白(α2-MG)ELISA试剂盒
RatCholecystokinin,CCKELISAKit 大鼠胆囊收缩素/肠促胰酶肽(CCK)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforCpn-Ab(HumanChlamydiapneumoniaeantibody)ELISAKit人肺炎衣原体抗体规格:48T/96T
细胞样品细胞色素C氧化酶表达流式细胞仪检测试剂盒10/20次
RatCXC-chemokineligand16,CXCL16ELISAKit大鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)ELISA试剂盒规格:96T/48T
NCI-N87 [N87]人胃癌细胞 Human
615小鼠网织细胞性白血病瘤株;L615
IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
小鼠诱导性多潜能干细胞;PUMC-mips-C2 II型胶原酶(含100mL酶解缓冲) 10mL
人神经元cDNAHN cDNA
IL12RB1 Others Human 人 IL12RB1 / IL12RB / CD212 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
猪细胞;ST
VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人气管平滑肌细胞完全培养基 100mL
OCM-1A细胞,人低侵袭性脉络膜色素素瘤细胞 绿色木霉 小鼠树突状细胞肉瘤细胞;DCS
CCL28 Protein Human 重组人 CCL28 蛋白 (His 标签)
LM/TK(小鼠胸腺激酶缺陷细胞) 5×106cells/瓶×2 人 Cardiotrophin-1 / CTF1 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CLEC4A3 Others Rat 大鼠 CLEC4A3 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0297Y3-Ag 1.2.3(大鼠瘤细胞)5×106cells/瓶×2
人少突胶质前体细胞(悬浮生长)总RNAHOPC-os tRNA
MDA-MB-436细胞,人癌细胞 杂交瘤细胞支原体阳性,B6YH4细胞 神经少突起前质胶质细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
SF-295(人XG恶性胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
HAoEC Pellet 人主动脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 尿道上皮细胞生长添加物UCGS
CL-0297Y3-Ag 1.2.3(大鼠瘤细胞)5×106cells/瓶×2
CLEC4A3 Others Rat 大鼠 CLEC4A3 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人少突胶质前体细胞(悬浮生长)总RNAHOPC-os tRNA
MDA-MB-436细胞,人癌细胞 杂交瘤细胞支原体阳性,B6YH4细胞 神经少突起前质胶质细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
SF-295(人XG恶性胶质瘤细胞) 5×106cells/瓶×2
HAoEC Pellet 人主动脉内皮细胞团块 > 1 mio.cells 尿道上皮细胞生长添加物UCGS
柱式分枝杆菌 DNAout50 次成分TE-11(人食管癌细胞) 5×106cells/瓶×2 A-704(人肾癌细胞)
CM-M047小鼠肠微血管细胞完全培养基100mL
TACSTD2 Others Mouse 小鼠 TROP2 / TACSTD2 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
S-180小鼠腹水瘤细胞 Mouse S-180 ascites tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS
IL12B Protein Rat 重组大鼠 IL12B / IL-12B 蛋白 (His 标签)
小鼠肾小管上皮细胞完全培养基 100mL