柱式昆虫 mtDNAout,测序级10 次效果产品介绍:
柱式昆虫 mtDNAout,测序级10 次效果导致核酸降解的常见非酶因素原因:
机制溶液中残留重金属离子 磷酸二脂键的断裂 长期存放/光照产生的自由基 磷酸二脂键的断裂 UV 形成嘧叮二聚体 DEPC 使 RNA 中没配对的腺嘌呤羧甲基化,但对 双链核酸危害小 高温和低 pH 脱嘌啉反应(depurination) EB 导致可见光对 DNA 的光氧化 (photooxidation) 酚 其氧化产物使磷酸二脂键断裂 甲酰胺溶液 酸化后(pH 5)引起 RNA 降解 醚 残留过氧化物使磷酸二脂键的断裂 醇 残留重金属离子使磷酸二脂键的断裂 4℃ 短期保存的温度 -20℃ 如果溶液中有盐,将使核酸产生大量断裂 -70℃ 长期保存的温度,但冷凝状态下自由基 的破坏更活跃。
使用方法:
1. 将 10-30 mL 新鲜或解冻后的抗凝全血加入到 50 mL 塑料离心管中。
2. 12000-15000 g 室温离心 5 分钟,弃上清(血浆)。
3. 将 20 mL 溶液 A 加入到血液细胞沉淀中,用移液枪吹打沉淀使细胞裂解。
4. 将 6 mL 的溶液 B 和 4 mL 加入到离心管中,剧烈震荡 30 秒。
5. 12000-15000 g 室温离心 3-5 分钟,将上清液(为无色或浅红色)转移到另一干净离心管中。注意:转移的液体不要超过 25 mL,否则下一步不能加入等体积的溶液 C。为防止污染,Z好留少量上清液。下层有机相一般呈深红色,中间层为白色,含有 DNA,蛋白质和其他细胞破碎物,避免触及或吸取。
6. 加入等体积的溶液 C,充分颠倒混匀。
7. 分两次将溶液转移到离心吸附柱中,每次转移后 12000-15000 g 室温离心半分钟,弃穿透液。
8. 加 25 mL 通用洗柱液,室温离心半分钟,弃穿透液。
9. 重复步骤 8 一次。
10. 室温 12000-15000 g 离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会影响 RNA 的后续反应。
11. 将离心吸附柱转移到一个新的离心管中,加入 1mL RNA 洗脱液,室温放置 1-2 分钟。
12. 12000-15000 g 室温离心半分钟,离心管中溶液即为 RNA 样品,可以立即使用或存放于-80℃待用。
13. RNA 完整性的电泳检测:如果需要做 Northern 杂交,强烈建议用户使用甲醛变性胶进行 RNA 电泳,因为非变性胶不能分离所有的 RNA 分子(BioTechniques,28:414,2000)。
14. RNA 产量产率测定:将 5-10 μL RNA 溶于 TE 缓冲液中(pH7.5-8.2 之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260 的 RNA=40 μg/mL),进而计算出 RNA 的产量(浓度 X 体积)和产率(RNA 产量/组织用量)。人血 RNA 产率一般为 2-5 ug/mL。
15. RNA 纯度测定:无污染的总 RNA 的 OD260/OD280 一般在 2.0 左右(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关),高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染,但一般不影响 RT-PCR 等反应。
特点:
1. 常温保存时间长达半年,方便了拭子样品的野外采集和长途运输。
2. 使用广泛,适用于各种拭子样品,包括口腔拭子、鼻腔拭子、拭子等。
3. 价格实惠,提供的试剂足够保存 200 个拭子样品。
4. 跟各种纤维棉拭子兼容。但使用本公司专用拭子效果更佳(因为所有优化都是在此专用 拭子的基础上完成的,80801B 包装含 200 只专用拭子)。
5. 保存的拭子可以用柱式拭子 DNAout(CAT#:80801)提取其 DNA,从一个拭子一般 可以提取到 0.5 ug 左右的 DNA。
6. 一个样品可以用一个微型离心管保存,Z大程度地避免了样品间的交叉污染。
7. 试剂本身安全环保无毒。
人组织蛋白酶K(cath-K)ELISA 试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装
Human hepatitis B virus X antigen (HBxAg) ELISA Kit 人乙型肝炎病毒X抗原(HBxAg)ELISA试剂盒
Humananti-hepatitisBviruscoreantibody,HBcAbELISAKit 人抗乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
Humanhemeoxygenase2,HO-2ELISA试剂盒人血红素氧合酶2(HO-2)ELISA试剂盒规格:96T/48T
组织钙离子浓度荧光定量检测试剂盒20次
HumanMannose,MNELISAKit人甘露糖(MN)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠成纤维细胞生长因子6(FGF6)ELISA试剂盒 ,英文名: FGF6 ELISA Kit
Human Toll like receptor 9 (TLR-9/CD289) ELISA Kit 人Toll样受体9(TLR-9/CD289)ELISA试剂盒
Ratomerase,TEELISAKit 大鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
CLIAKitforCsAELISAKit大鼠环孢素A规格:48T/96T
细胞腺苷酸环化酶(AdenylateCyclase)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒20次
Ratdiamineoxidase,DAOELISAKit大鼠二胺氧化酶(DAO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠补体因子H(CFH)ELISA试剂盒 ,英文名: CFH ELISA Kit
Mouse substance P (SP) ELISA Kit 小鼠P物质(SP)ELISA试剂盒
ELISA 小鼠二胺氧化酶(mouse DAO) 48T/96T 进口分装
CLIAKitforLBPELISAKit大鼠脂多糖结合蛋白规格:48T/96T
通用型VZV(VARICELLAZOSTER)病毒定量PCR扩增检测试剂盒20次
ELISAKitMHC/RhLA恒河猴主要组织相容性复合体规格:48T/96T
hDPSCs, 人前磨牙牙髓干细胞 Human
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-21
小鼠星形胶质细胞(MA)(5×105)
小鼠肺腺癌低转移细胞(绿色荧光蛋白标记);LA1-GFP 小鼠视网膜muller细胞完全培养基 100mL
人牙龈成纤维细胞总RNAHGF tRNA
CPA1 Others Human 人 Carboxypeptidase-A1 / CPA1 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CM-H006人肺动脉成纤维细胞完全培养基100mL
WARS Others Human 人 WARS / TrpRS 杆状病毒-昆虫细胞裂解 (阳性对照) (变性)
原代上皮细胞特制基础培养基Many types of cells包装:500/250/100ml
恒河猴肾细胞;MMK3 人淋巴样Burkitt淋巴瘤细胞,EB-3[EB3]细胞 TE-11(食管癌细胞)
人急性早幼粒白血病细胞;HL-60
EFNA3 Others Human 人 EphrinA3 / EFNA3 人细胞裂解 (阳性对照)
IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0261BC-022(人癌细胞)5×106cells/瓶×2
人髓核细胞cDNAHNPC cDNA
T47D细胞,人管癌细胞 猪肾细胞系,IBRS-2细胞 肺成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨细胞前体细胞) 5×106cells/瓶×2
HCMEC Pellet 人心脏微血管内皮细胞团块 > 1 mio.cells 纤维母细胞粘附检测试剂盒Fibro
CL-0261BC-022(人癌细胞)5×106cells/瓶×2
IFNB1 Others Mouse 小鼠 IFNB1 / IFN-beta / Interferon beta 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人髓核细胞cDNAHNPC cDNA
T47D细胞,人管癌细胞 猪肾细胞系,IBRS-2细胞 肺成纤维细胞Many types of cells包装:5 × 105次方(1ml)
MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨细胞前体细胞) 5×106cells/瓶×2
HCMEC Pellet 人心脏微血管内皮细胞团块 > 1 mio.cells 纤维母细胞粘附检测试剂盒Fibro
柱式昆虫 mtDNAout,测序级10 次效果SF763(人脑瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 J82(膀胱癌细胞)
CL-0063CNE(人鼻咽癌细胞)5×106cells/瓶×2
ST6GALNAC2 Others Mouse 小鼠 STHM / ST6GALNAC2 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
EC9706人食管癌细胞 Human esophageal cancer cell line EC9706. DMEM+10%FBS
IL6 Protein Human 重组人 IL6 / Interleukin-6 蛋白
小鼠小肠粘膜上皮细胞完全培养基 100mL