Rosetta 感受态细胞10×100μL供应详细介绍:

产品及特点:
Rosetta 感受态细胞10×100μL供应本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株,用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测,本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域,该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂,Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后,发生重组后就可产生重组 Bacmid,提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象,用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
Rosetta 感受态细胞10×100μL供应规格及成分:

Rosetta 感受态细胞10×100μL供应使用方法:
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒,用移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床, 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释,如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后,倒置平板, 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,视平板上菌落生长情况决定去留。
BEL/FU 人肝癌尿耐药株
CL-0123IBRS-2(猪肾细胞)5×106cells/瓶×2
人前列腺成纤维细胞(HPrF)(5×105)
人肾上腺皮质腺癌细胞;NCI-H295R 大鼠虹膜色素上皮细胞完全培养基 100mL
狗肺成纤维样细胞;DogL1
REG3D Others Mouse 小鼠 REG3D 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人神经母细胞瘤细胞;BE(2)-M17
人发干细胞(HHDPC)( 5×105 )
人脐静脉平滑肌细胞
急性T淋巴细胞白血病细胞;TALL-104 大鼠心肌细胞完全培养基 100mL
Pcc4 小鼠畸胎瘤细胞
CDH17 Others Human 人 CDH17 / Cadherin-17 / LI-cadherin 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
FCGR3B Others Human 人 CD16b / FCGR3B CHO细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0074DLD-1(人结肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2
EndoFectagen? 内皮细胞转染试剂盒
牛陀螺状细胞;BT 鸡淋巴瘤细胞,DT40细胞 Kert-3细胞,小鼠肾癌细胞
EB病毒转化的人B淋巴细胞(傣族);KM9403
FABP4 Others Mouse 小鼠 FABP4 / ALBP 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CL-0074DLD-1(人结肠腺癌细胞)5×106cells/瓶×2
FCGR3B Others Human 人 CD16b / FCGR3B CHO细胞裂解 (阳性对照) (变性)
EndoFectagen? 内皮细胞转染试剂盒
牛陀螺状细胞;BT 鸡淋巴瘤细胞,DT40细胞 Kert-3细胞,小鼠肾癌细胞
EB病毒转化的人B淋巴细胞(傣族);KM9403
FABP4 Others Mouse 小鼠 FABP4 / ALBP 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
MKTTnBroth
铁琼脂 250g 用于产硫化氢细菌计数
霍乱双糖铁琼脂(KIA) 250 用于霍乱弧菌的生化试验(SN标准)
改良LMX肉汤2万ml/瓶用于同时快速检测大肠杆菌、大肠菌,24h内出结果incubationmedia改良LMX肉汤2万ml/瓶用于同时快速检测大肠杆菌、大肠菌,24h内出结果
含青霉素酶接触皿培养基平板(6.5cm) 10个/包 用于环境、器皿、设备和表面的无菌检测
胰蛋白胨水培养基250g用于制备样品稀释液
脑-心浸萃琼脂培养基 Brain-extracted agar Baptist Heart 用于粪链球菌的纯化培养
贝尔德-帕克琼脂基础 Baird Parker Agar Base 250克 用于金黄色葡萄球菌的分离培养
酵母粉琼脂用于水中细菌总数的检测(ISO标准)incubationmedia酵母粉琼脂用于水中细菌总数的检测(ISO标准)
镁孔雀绿肉汤(MM,RV 250g 用于沙门氏菌的选择性增菌培养(GB标准)
EC肉汤22230250g用于多管发酵法测定粪大肠菌和大肠杆菌的确证试验(GB/T4789.38-2008,GB/T4789.39-2008和SN0...
2%亮绿胆汁肉汤(CM0031) Oxoid incubation media 2%亮绿胆汁肉汤(CM0031) Oxoid
木霉 生物FZ 支/瓶
mE.ColiBroth
MycoplasmaAgarBase
Rosetta 感受态细胞10×100μL供应溶菌酶肉汤基础250g用于蜡样芽孢杆菌的溶菌酶试验
BDS培养基 BDS Medium 用于培养拟杆菌
三糖铁琼脂(TSI) Triple Sugar Iron Agar 250 用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选(葡萄糖,乳糖,蔗糖)
AHM鉴别培养基250g/瓶用于致病性嗜水气单胞菌的鉴别incubationmediaAHM鉴别培养基250g/瓶用于致病性嗜水气单胞菌的鉴别
改良山梨醇麦康凯(CT-SMAC)琼脂 250g 用于大肠杆菌O157的分离培养(GB)标准