JM109 化学感受态细胞0.1mL×10供应

JM109 化学感受态细胞0.1mL×10供应规格及成分：

JM109 化学感受态细胞0.1mL×10供应产品及特点：
本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞，适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株，用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测，本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域，该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒（pFastBac1，pFastBacDual 等）含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂，Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后，发生重组后就可产生重组 Bacmid，提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为：F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
JM109 化学感受态细胞0.1mL×10供应使用方法：
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10 μg/mL tetracycline，100 μg/mL X-gal，40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC（不含抗生素），混匀后置于 37℃ 摇床， 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释，如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板， 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃，视平板上菌落生长情况决定去留。

Hepa 1-6 小鼠肝癌细胞

CL-0317AML-193(人急性单核细胞白血病单核细胞)5×106cells/瓶×2

人肺动脉成纤维细胞 (HPAF)( 5×105 )

人胃癌细胞;MGC-803 大鼠胎儿表皮角质形成层细胞完全培养基 100mL

人羊膜细胞;WISH

RSV-G Others Respiratory syncytial virus/RSV 人类呼吸道合胞病毒 hRSV (B1) glycoprotein G / RSV-G 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

615小鼠癌瘤株;Ca761

人神经系统周边细胞 (HPNC)( 5×105 )

T24, 人膀胱癌细胞

人前列腺癌细胞;PC-3 [PC3] 大鼠卵巢成纤维细胞完全培养基 100mL

Hepa 1-6 小鼠肝癌细胞

CXADR Others Mouse 小鼠 CXADR 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

TGFB1 Others Human 人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 CHO细胞裂解 (阳性对照) (变性)

CL-0026ARPE-19(人视网膜上皮细胞)5×106cells/瓶×2

胎牛血清FBS

黄牛皮肤细胞;BTA-S2 鼠巨噬细胞，Ana-1细胞 MOLT-4(急性淋巴母细胞白血病细胞)

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9402

OMD Others Mouse 小鼠 OMD / Osteomodulin 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

CL-0026ARPE-19(人视网膜上皮细胞)5×106cells/瓶×2

TGFB1 Others Human 人 / 恒河猴 / 狗 TGF-beta 1 / TGFB1 CHO细胞裂解 (阳性对照) (变性)

胎牛血清FBS

黄牛皮肤细胞;BTA-S2 鼠巨噬细胞，Ana-1细胞 MOLT-4(急性淋巴母细胞白血病细胞)

EB病毒转化的人B淋巴细胞;KM9402

OMD Others Mouse 小鼠 OMD / Osteomodulin 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)

AmmoniumDextroseMedium

葡萄糖天门冬素培养基 250g 葡萄糖天门冬素培养基

霉菌和酵母菌显色培养基 Mould and Yeast Chromogenic Medium 1000ml 用于霉菌和酵母菌的显色培养

细菌总数显色培养基2000ml/瓶用于细菌总数测定，24h内出结果，细菌呈红色incubationmedia细菌总数显色培养基2000ml/瓶用于细菌总数测定，24h内出结果，细菌呈红色

布氏肉汤添加剂(2ml/支) 2ml/支*5 添加于HBJ014中

吲哚培养基(蛋白胨水)化培养基，用于细菌靛基质试验，亦称色酸肉汤(SN标准)

固体培养基 250g 用于细菌、纤维分解菌、真菌计数培养

桔汁琼脂 ORANGE SERUM AGAR 250 用于饮料中耐酸细菌的分离培养(ACUMEDIA方法)

5000ml/瓶incubationmedia5000ml/瓶

0.1%PeptoneWater

哆醇Y培养基250g用于通过微生物学方法检测哆醇含量

15050-057 500ml incubation media 15050-057 500ml

华根霉 支/瓶

亚铋琼脂平板(9cm)用于沙门氏菌的选择性分离

YeastExtractGlucoseOxytetracyclineAgar

JM109 化学感受态细胞0.1mL×10供应煌绿琼脂250g用于沙门氏菌的分离培养

脆弱拟杆菌活化培养基肉汤 250g 用于脆弱拟杆菌活化培养

快速硫化氢试验琼脂 H2S Test Medium 250 用于弯曲杆菌的硫化氢试验(GB标准)

5000ml/瓶incubationmedia5000ml/瓶

FuchsinBasicSodiumSulfiteAgar

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