即用型蓝白 T 载体 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次规格规格及成分:

即用型蓝白 T 载体 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次规格产品及特点:
本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株,用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测,本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域,该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂,Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后,发生重组后就可产生重组 Bacmid,提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象,用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
即用型蓝白 T 载体 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次规格使用方法:
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒,用移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床, 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释,如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后,倒置平板, 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,视平板上菌落生长情况决定去留。
Lewis 小鼠肺癌细胞
SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢癌腺癌细胞系
人小脑星形胶质细胞( Hac) (1×106 )
人导管瘤细胞;UACC812 大鼠肾系膜细胞完全培养基 100mL
小鼠肾足细胞;Mouse podocyte
FLT4 Others Mouse 小鼠 FLT-4 / VEGFR3 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
人角膜细胞总RNAHK tRNA
小鼠颗粒神经元(MGC)(1×106)
猫源细胞
杂交瘤(B类);Z51B3C10H12A12G2F7B5 小鼠表皮角质形成细胞完全培养基 100mL
BRL 3A, 大鼠肝正常细胞 Rattus
IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 / IL1RAPL2 / IL1 Receptor 9 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
CD300A Others Mouse 小鼠 CD300A 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
615小鼠癌瘤株;Ca759
M14 人色素瘤细胞
MDA-MB-468人癌细胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-468 L-15+10%FBS
FAM3B Protein Human 重组人 FAM3B 蛋白 (Fc 标签)
人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1 人肺血管内皮细胞完全培养基 100mL
615小鼠癌瘤株;Ca759
CD300A Others Mouse 小鼠 CD300A 人细胞裂解 (阳性对照) (变性)
M14 人色素瘤细胞
MDA-MB-468人癌细胞 Human breast cancer cell line MDA-MB-468 L-15+10%FBS
FAM3B Protein Human 重组人 FAM3B 蛋白 (Fc 标签)
人胚皮肤成纤维细胞;CCC-ESF-1 人肺血管内皮细胞完全培养基 100mL
PBSbroth
哆醇Y培养基 250g 用于通过微生物学方法检测哆醇含量
心浸液琼脂 Heart Infusion Agar 250 用于培养营养要求高的微生物 (ACUMEDIA方法)
MS微量元素500L/瓶用于制备MS培养基incubationmediaMS微量元素500L/瓶用于制备MS培养基
含225ml磷酸盐缓冲液均质袋 10个/包 用于菌落总数,大肠菌,金葡菌,大肠杆菌样品制备
支原体肉汤培养基(不含琼脂和酚红)250g用于支原体的增菌培养
胆盐乳糖发酵培养基 250(g) incubation media 胆盐乳糖发酵培养基 250(g)
煌绿乳糖胆盐肉汤BGLB 250g 用于多管发酵法测定大肠菌的确证试验(GB 4789.3-2010和SN0169-92)。
沙门、志贺菌属琼脂培养基(SS)SalmonellaShigellaAgar用于沙门氏菌,志贺氏菌的选择性分离培养
ClostridiumPerfringensAssayMedium
假单胞菌cfc选择性培养基添加剂支每支加入200ml假单胞菌cfc选择性培养基中。
0.05%胰酶,EDTA。4Na" "不含钙镁离子,含酚红 0.05%胰酶,EDTA。4Na" "不含钙镁离子,含酚红
环状芽孢杆菌 用于腐乳代替食品色素 支/瓶
麦康凯琼脂平板(9cm)用于肠道致病菌的选择性分离、培养
SabouraudDextroseAgarMedium
即用型蓝白 T 载体 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次规格志贺氏增菌肉汤2350g用于志贺氏菌的选择性增菌培养。(GB4789.5-2010)
Stuart 运送培养基 (CM0111) Oxoid incubation media Stuart 运送培养基 (CM0111) Oxoid
奇异翅孢壳 支/瓶
22250g用于海生细菌的培养和计数
TetrathionateMedium
即用型蓝白 T 载体 A 型 (T7-SP6,有 MCS)20 次规格详细介绍: