SDS-PAGE 实验步骤制备试剂盒50 次实验步骤

SDS-PAGE 实验步骤制备试剂盒50 次实验步骤详细介绍：

SDS-PAGE 实验步骤制备试剂盒50 次实验步骤对于培养细胞样品：

1. 融解 RIPA 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF， 使 PMSF 的Z终浓度为 1mM。
2. 裂解细胞 2.1 对于贴壁细胞：去除培养液，用 PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血 清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 150-250 微升裂解液的比 例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞 1-2 秒后，细胞就会被裂解。 2.2 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照 6 孔板每孔细胞 加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分 裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成 50-100 万细胞/管， 然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。 注意：通常 6 孔板每孔细胞加入 150 微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高 可以适当加大裂解液的用量到 200 微升或 250 微升。

对于组织样品：

1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解 RIPA 裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入 PMSF， 使 PMSF 的Z终浓度为 1mM。
3. 按照每 20 毫克组织加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不 充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解 液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g 离心 3-5 分钟，取上清，即可进行后续的 PAGE、 Western 和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈 vortex 使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是 比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。

产品及特点：

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)是目前电泳法变性分离蛋白质的主要方法，但是单独配制各种溶液十分繁琐，为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式，即开即用，用户不需单独准备各种成分，十分方便。
2. 安全，将实验人员接触粉末状丙烯酰胺的可能降到Z低。
3. 灵活，分开提供的丙烯酰胺和甲叉双丙烯酰胺便于配制各种比例和浓度的 SDS-PAGE，满足分离各种大小不同的蛋白质的要求。
4. 使用改良的浓缩胶缓冲液，由于其含有染料，制备的浓缩胶呈蓝色，便于上样时识别加样孔。
5. 电泳后可直接用于考染、银染、Western 杂交等实验。

Maximum UV absorption：533 nm
〖〖性状〗(以下信息仅供参考)〗：类白色至淡黄色粉末。溶于甲醇：10mg/ml；也溶于DMSO：50mg/ml
〖用途〗：本品仅供科研，不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗仅供参考)化学发光试剂
〖保存〗：2～8℃。保质期2年
D-虫荧光素钠
〖英文名称〗：D-Luciferin sodium salt；Firefly luciferin sodium salt；(S)-2-(6-Hydroxy-2-benzothiazolyl)-2-thiazoline-4-carboxylic acid sodium salt；4,5-Dihydro-2-(6-hydroxy-2-benzothiazolyl)-4-thiazolecarboxylic acid sodium salt
〖其他名称〗：(S)-4,5-二-2-(6-羟基苯并噻唑-2-基)噻唑-4-甲酸钠盐；D-荧光素钠盐；(S)-2-(6-羟基-2-苯并噻唑基)-2-噻唑啉-4-羧酸钠；4,5-二-2-(6-羟基-2-苯并噻唑基)-4-噻唑羧酸钠；D-冷光素钠盐
〖CAS号〗：103404-75-7
C11H7N2NaO3S2=302.3
〖级别〗：BR
纯度：≥99.0%

Tubulin- Gamma 微管蛋白-γ抗原Multi-class antibodies规格： 0.5mg
Anti-Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh PCX/PODXL 足细胞特异蛋白抗体 规格 0.1ml
BST1 Kit Human 人 CD157 / BST1 ELISA配对抗体 ELISA
TMP21 英文名称： 跨膜转运蛋白21抗体 0.1ml
phospho-Cyclin E (Thr77) 英文名称： 磷酸化周期素E抗体 0.1ml
Anti-Caspase-10 半胱胺酸蛋白酶-10抗体Multi-class antibodies规格： 0.2ml
IL1RAPL1 (Interleukin 1 receptor accessory protein-like 1) 白介素受体相关蛋白样1前体蛋白(抗原)Multi-class antibodies规格： 0.5mg
Anti-CD19 CD19抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Pancreatic Lipase 胰脂肪酶抗体 规格 0.1ml
BST1 Kit Mouse 小鼠 CD157 / BST1 ELISA配对抗体 ELISA
TBX2 英文名称： 新型抑癌基因抗体 0.2ml
TCP1 beta 英文名称： 分子伴侣复合体TCP-1β抗体 0.2ml
Anti-CD19 CD19抗体Multi-class antibodies规格： 0.1ml
光素标记肌