Gibco 10099-141 澳洲胎牛血清
灭活与分装的方法:</span></span></p><p><span style="font-size:9.0pt">1</span><span style="font-family:宋体"><span style="font-size:9.0pt">、化冻</span></span></p><p><span style="font-size:9.0pt">将血清从-20度冰箱中取出,室温(或浸于自来水中)化冻(约需要30分钟至2小时,也可放于4度冰箱化冻一夜;化冻后若不马上灭活,可以放入4度冰箱中暂时保存)</span></p><p><span style="font-size:9.0pt">2</span><span style="font-size:9.0pt">、灭活</span></p><p><span style="font-size:9.0pt">(1)放入室温的水浴锅内开始加热(同时放入一个空的血清瓶,内装100ml自来水,插入一根温度计,温度监控以此为准)</span></p><p><span style="font-size:9.0pt">(2)当温度计显示56度时,停止加热,改为间断加热,维持56度(±0.5度)30分钟(±3分钟;若不小心使温度上升超过56度,则:若仍未超过60度,且时间很短,比如不超过5分钟,则仍可使用;若超过60度,或者时间较长,则弃去不用,或者尝SY于一些普通细胞的培养)</span></p><p><span style="font-size:9.0pt">(3)取出,自然冷却至室温(约需1-3小时),可分装或-20度继续冻存。Gibco 10099-141 澳洲胎牛血清</span></p><p><span style="font-size:9.0pt">3</span><span style="font-size:9.0pt">、分装</span></p><p><span style="font-size:9.0pt">(1)转入无菌间,在超净台内将血清分装入10ml离心管中(注意预先要将血清轻轻摇动数周、混匀;用吸液管或吹大管吹出血清时要注意:不要吹出气泡(血清很粘稠,很容易产生气泡;如果产生气泡,则在酒精灯火焰上过一下))</span></p><p><span style="font-size:9.0pt">(2)放入-20度冰箱冻存</span></p><p><span style="font-size:9.0pt">(3)全部操作约需要4-6小时</span></p><p style="margin-left:0cm; margin-right:0cm"><strong>Bioind胎牛血清(产地:澳洲血源 货号:04-001-1-AUS)</strong></p><p style="margin-left:0cm; margin-right:0cm"><span style="font-size:9.0pt">血清的定义<br />血清,指血液凝固后,在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被 除去的血浆。其主要作用是提供基本营养物质、提供激素和各种生长因子、提供结合蛋白 、提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤、对培养中的细胞起到某些保护作用。</span></p><p style="margin-left:0cm; margin-right:0cm"><span style="font-size:9.0pt">血清类别<br />胎牛血清替代品胎牛血清、透析型胎牛血清 、天然低IGG胎牛血清 、干细胞培养胎牛血 清 、特殊用途胎牛血清 、活性炭/葡萄糖处理胎牛血清 、胎牛血清替代物 、小牛血清 、 新生牛血清 、加强型小牛血清 、补铁小牛血清 、成牛血清 、供体马血清 、兔血清 、鸡 血清 、猪血清 、马血清 、其他动物血清 、合成血清替代品。</span></p><p style="margin-left:0cm; margin-right:0cm"><span style="font-size:9.0pt">血清主要作用<br />●提供基本营养物质:氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等,是细胞生长 必须的物质。<br />●提供激素和各种生长因子:胰岛素、肾上腺皮质激素、类固 醇激素(雌二醇、睾酮、孕酮)等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血 小板生长因子等。<br />●提供结合蛋白:结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质,如白蛋白携带维生素、脂肪 、以及激素等,转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。<br />●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。<br />●对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、样细胞可以释放蛋 白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,现在则有目的 的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传 代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时 ,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢中起重要作用, 如SeO3,硒等 .</span></p><p style="margin-left:0cm; margin-right:0cm"><span style="font-size:9.0pt">血清保存<br />血清应保存在-5<sup>。</sup>C至-2O<sup>。</sup>C。若存放于4<sup>。</sup>C 时,保质期减至一个月。若您一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内 ,再放回冷冻。</span></p><p style="margin-left:0cm; margin-right:0cm"><span style="font-size:9.0pt">若必须做血清的热灭活,请遵守56<sup>。</sup>C,30分钟的原则,并且随时摇 晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。 血清解冻后发 现有絮状沉淀物出现,该如何处理? 欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离 心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方 法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞过滤膜。</span></p><p style="margin-left:0cm; margin-right:0cm"><span style="font-size:9.0pt">何谓热灭活?<br />一般是以56C,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化, 而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增 强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和激活。</span></p><p><span style="font-family:宋体"><span style="font-size:9.0pt">有必要做热灭活吗?<br />实验显示,经过正确处理的热灭HX清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理 过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影 响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显 著的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血 清遭受污染,而把血清放在37C环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。<br />因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您 宝贵的时间,更确保您血清的质量!另外,购买已灭活成品也不失一个捷径,请在购买的 时候注意询问厂家是否是已灭HX清。