利福平溶液 ,100mg/mL10mL现货产品及特点:
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本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞,适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株,用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测,本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域,该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒(pFastBac1,pFastBacDual 等)含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂,Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后,发生重组后就可产生重组 Bacmid,提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外,DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象,用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为:F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
利福平溶液 ,100mg/mL10mL现货规格及成分:
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使用方法:
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板:50 μ g/mL Kanamycin,7 μ g/mL gentamicin,10 μg/mL tetracycline,100 μg/mL X-gal,40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒,用移液器轻轻吹打混匀,冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒,迅速将离心管转移到冰浴中,冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC(不含抗生素),混匀后置于 37℃ 摇床, 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释,如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后,倒置平板, 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃,视平板上菌落生长情况决定去留。
总状毛霉 Mucor racemosus
嗜热链球菌 Streptococcus thermophilus
糙皮侧耳 Pleurotus ostreatus
小鼠肝动脉内皮细胞完全培养基100mL
大鼠支气管上皮细胞完全培养基100mL
温特曲霉 Aspergillus wentii
近平滑假丝酵母 Candida parapsilosis
HT-29/大肠细胞株国产
粟酒裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe
香菇 Lentinula edodes
人转移腺细胞英文名称:AsPC-1pSTAT3-TA-lucifer(pSTAT3TAlucifer)(60908-6330y)
ptac11
pTGV-Express-Tet SMR5918(pTGVExpressTetSMR5918)
pTriEx-5(pTriEx5)
pUC8-Not(pUC8Not)
pVL1393(60908-6930)
pXP416
pZsGreen
TetO-FUW-OSKM(TetOFUWOSKM)
YCpIF7
YIp365
200uL RNAase-free黄吸头(盒装已灭菌带芯)
蛋白胨
Alcaligenes xylosoxydans medium with benzoate
Arhodomonas medium rs 91
BTT medium
Clostridium caminithermalis medium
Deferrisoma medium
Desulfovibrio gigas medium
Exiguobacterium medium
Haemophilus medium
人肝内胆管上皮细胞完全培养基100mL
毛霉属 Mucor sp.
海生嗜盐球菌 Marinococcus halophilus
Goat Anti Mouse IgG-Biotin(Ready to Use)/山羊抗鼠IgG,Biotin(IHC工作液)3ml、18ml国产
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
甜菜茎点霉