一站式平末端克隆试剂盒20 次特价

一站式平末端克隆试剂盒20 次特价规格及成分：

一站式平末端克隆试剂盒20 次特价产品及特点：

本产品是采用特殊工艺处理得到的大肠杆菌 DH10 Bac 感受态细胞，适用于昆虫杆状病毒 Bac-to-Bac 系统中同源重组的菌株，用于产生重组 Bacmid。使用 pUC19 质粒检测，本产品转化效率可达 107CFU/μg。 DH10Bac 细胞包含亲本 Bacmid bMON14272 和辅助质粒 pMON7124。亲本 Bacmid 包含一个 mini-F 复制子、卡那霉素抗性基因、att Tn7 位点和 lac Zα-互补因子。辅助质粒包含 tns ABCD 区域，该区域提供了 mini-Tn7 从供体质粒插入亲本 Bacmid 靶位点所需要的转座蛋白。供体如 pFastBac 系列质粒（pFastBac1，pFastBacDual 等）含有 Tn7R 和 Tn7L 同源重组臂，Tn7R 和 Tn7L 之间包含庆大霉素抗性基因、昆虫病毒多角体基因启动子、多克隆位点和 SV40 病毒的 PolyA 加尾信号。当含有靶基因 pFastBac 的重组质粒转化到 DH10Bac 细胞后，发生重组后就可产生重组 Bacmid，提取纯化重组 Bacmid 转染昆虫细胞 Sf9 或 Sf21 就可以包装产生昆虫病毒。此外，DH10Bac 细胞中的 The φ80dlacZDM15 基因的产物可以实现β-半乳糖苷酶的α-互补现象，用于重组 bacmid 的蓝白斑筛选。菌株基因型为：F- mcrA Δ(mrrhsdRMSmcrBC) φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1 araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG/pMON14272/pMON7124 。
使用方法：
1. 制备含有如下抗生素的 LB 固体平板：50 μ g/mL Kanamycin，7 μ g/mL gentamicin，10 μg/mL tetracycline，100 μg/mL X-gal，40 μg/mL IPTG。
2. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为 50-100 μL，可以根据实际情况分装使用。以下实验以 100 μL 感受态细胞为例。
3. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入 1-10 ng 重组质粒，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴 30 分钟。
4. 42℃热击 90 秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置 2-3 分钟。
5. 每个离心管中加入 900 μL 无菌的 SOC（不含抗生素），混匀后置于 37℃ 摇床， 200rpm 振荡培养 4 小时。
6. 用 SOC 培养基进行 10 倍梯度稀释，如分成 3 个稀释梯度 10-1,10-2,10-3。
7. 取 100 μL 的各个梯度的培养物用于涂布。等平板中的液体完全吸收后，倒置平板， 37℃培养 24-48 小时。 8. 保留剩余的菌液保存于 4℃，视平板上菌落生长情况决定去留。

牛链球菌 Streptococcus bovis
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
CT26.WT(小鼠结肠细胞)5×106cells/瓶×2
帚石南棒杆菌 Corynebacterium callunae
消化杆菌 Lactobacillus alimentarius
EC109，人食管细胞
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
双轮丝链霉菌 Streptomyces biverticillatus
白纹伊蚊细胞英文名称：C6/36
玉蜀黍球梗孢菌 Kabatiella zeae
美味侧耳 Pleurotus sapidus
吴茱萸次碱规格： 20mg/支；98%
GC-1, 鼠原细胞Sevier Manger 硝酸银法特殊细胞染色试剂盒
Steedman-Lison染色法粘多糖染色试剂盒
Albertγ-谷氨眈转肤酶法谷氨酰转肽酶显色试剂盒
Madoff支原体与细菌L期变种法支原体染色试剂盒
AMPSO Buffer，0.2M，pH9.0
CAPS Buffer,0.5M,pH11.0
DNA洗脱液（50 mL）
HCl Buffer,1.0M,pH6.5
Krebs-Ringer Solution [HEPES Buffered]
MOPS Buffer,1.0M,pH6.5
Phosphate Buffer，0.2M, pH8.5
Potassium Phosphate Solution，0.2M, pH8.0
RNase-free 乙酸钠溶液pH5.2，3M
Succinate Buffer（琥珀酸缓冲液）,0.2M,pH6.5
Tricine Buffered Saline,5X,pH7.0
Yeast Lysis Buffer (for large scale prep)
6E
E2-Crimson（E2Crimson）
烟曲霉 Aspergillus fumigatus
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
Lec1(仓鼠卵巢细胞)5×106cells/瓶×2
泡盛曲霉 Aspergillus awamori