天净沙核酸浓缩剂30mL原理

天净沙核酸浓缩剂30mL原理产品及特点：
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是单独配制各种溶液十分繁琐，为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式，含有电泳所需要的所有试剂，即开即用，十分方便，免去了实验人员称取有毒物品。
2. 灵活，可以根据需要配制各种浓度的 Urea-PAGE，以便对长度各异的 RNA 进行电泳。
3. 电泳后可直接用于 UV 观察、银染、胶回收、Northern 杂交和放射自显影等。
4. 使用新型缓冲液，可以防止甘油的干扰。
天净沙核酸浓缩剂30mL原理产品介绍：

使用方法：
一、准备工作
1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿（详见该产品的使用手册）。
2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍，得到 1X 电泳缓冲液待用。
3. 配制 10%过硫酸铵溶液精确称取约 100 mg 过硫酸铵到一干净的 1.5 mL 离心管中，按每 1 mg 过硫酸铵加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水，摇晃致溶，立即使用。注意：放置时间不要超过一周。
二、配制凝胶
1. 估计所需要的凝胶溶液的体积，一般配制一块 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的胶需要 15 mL 凝胶溶液，配制一块 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的胶需要 120 mL 凝胶溶液。
2. 新鲜的 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液的配制：在装有 60g 丙烯酰胺干粉的瓶中加入约 130 mL 自备的去离子水，然后将全部甲叉双丙烯酰胺加入到同一塑料瓶中（可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低，不会溶解在这少量溶液中）。充分摇晃混匀后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
3. 根据所需要的凝胶溶液的体积，在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分。
后续处理：
1. 染色观察：将凝胶一面的玻璃板揭开，直接用仍然附着在另一玻璃板上的凝胶进行各种染色，包括银染（固定、漂洗、显影和定影等步骤）、EB（每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液）、天泽基因低毒核酸染料 DNAgreen（每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液）。 UV 下观察并拍照。
2. miRNA 回收：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下确定所需要的 miRNA 条带的位置，切胶后进行胶回收处理。
3. Northern 杂交：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下确定所需要的 miRNA 条带的位置，切胶后电转移到带正电的尼龙膜上，然后进行杂交处理。
4. 放射自显影：如果 miRNA 样品电泳前经过同位素标记，则将凝胶一面的玻璃板揭开，用滤纸将附着在另一玻璃板上的凝胶吸附过来，然后包上保鲜膜，真空抽干，然后使胶跟 X 光片向对置进行放射自显影。

Methanococcoides medium (n2/co2)
Microbacter medium
MRS medium with cysteine
Palaeococcus medium
PYG medium (b)
RV5 medium
Sporomusa medium (h2/co2)
Tepidanaerobacter medium
Thermus medium
Tsby salt medium
干粉型2×YT培养基
大肠杆菌MG1655菌种
3T3-L1细胞株
BHK-21 [C-13]细胞株
CTLA4 Ig-24细胞株变幻青霉 Penicillium variabile
人成骨肉瘤细胞英文名称：MG-63
普通变形杆菌 Proteus vulgaris
胶韧革菌 Gloeostereum incarnatum
马松(Masson)三色法染色试剂盒规格：500ml
大鼠淋巴成纤维细胞完全培养基100mL
屎肠球菌 Enterococcus faecium
中慢生华癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii
NCI-H295R(人肾上腺皮质腺细胞)5×106cells/瓶×2
杆菌属 Lactobacillus sp.
苜蓿中华根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
NCI-H446(人小细胞肺细胞)5×106cells/瓶×2gersion
粗状假丝酵母 Candida valida
小鼠肾上皮细胞完全培养基100mL
大鼠表皮黑色素细胞完全培养基100mL
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
HeLa S3 [HeLaS3]细胞株
L6细胞株
MS1细胞株
PANC-1 [PANC1]细胞株
SK-BR-3 [SKBR3]细胞株