脉冲电泳 Marker（ 酵母染色体 PFG）50 次说明

脉冲电泳 Marker( 酵母染色体 PFG)50 次说明产品及特点：
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离 200 nt 以下的小片段 RNA，尤其是 20 nt 左右的 microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是单独配制各种溶液十分繁琐，为此天泽基因开发了本产品。它具有下列特点:
1. 一站式，含有电泳所需要的所有试剂，即开即用，十分方便，免去了实验人员称取有毒物品。
2. 灵活，可以根据需要配制各种浓度的 Urea-PAGE，以便对长度各异的 RNA 进行电泳。
3. 电泳后可直接用于 UV 观察、银染、胶回收、Northern 杂交和放射自显影等。
4. 使用新型缓冲液，可以防止甘油的干扰。
脉冲电泳 Marker( 酵母染色体 PFG)50 次说明产品介绍：

脉冲电泳 Marker( 酵母染色体 PFG)50 次说明使用方法：
一、准备工作
1. 用固相 RNase 清除剂清洁工作的台面和器皿（详见该产品的使用手册）。
2. 配制 1 X 电泳缓冲液 将适量的 10X 电泳缓冲液用 RNase-free 水稀释 10 倍，得到 1X 电泳缓冲液待用。
3. 配制 10%过硫酸铵溶液精确称取约 100 mg 过硫酸铵到一干净的 1.5 mL 离心管中，按每 1 mg 过硫酸铵加 10 uL RNase-free 水的比例加入 RNase-free 水，摇晃致溶，立即使用。注意：放置时间不要超过一周。
二、配制凝胶
1. 估计所需要的凝胶溶液的体积，一般配制一块 13 cm X 15 cm X 0.8 mm 的胶需要 15 mL 凝胶溶液，配制一块 36 cm X 45 cm X 0.8 mm 的胶需要 120 mL 凝胶溶液。
2. 新鲜的 40%的丙烯酰胺-甲叉双丙烯酰胺溶液的配制：在装有 60g 丙烯酰胺干粉的瓶中加入约 130 mL 自备的去离子水，然后将全部甲叉双丙烯酰胺加入到同一塑料瓶中（可以加少量丙烯酰胺溶液冲洗出来以避免粉末有毒粉末飘出。甲叉双丙烯酰胺溶解度低，不会溶解在这少量溶液中）。充分摇晃混匀后所得溶液即 40%的 Acrylamide/Bis 溶液。配制 40%而非 30%的原因是这样可以在下步留出足够空间加尿素。
3. 根据所需要的凝胶溶液的体积，在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分。
后续处理：
1. 染色观察：将凝胶一面的玻璃板揭开，直接用仍然附着在另一玻璃板上的凝胶进行各种染色，包括银染（固定、漂洗、显影和定影等步骤）、EB（每 100 mL 1×TBE 中加 20 uL 10mg/mL 的 EB 溶液）、天泽基因低毒核酸染料 DNAgreen（每 100 mL 1×TBE 中加 10 uL DNAgreen 原液）。 UV 下观察并拍照。
2. miRNA 回收：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下确定所需要的 miRNA 条带的位置，切胶后进行胶回收处理。
3. Northern 杂交：按上法用 EB 等染料染色后，UV 下确定所需要的 miRNA 条带的位置，切胶后电转移到带正电的尼龙膜上，然后进行杂交处理。
4. 放射自显影：如果 miRNA 样品电泳前经过同位素标记，则将凝胶一面的玻璃板揭开，用滤纸将附着在另一玻璃板上的凝胶吸附过来，然后包上保鲜膜，真空抽干，然后使胶跟 X 光片向对置进行放射自显影。

唾液杆菌水杨素亚种 Lactobacillus salivarius subsp. salicinius
土芽胞杆菌 Sporolactobacillus terrae
BPH-1, 人前列腺增生细胞
冬克青霉 Penicillium donkii Stolk
三叶草根瘤菌 Rhizobium trifolii
Streptavidin-HRP(Ready to Use)/Streptavidin-HRP(IHC工作液)3ml、18ml国产
植物杆菌 Lactobacillus plantarum
香菇 Lentinula edodes
人胃细胞英文名称：BGC-803
lovo, 人结肠细胞 HumanpTRE-Cycle1(pTRECycle1)
pTurboYFP-N（pTurboYFPN）
pUN65
pWL625
pYD1(60908-7020)y
rsTagRFP
V50 pCS2+mRFP-N3（V50pCS2mRFPN3）
YEp367R
YRp8phocat
杂交管A
Acetivibrio cellulolyticus medium
Ammonifex degensii medium
BAF medium
Carboxydothermus medium (heterotroph)
Colby and zathman medium
Desulfofaba medium
Dethiosulfovibrio peptidovorans medium
FWM medium (modified)
Haloferax medium rs75
脉冲电泳 Marker( 酵母染色体 PFG)50 次说明Inorganic salts-maltose medium
Marinitoga hydrogenitolerans medium
异常汉逊酵母异常变种 Hansenula anomala var. anomala
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
BT-474(人腺导管细胞)5×106cells/瓶×2