草鱼肝脏细胞;L8824价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,进口来源,保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
草鱼肝脏细胞;L8824价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和ZL。
细胞名称
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 草鱼肝脏细胞由长江水产所建立鉴定,用于草鱼基础研究和病毒疾病FZ研究。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C15
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR STR鉴定
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
汉逊德巴利酵母 Bacillus thuringiensis
苏云金芽胞杆菌蜡螟亚种 Bacillus thuringiensis subsp. galleriae
大鼠脑微血管内皮细胞完全培养基100mL
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
香菇 Lentinula edodes
人膀胱细胞英文名称:5637
尖孢镰刀菌瓜专化型 Fusarium oxysporium f. sp. niveum
木瓜蛋白酶(含100mL酶解缓冲液)10mL
RSC, 大鼠雪旺细胞 Rattus
异酒香酵母 Brettanomyces anomalus
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
MFC-GFP(小鼠前胃细胞(绿色荧光蛋白标记))5×106cells/瓶×2
台湾根霉 Rhizopus formosensis
无花果曲霉 Aspergillus ficuum
大鼠心肌成纤维细胞完全培养基100mL
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
酿酒酵母 Saccharomyces cerevisiae3-Fluoro-4-aminobenzonitrile 4-氨基-3- 63069-50-1
Sweroside 獐牙菜苷 14215-86-2
3-Indoleacetamide 3-吲哚乙酰胺 879-37-8
Piperonyl butoxide 胡椒基丁 1951/3/6
2,5-Dichlorothiophene 2,5-二噻吩 3172-52-9
Ranitidine hydrochloride 雷尼替丁 66357-35-5
Ammothamnine 氧化苦参 16837-52-8
2-Methylbutyl 2-methylbutyrate 2-基-丁酸-2-基丁酯 2445-78-5
D-(+)-Cellobiose D-纤维二糖 528-50-7
PHOSPHATIDYLETHANOLAMINE 脑磷脂 90989-93-8
Carabrone 天名精内酯 1748-81-8
Veratraldehyde 3,4-二氧基 120-14-9
1-NAPHTHYL PHOSPHATE MONOSODIUM SALT MONOHYDRATE 1-萘磷酸单,一水 81012-89-7
TRIMETHYLSILYLMETHYLMAGNESIUM CHLORIDE (三基硅烷)基化镁 13170-43-9
S-SODIUM ETHANETHIOSULFONATE 乙硫代磺酸 31999-88-9
4-Aminobenzonitrile 对氨基 873-74-5
Potassium fluoride 化钾 7789-23-3
1,3-Phenylenediamine sulfate 间硫酸 541-70-8
Diphenyl phosphate 磷酸二酯 838-85-7
METHYL-ALPHA-D-MANNOPYRANOSIDE α-基-D-甘露糖苷 617-04-9
ISOPIMPINELLIN 异茴芹灵 482-27-9
BETA-NICOTINAMIDE ADENINE DINUCLEOTIDE PHOSPHATE SODIUM SALT β-烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸 1184-16-3
N-Nitrosodiphenylamine 亚基 86-30-6