一种产生抗罗非鱼无乳链球菌的单克隆抗体的杂交瘤细胞株;3A9价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,进口来源,保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
一种产生抗罗非鱼无乳链球菌的单克隆抗体的杂交瘤细胞株;3A9价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和ZL。
细胞名称
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
传代方法 1:3传代,3-4天传1次
传代情况 C5
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 未定
细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
电泳过硫酸铵 0.1gx10
21-0400-5 星形胶质细胞生长因子 5mL
90710-100 RNA SDS( 十二烷基硫酸 ) 100g
Poly(U) 聚合酶 60U
BL21(DE3)pLysS 化学感受态细胞 0.1mL×10
Monensin ( 蛋白转运YZ剂 ) 100mg
痰液 DNAout 50 次
23-0520-5 Nocodazole( 有丝分裂YZ剂 ) 5mg
100932-1 溶壁酶干粉 1g
RNA 洗脱液 50mL
肠激酶 ( 轻链 ) 0.032μg
非酶多糖清除剂 (RNA 专用 ) 10mL
6nt 随机引物 ( 抗水解 ),0.5mM 100μL
140642-50 Caspase 8 检测试剂盒 50 次
111205-10 DNA 洗脱液 2.0 10mL
Southern Marker DL2000(DIG) 20 次
DiIC1(5) 碘化物 100mg
预染蛋白质电泳分子量标准 (43.0-200.0 KD) 10 次
AD494(DE3) 菌种 1mL 人宫颈细胞英文名称:HeLa
HAN(人羊膜细胞)5×106cells/瓶×2
TE-10(人食管细胞)5×106cells/瓶×2
SUP-B15(人Ph+急淋白血病细胞系)5×106cells/瓶×2
QGY-7701(人肝细胞)5×106cells/瓶×2gersion
C3H/10T1/2, Clone 8(小鼠胚胎成纤维细胞)5×106cells/瓶×2
MRC-5(人胚肺成纤维细胞 )5×106cells/瓶×2gersion
QGY-7701(人肝细胞)5×106cells/瓶×2
HUVEC, 人脐静脉内细胞
Calu-1(人肺细胞)5×106cells/瓶×2
Endogenous Enzymes Blocking Buffer/内源性碱性磷酸酶封闭液10ml国产
小鼠肾实质细胞完全培养基100mL
B16-F10(小鼠肤黑色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2
小鼠表黑色素细胞完全培养基100mL
1% NaC1甘露醇发酵管BR20支国产/进口
人食管上细胞完全培养基100mL
MiddleBrook 7H10琼脂/MiddleBrook 7H10 Agar分枝杆菌的分离培养250克国产/进口