小鼠结缔组织细胞胸苷激酶缺陷株；L-M（TK-）图片

小鼠结缔组织细胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)图片【温馨提示】细胞用途：只可用于科研，不可用于临床诊断和ZL。
细胞名称 小鼠结缔组织细胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)图片
形态特性  成纤维细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性  L-M (TK-)细胞是L-M（ATCC CCL-1.2 ）细胞系的衍生株，具有抗5-溴脱氧尿核苷（5-bromo-2-deoxyuridine,BUdR）、缺乏胸腺嘧啶核苷激酶（thymidine kinase mutant）的特性，广泛用于遗传学、生物化学基础研究。也可用在体细胞杂交、基因转移等实验研究中。 
培养条件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法  1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C36
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR 
同工酶 同工酶鉴定
染色体 
使用权限 A类
小鼠结缔组织细胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)图片细胞培养步骤：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。
2、培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液：90%完全培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于贴壁细胞，传代可参考以下方法：
1)弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量胰酶，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM条件下离心4分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
小鼠结缔组织细胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)图片质量保证:    
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，进口来源，保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。   细胞到达客户手中，1个月内出现任何问题，导致细胞在冻存前死亡，我们公司都可以免费再向客户提供一次。
小鼠结缔组织细胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)图片操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量PBS润洗细胞，加入适量胰酶，使胰酶的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止胰酶作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。

0.5mL DNA 离心超滤管 (9-15 KD)1个
D007-1Illumina 高通量 DNA 测序1次
130560-10Rosetta-gami(DE3)pLysS 感受态细胞0.1mL×10
小鼠抗 T7 标签单抗100μL
甲基 α-D- 吡喃甘露糖苷25g
三氟100mL
200 μL RNase-free 黄吸头 ( 袋装 )1000 支
穿刺培养基10 管
23-0240-100Etoposide( 依托泊苷 / 鬼臼乙叉苷 )100μL
60801-100柱式腐殖酸清除剂100 次
SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )20L
dNTP 和引物清除剂100 次
包涵体微量纯化试剂盒20 次
植物叶绿体蛋白提取试剂盒50 次
CAS5486-84-0固蓝 BB 盐5g
90510-2包涵体大量纯化试剂盒2次
长效期 SDS-PAGE 电泳液 ( 干粉 )(>30KD)20L
两管式 RT-PCR 试剂盒 (MMLV-Taq)50 次
15mL DNA 离心超滤管 (90-150 KD)1个GSK1210151AI-BET151
（6S，9aS）-Hexahydro-6-[（4-hydroxypheICG-001
Sulfosuccinimidyl-2-（biotinamido）-ethyl-1，3’-dithiopropionate； Biotin disulfide N-Hydroxysulfosuccinimide esterSulfo-NHS-SS-Biotin
2-Pyrimidinamine， N-[4-（4-amino-1-piperidinyl）-2-methoxyphenyl]-5-chloro-4-（1H-indol-3-ylAZD-3463
4-（4-Chlorophenyl）piperazin-1-yl）（morpholino）methanoneAKR1C3 Inhibitor III
2-（Phosphonomethyl）pentane-1，5-dioiNAALDase Inhibitor， PMPA
7，8，13，13α-Tetradehydro-3-hydroxy-2，9，10-trimethoxyberbinium， Neprotin， YatrorizineJatrorrhizine
4，4-Difluoro-8-（4-ethynylphenyl）-1，3，5，7-tetramethyl-4-bora-3a，4a-diaza-s-indaceneBODIPY-Acetylene Reagent
N2-[（2S）-2-（3，5-Difluorophenyl）-2-hydroxyethanoyl]-N1-[（7S）-5-methyl-6-oxo-6，7-dihydro-5H-dibenzo[b，d]azepin-7-yl]-L-alaninamide； LSN-411575LY-411575
N-（6-（4-（2-（（4-methylpiperazin-1yl）methyl）-3-（trifluoromethyl）phenyl）amino）-2-oxoethyl）phenoxy）pyrimidin-4-yl）cyclopropanecarboxamideWS6
DiscoveryPak HDAC Inhibitor Set IIDiscoveryPak HDAC Inhibitor Set II
小鼠结缔组织细胞胸苷激酶缺陷株；L-M(TK-)图片10X Red Blood Cell Lysis Buffer10X Red Blood Cell Lysis Buffer
Histone H4 Peptide， tetra-acetylated， biotin conjugateHistone H4 Peptide， tetra-acetylated， biotin conjugate
1-Methyl-D-tryptophan； IndoximodIDO Pathway inhibitor
雷帕霉素Rapamycin
Pifithrin-uPifithrin-u