小鼠杂交瘤细胞(抗人肺腺癌);LC-1-201图片【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和ZL。
细胞名称 小鼠杂交瘤细胞(抗人肺腺癌);LC-1-201图片
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 悬浮生长
特征特性 可产生抗人肺腺癌的单克隆抗体。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10% FBS
传代方法 1:2。3天内可长满。
传代情况 PN
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 B类
小鼠杂交瘤细胞(抗人肺腺癌);LC-1-201图片细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
小鼠杂交瘤细胞(抗人肺腺癌);LC-1-201图片质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,进口来源,保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
小鼠杂交瘤细胞(抗人肺腺癌);LC-1-201图片操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
PluriSln 1 (5 mg)NSC 14613|N’-phenyl-hydrazine-Isonicotinic acid; 2-phenylhydrazide-4-pyridinecarboxylic acid
Guanethidine (sulfate) (500 mg)N-
Kobe 2602 (10 mg)2-
WZ4002 (10 mg)N-[3-[[5-chloro-2-[[2-methoxy-4-(4-methyl-1-piperazinyl)phenyl]amino]-4-pyrimidinyl]oxy]phenyl]-2-propenamide
Tin Protoporphyrin IX (chloride) (5 mg)NSC 267099|SnPPIX; (OC-6-13)-dichloro[7,12-diethenyl-3,8,13,17-tetramethyl-21H,23H-porphine-2,18-dipropanoato(4-)-κN21,κN22,κN23,κN24]-stannate(2-), dihydrogen
LB 42708 (1 mg)[1-[[1-[(4-bromophenyl)methyl]-1H-imidazol-5-yl]methyl]-4-(1-naphthalenyl)-1H-pyrrol-3-yl]-4-morpholinyl-methanone
1-thio-β-D-Glucose (sodium salt) (250 mg)Click Tag
cis,cis-Octadeca-9,12-dienol (1 g)Linoleic alcohol|Linoleyl alcohol; 9Z,
Baricitinib (25 mg)INCB 028050|LY3009104; 1-(ethylsulfonyl)-3-[4-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-1H-pyrazol-1-yl]-3-azetidineacetonitrile
CX-4945Silmitasertib; 5-[(3-chlorophenyl)amino]-benzo[c]-2,6-naphthyridine-8-carboxylic acid
BRD73954 (10 mg)N1-hydroxy-N3-(2-phenylethyl)-1,3-benzenedicarboxamide
MCC-555 (5 mg)Isaglitazone|Netoglitazone|RWJ 241947; 5-[[6-[(2-fluorophenyl)methoxy]-2-naphthalenyl]methyl]-2,4-thiazolidinedione
Heroin (50 mg)3,6-Diacetylmorphine|Acetomorphine|Diamorphine; 7,8-didehydro-4,5-epoxy-17-methyl-(5α,6α)-3,6-diacetate-morphinan-3,6-diol
(R)-nitro-Blebbistatin (1 mg)R-(
Trimethoprim-PEG-amine (trifluoroacetate salt) (500 ug)N-(2-(2-(2-(2-aminoethoxy)ethoxy)ethoxy)ethyl)-2-(4-((2,6-diaminopyrimidin-4-yl)methyl)-2,6-dimethoxyphenoxy)acetamide tris(2,2,2-trifluoroacetate)
Extracellular Death Factor (1 mg)EDF
乙酰化组蛋白H4K5多肽Acetyl Histone H4K5 Peptide (200 ul)TMB 法地高杂交试剂盒5次
非酶多糖清除剂 (DNA 专用 )50 次
天狼猩红5g
植物种属鉴定 PCR Mix 10100 次
CAS13746-66-2铁氰化500g
91101B-100一管式 TMB 显色液 B ( 沉淀型 ) 100mL
60204-10非酶多糖清除剂 (RNA 专用 )10mL
Oligo(dT) 再生溶液100mL
Caspase 2 检测试剂盒50 次
血清白蛋白清除剂15 次
丁基硫介质50mL
130661-200RecA 蛋白200μg
130988-1EcoR I-Not I-BamH I 接头1nmol
小鼠抗 CBP 标签单抗100μL
即用型高保真 PCR 试剂盒1.5mL
胰蛋白胨500g
BamHI2000U
重蒸酚100mL
22-0620-5Zinquin 乙酯5mg
小鼠杂交瘤细胞(抗人肺腺癌);LC-1-201图片671-150血液 DNAout150 次
青 G 盐1g
C43(DE3) 菌种1mL
RNase A 溶液,10mg/mL1.5mL
X 光片 (5×7 英寸 )1盒
131136-100Ficoll-Paque 介质100mL