BinaxNOW疟原虫抗原检测试剂盒（胶体金法）

疟疾(Malaria)是疟原虫寄生于人体所引起的传染病。经疟蚊叮咬或输入带疟原虫者的血液而感染。不同的疟原虫分别引起间日疟、三日疟、恶性疟及卵圆疟。本病主要表现为周期性规律发作，全身发冷、发热、多汗，长期多次发作后，可引起贫血和脾肿大。儿童发病率高，大都于夏秋季节流行。疟疾流行于102个国家和地区，特别是在非洲、东南亚和中、南美洲的一些国家，恶性疟死亡率极高。
     BinaxNOW疟疾快速检测试剂是美国*一个获FDA注册的疟疾快速诊断试剂产品；是ZG到目前为止*一个获得SFDA注册的疟疾快速诊断试剂；获得进入欧盟市场的准入资格，并且获WHO认证疟疾快速检测试剂。

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通用名称：疟原虫抗原检测试剂盒（胶体金法）

英文名称：Binax NOW® Malaria Test

包装规格

25人份/盒

预期用途

疟原虫抗原检测试剂盒（胶体金法）是体外免疫层析试验，用于定性检测具有疟疾症状和体征人群EDTA抗凝静脉血或毛细血管血中的恶性疟原虫抗原和间日疟原虫抗原，可对恶性疟原虫，间日疟原虫做出辅助诊断，并可对恶性疟原虫和间日疟原虫做出鉴别诊断。

该试验不用于无症状人群的筛查。

检验原理

疟原虫抗原检测试剂盒（胶体金法）使用的是薄膜免疫层析技术，该技术用单克隆抗体检测静脉血和末梢血中的恶性疟原虫抗原和间日疟原虫抗原，这两种抗体与对照抗体固定到膜支持物上形成三条不同的线，膜支持物与样品垫相连，结合有可视粒子的对照抗体和抗疟原虫抗体浸渗在样品垫上，组成检测条。检测条位于一块书形铰链状的检测卡中，与冲洗垫和吸收垫一道参与检测板闭合后薄膜的清洗。

检测时，将全血加到样品垫上，标本中存在的疟原虫抗原与抗疟原虫抗体结合物结合。将A试剂液加到检测条的底部，使抗原结合物复合物沿检测条流动，在固定抗体处被捕获，形成检测线，固定的对照抗体捕获对照结合物，形成对照线。一旦血标本流过检测条，就将检测板闭合，使加到冲洗垫中的A试剂把检测条上多余的血液冲去。

检验结果可用紫红色线的存在与否来解释。15分钟读数时，阳性结果将包括一条检测线（或两条检测线）和一条对照线，阴性结果只产生一条对照线，阴性表明标本中未检出疟原虫抗原。如果不出现对照线，不管检测线出现与否，结果都为无效。

主要组成成份

1．检测卡

2．A试剂：含去污剂和叠氮钠的Tris缓冲液。

3。毛细管：EDTA抗凝毛细管，用于将末梢全血加入到检测卡中。

自备材料

采血针，灭菌拭子或棉球，时钟，秒表或跑表

注：加样时，要使用能加样15μL体积的经过校准的加样器。

储存条件及有效期

试剂盒在2-37度贮藏。

试剂有效期为自生产之日起24个月。

试剂在满足贮藏条件的情况下可稳定使用至效期（效期标注在外包装和试剂盒内）结束。

样本要求

EDTA抗凝的新鲜全血。手指血要立即测试，静脉血可于2-30度保存3天，但测试前须平衡至室温（15-30度），并彻底混匀。

检验方法

样本采集和处理：

用标准的静脉血采集程序采集静脉血，注入EDTA抗凝管中。全血样品采集后要尽快测试，如果不能马上进行操作，可将血液在2-30度保存3天。如果血液被冷藏，测试前将之平衡至室温（15-30度），并轻轻混匀。

手指穿刺留取毛细血管血时，用无菌拭子或纱巾将采血区擦净，风干，用采血针刺破皮肤，把血液直接收集在EDTA毛细管中，注满，立即使用。

检测前确保所有标本都平衡至室温。

检测步骤：

检测前从包装代中取出检测板。打开包装，把它平放在工作台面上。

1．如果使用毛细血管血，慢慢将微量毛细管中的血液加到检测板右侧的整个紫色样品垫上。加样时将毛细管垂直持放，在样品垫的几个部位加样，一旦样品垫达到饱和，就可将毛细管丢弃处理，本试验未必需要毛细管中收集的全部血液。到步骤2。

如果使用的是静脉血标本，用加样头在血液中吸排几次，然后慢慢加入15μL血液，打到紫色样品垫上。到步骤2。

重要提示：加样不正确可导致结果无效或结果无法解释。

2．紧靠紫色样品垫的下边有一个白色垫，垂直加2滴A试剂到白色垫上，第2滴须在*滴被垫吸收后方可加入。不要把A试剂直接加在紫色垫上。

3．让血标本流经整个检测条，但不要使血液溢出或低于检测条上部的吸收垫，因为这样会影响检测条的Z佳冲洗效果。

注意：如果1分钟后检测条上的血流阻断或流动不到条的1/2，可再加一滴A试剂到检测条下部的白垫上（位于加血的标本垫下方）

4．在血标本到达检测条上部的白色吸收垫底部前，慢慢向检测板左上方的冲洗垫中加入4滴A试剂，当前一滴吸收后，才能加下一滴。注意：第三滴和第四滴可能不能被完全吸收。

5当标本到达检测条上部白色吸收垫底部的时候，从检测板右边将粘附衬揭去，闭合检测板。这可使A试剂将血标本从检测条上冲去。为确保检测板闭合良好，试验流畅，用力按压结果窗口的右边缘。

6.闭合检测板15分钟后从视窗中读取结果。不足15分钟或大于15分钟读取的结果可能不正确。

注：读结果时，如有必要可将检测板倾斜以减轻结果窗口中耀眼的光线。

参考值（参考范围）

对恶性疟原虫的Z低检测限是1001-1500个寄生虫/微升。

对间日疟原虫的Z低检测限是5001-5500个寄生虫/微升。

检验结果的解释

对照线（C）会出现在所有有效试验中，当存在对照线时，试验结果可如下解释。注：出现的任意检测线，即使颜色非常浅淡，也解释为阳性结果。

有效试验结果

对照线（C）会出现在所有有效试验中，当存在对照线时，试验结查可如下解释。注：出现的任意检测线，即使颜色非常浅淡，也解释为阳性结果。

无效和/或无法解释的试验结果

如果对照线不出现，不管检测线出现与否结果都是无效的。

15分钟时，如果背景色妨碍读数，结果无法解释，标本或A试剂的加入方法不正确可导致试验无效或试验结果无法解决，请与技术部门。

检验方法的局限性

阴性试验结果不能排除疟疾感染，特别是寄生物在低水平时，因此，用Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒获得的结果必须与其它化验结果和临床检查相结合以做出准确诊断。这一点在显微镜检查中经常用到，再收集一份标本，再测一次。

Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒既可检测活疟原也可检测死疟原虫抗原，包括配子细胞4和随后产生的裂殖体5。检测依赖于标本中的抗原载量，可能与显微镜对同一份标本的检查无直接相关性。

Binax NOW® 疟原虫抗原检测试剂盒尚不能用于监测疟疾的治LX果，因为用抗疟疾药物将疟原虫杀灭后几天内仍可检出疟原虫抗原4。

类风湿因子阳性的标本在Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒中可能出现假阳性。类风湿因子是一种自身抗体，类风湿因子女阳性与急性自身免疫病，如类风温性关节炎，慢性病毒性感染（如，病毒性肝炎），寄生虫感染有关6。此外，在正常人群中有1-4%的人类风湿因子阳性7。同其它疟原虫抗原快速检测试验一样，Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒对类风湿因子阳性个体标本也产生假阳性（见操作特性部分）。

该试验不用于无症状人群的筛查。

产品性能指标

预期值

疟疾是一种严重的寄生虫病，是热带亚热带地区危害分健康的主要因素之一。疟原虫的阳性检出率受多种因素影响，包括标本采集方法，检验手段，地理位置和疾病在特定区域流行性。恶性疟原虫感染被认为是Z凶险的，而间日疟原虫很少有致命性。

2011年，在疟疾地方流行区域进行了一项临床研究。在有症病人中，恶性疟疾（用显微镜检查进行了确定）平均占14%，间日疟疾平均占29%，恶性疟与间日疟的混合感染占的比例非常低。

2005-2006年在美国东部进行了一项多层研究，从发热和有发热史的住院和门诊病人（这些病人住在很少发生疟疾的地区，被看作是疟原虫阴性病人）中收集体了217份全血标本，用Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒进行检测，结果216（99.5%）人阴性。

操作特性

临床标本特性- Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒敏感性和特异性-地方流行人群：

2001年在美国国疟原虫流行地区进行了一个多ZX前瞻性研究，研究中将Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒与吉姆染色显微镜技术进行了比较。从带有疟原虫样症状的病毒人中采集了4122份全血标本用Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒评价。由于疟原虫的无性形式（非配子体）表示有大感染，因此，显微镜检测只有检查到疟原虫的无性形式才能视为阳性。

测试人群中44%的人（1796/4122）用显微镜检查为疟疾阳性，其中有557个病人为恶性疟，1187个人为间日疟，34个人为恶性疟/间日疟混合感染。59%的人为男性，41%的人为女性。19%的人为儿童，81%的人为***。Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒对单种疟原虫和恶性疟/间日疟混合感染的性能概述如下。

Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒的试验性能在病人的年龄和性别方面没有差异，Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒对恶性疟的特异性在5%接受过抗疟药物ZL的病人中（89.4%）较之未ZL的病人（94.4%）有少许下降，但无统计学差异。

在整个研究人群中，Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒对低红细胞压积和高红细胞压积样本的试验性能是等同的。

对恶性疟原虫感染的检测

Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒和显微镜检查对恶性疟原虫的敏感性和特异性情况如下所示。对敏感性的评价基于显微镜检查中观察到的寄生物血症水平（每微升的寄生虫量）。

Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒与显微镜检查在恶性疟原虫敏感性和特异性方面的比较

恶性疟的敏感性

恶性疟的特异性

间日疟原虫感染的检测

Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒和显微镜检查对间日疟原虫的敏感性和特异性情况如下所示.。对敏感性的评价基于显微镜检查中观察到的寄生物血症水平（每微升的寄生虫量）。有68份标本显微镜检查仅间日疟原虫阳性，用Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒检查却出现了两条检测线。如果这些结果也记录在阳性之列，Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒对间日疟原虫测定的总敏感性从98.9%提高到74.6%（886/1,187）。

对间日疟原虫的敏感性

对间日疟原虫的特工异性

恶性疟和间日疟的检测限：

在上述研究中，经确定Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒对恶性疟的临床检测限（LOD）（定义为95%的检测次数产生阳性结盟查的寄生虫血症水平）为1001-1500个寄生虫/微升，对间疟的检出限为5001-5500个寄生虫/微升。

样品的临床性能-Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒在流行人群中对指血和静脉血的敏感性和特异性：

2003年在美国国外疟疾流行区域进行了一项前瞻性研究，该研究用静脉血和指血对Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒的性能与吉姆萨显微镜法进行了比较。 Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒评估的全血采自787位有疟疾症状的病人的静脉血和指尖。由于无性体（非配子体）表示有感染，显微镜检查只有查到无性体方可视为阳性。

用Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒和显微镜法对782份静脉血标本和784份指尖血标本进行分析，Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒相对显微镜法对恶性疟和间日疟的敏感性和特异性如下：

与显微镜法相比，Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒对静脉血和指尖血中恶性疟和间日疟的敏感性和特异性

样本的临床特性- Binax NOW®疟疾试验特异性-非流行人群

2006-2007年在美国东部进行了一项前瞻性研究，该研究对Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒的性能与吉姆染色镜检进行了比较。对100份取自发热病人的血标本用Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒和显微镜法进行了评估。100份样品中，显微镜检查结果全为阴性，Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒中99例阴性，特异性为99%（99/100）。与显微镜法相比，Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒的特异性如下：

分析反应性：

两种感染人体的疟原虫（恶性疟原虫，间日疟原虫）在下列浓度时在Binax NOW®疟原虫抗原检测试剂盒中检测阳性。

分析特异性（交叉反应性）

为了确定Binax NOW®疟原虫抗体检测试剂盒的分析特异性，对28种血中可能存在的病原微生物（7种细菌，5种原生生物，16种病毒）进行了检测。在下列浓度时检测全为阴性。

来自血液外源成分的干扰

下列物质可为人为引入血液中，用Binax NOW®疟原虫抗体检测试剂盒进行评估，在下列浓度时未发现对试验性能造成影响。注：这些药物Binax NOW®疟原虫抗体检测试剂盒的分析效应是通过采集全血，加入高ZL浓度量药物，然后再对这些样品进行检测而进行研究的。这些药品的代谢物对试验的影响未进行研究。

*QL霉素也用作KJ素，用量通常比本测试研究要低的多。

血液内源性成分的干扰

根据CLSI EP7导则，对高水平的血液中的内源性成分可能对Binax NOW®疟原虫抗体检测试剂盒造成的干扰进行评估。对EDTA抗凝全血中高于生理水平的血红蛋白、蛋白、血红素（结合型和未结合型）和甘油三酯进行了测试，所有这些血液内源性成分均未对试验性能造成影响。

BinaxNOW疟原虫抗原检测试剂盒（胶体金法）