EasySep Magnet
用于分离2.5 x 108个细胞的无柱免疫磁珠分选磁极
基本信息
英文名称 EasySepTM Magnet
中文名称 EasySep磁极
用途:磁珠法分离细胞
样本数量:1
起始样本的细胞数量范围:可容纳1个5 mL试管,每次可分离0.1 - 2.5 x 108个细胞
收集方法:倾倒
产品订购信息
品Pai | 货号 | 产品描述 |
StemCell | 18000 | EasySep Magnet无柱免疫磁珠分选磁极,紫色 |
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Stemcell 18000 EasySep Magnet无柱免疫磁珠CAR-T细胞分选磁极产品华雅再生医学旗舰公司:红荣微再(上海)生物工程技术有限公司 :152 1681 4001。华雅再生医学-客服: 316 808 6348。
特点
快速、简单。在短至8分钟内,从几乎所有样本来源中分离细胞,且无需分离柱或清洗细胞。
温和。获得具有较高活性和功能性的细胞,可立即用于下游应用。
高纯度。细胞纯度可高达99%,且回收率高。
原理
使用EasySep Magnet磁极适配试剂盒,磁性颗粒通过四聚体抗体复合物和细胞交联。放在磁极中后,标记细胞移动到试管壁。没有标记的细胞被倒出。
详细:
通过使用对表面抗原具有特异性的抗体复合物,经标记的细胞可被去除(负选),也可被分选(正选)。抗体复合物可将目标细胞与磁珠相连接。当样本被置于EasySep™磁极中,经标记的细胞在磁场的作用下将被吸附于试管壁上。未经标记的细胞则可被轻松倾倒或吸取到一个新的试管中,而被磁珠标记的细胞则保留在试管中。
材质
EasySep Magnet磁极构成:外壳为阳极氧化铝(anodized aluminum),内含稀土磁元素。
EasySep Magnet磁极用于使用EasySep试剂的细胞分离。磁极在内洞中生成强磁场,无柱就能分离EasySep磁性颗粒标记细胞。
使用方法
常规的EasySep Magnet磁极分选人细胞的操作流程(负选)

1.将EasySep™分选抗体混合物加入到单细胞悬液中,并孵育3分钟
2.将EasySep™ RapidSpheres™ 加入到细胞悬液中。
3.将试管放置在EasySep Magnet磁极中,并孵育3分钟。
4.将目标细胞倾倒至新的试管中。
*该时间是新一代的负选试剂盒所需的常规时间。每款试剂盒所需的实际时间取决于使用的磁极和分选流程。新一代的负选流程中无需磁珠孵育的步骤。
孵育时间能改变吗?
可以。但现在的是优化后的Z佳时间。
建议用量(可以分离少量细胞)
Z低工作体积:100 µL。细胞密度:2x108 cells/mL。
含2x107个或更少细胞的样本要先加100 µL缓冲液。
EasySep Magnet磁极只和EasySep试剂盒搭配使用。
新版改进EasySep™ 试剂盒
细胞类型 | 产品货号 |
负选 |
T 细胞 | 17951 |
CD4+ T 细胞 | 17952 |
CD8+ T 细胞 | 17953 |
B 细胞 | 17954 |
Naïve B 细胞 | 17254 |
NK 细胞 | 17955 |
Monocytes | 19359 |
正选 |
CD3+ 细胞 | 17851 |
CD4+ 细胞 | 17852 |
CD8+ 细胞 | 17853 |
CD14+ 细胞 | 17858 |
CD19+ 细胞 | 17854 |
CD56+ 细胞 | 17855 |
正选还是负选
虽然Stemcell正选产品已经有几百篇文献证明使用不会影响被分离细胞性质。如果还是担心的话,可以选择负选细胞,所得细胞没有被标记,不会有结合抗体可能影响下游研究。
推荐T细胞负选试剂盒
细胞类型 | 货号 | 产品名称 | 纯度 | 适用的染色抗体 |
T细胞 | 17951 | EasySep Human T Cell Isolation Kit EasySep™人T细胞分选试剂盒 | 96.7 ± 1.5% | CD2(货号#60007) CD3(货号#60011) CD4(货号#60016) CD8a(货号#60022) CD45(货号#60018) |
19051 | EasySep Human T Cell Enrichment Kit EasySep™人T细胞富集试剂盒(17951的旧版) | 95.0 - 99.0% |
应用
EasySep Magnet磁极可用于以下研究领域的细胞分离阶段:
B细胞研究、树突状细胞研究、粒细胞研究、 杂交瘤制备、总淋巴细胞研究、间充质干细胞和祖细胞、单核细胞研究、髓系细胞研究、NK细胞研究、T细胞研究、HLA分析、T细胞工程、嵌合体分析
特别适用:CAR-T细胞分选
用磁珠法分离T细胞,相比其他方法,既耗时少又能保持细胞活性,对临床研究造成影响Z小。2
CAR-T免疫疗法的背景
继诺华和Kite公司两款CAR-T细胞ZL被FDA批准,2017年被媒体评为CAR-T疗法的元年。刚过去的11月6号,FDA又允许一款CAR-T在研产品的临床研究继续进行。3
文献——使用EasySep相应人T细胞分选试剂盒进行CAR-T疗法的磁珠分选
文献 | 疾病 | 靶点 | CAR-T细胞工程 | 细胞分选产品 | 货号 |
4 | Z常见肝癌HCC(hepatocellular carcinoma ) | HCC特异性分泌蛋白抗原(alpha-fetoprotein ,AFP) | —— | EasySep™ Human T Cell Isolation Kit | 17951 |
5 | 多种肿瘤:carcinomas, neuroblastomas and leukemias等 | 多种肿瘤 | 表达自然杀伤细胞受体1(NCR1 ,natural cytotoxic receptor 1) | EasySep™ Human T Cell Isolation Kit | 17951 |
试管选择
试管要求:标准5mL(12 x 75 mm)聚苯乙烯试管。
EasySep Magnet磁极的O型环是为聚苯乙烯管设计的。如果您因为单核细胞会粘在聚苯乙烯管上而选用聚丙烯,建议在O型环和腔体之间插小片橡胶带缩小直径。
品Pai | 货号 | 产品描述 | 用途 |
Stemcell | 38007 | 标准5mL(12 x 75 mm)聚苯乙烯试管 | 磁极尺寸适配试管 |
储存:15 - 25°C。
注意强磁场:远离起搏器、磁铁、光盘、手表和其他会被磁力影响物品。
清洗养护
细胞分选完成后,用蒸馏水擦拭磁极,再用酒精擦拭蒸干水分。
EasySep Magnet磁极消毒:先用10%稀释家用漂白剂擦,再用湿布擦掉漂白剂,以免腐蚀磁极金属部分。不能把磁极浸没在液体中。
质控
产品质量管理系统经ISO13485认证。如无特别说明,产品仅供研究使用,不用于人或动物的诊断ZL。
英文版说明书(Stemcell 18000 EasySep Magnet无柱免疫磁珠CAR-T细胞分选磁极)
Product Description
The EasySep™ Magnet is an anodized aluminum body housing rare earth magnetic elements.
The EasySep™ Magnet is designed for cell separation procedures using EasySep™ reagents. The EasySep™ Magnet generates a highgradient magnetic field in the interior cavity that is strong enough to separate cells labeled with magnetic EasySep™ particles without the use of columns. This magnet is designed to hold a standard 5 mL (12 x 75 mm) polystyrene round-bottom tube (e.g. Catalog #38007).
STRONG MAGNETIC FIELD: Keep away from pacemakers, magnets, computer disks, watches, and other objects that respond to magnetic fields.
Properties
Storage:Store at 15 - 25°C.
Handling / Directions For Use
The EasySep™ Magnet is only for use with certain EasySep™ kits.
The EasySep™ Magnet is designed to hold a 5 mL (12 x 75 mm) polystyrene round-bottom tube (e.g. Catalog #38007).
The size of the O-ring was selected for polystyrene tubes. Polystyrene tubes were chosen because recovery is typically better than with polypropylene tubes. Some customers may prefer to use polypropylene tubes because monocytes may adhere to polystyrene. If polypropylene tubes are used, we advise that the diameter of the opening be reduced by inserting a small piece of rubber band between the O-ring and the housing.
CARE OF MAGNET: After completing a cell separation, wipe the magnet clean with distilled water and then with alcohol to dry the magnet. To disinfect the magnet, wipe with 10% diluted household bleach and then wipe off with a water-dampened cloth to avoid corrosion of metal parts. Do not submerge the magnet in liquid.
参考文献
1.EasySep Magnet相关:Efficient delivery of nuclease proteins for genome editing in human stem cells and primary cells.Liu J et al.
2.诺华CAR-T:Global Manufacturing of CAR T Cell Therapy.Bruce L.Levine et al.
3.CAR-TZ近新闻:FDA Lifts Clinical Hold on Cellectis Phase 1 Clinical Trials with UCART123 in AML and BPDCN.
4.Stemcell CAR-T细胞分选试剂盒(2017) Targeting alpha-fetoprotein(AFP)-MHC complex with CAR T-cell therapy for liver cancer. Liu H et al.
5.Stemcell CAR-T细胞分选试剂盒(2014) An NCR1-based chimeric receptor endows T-cells with multiple anti-tumor specificities. Tal Y et al.
EasySep Magnet无柱免疫磁珠分选产品资料由红荣微再整理翻译。
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