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实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗C3抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗C3抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色.TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色.颜色的深浅和样品中的C3呈正相关.用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度.
标本的采集及保存
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过后于1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融.
2.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000 x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融.
3.细胞培养物上清或其它生物标本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检猜,或交眏本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融.
4.样本处理:血清或血浆标本推荐稀释10,000倍.
注:以上标本置4℃保存应小于1周,-20℃或-80℃均应密封保存,-20℃不应超过1个月,-80℃不应超过2个月;标本溶血会影响Z后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测.
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