CRISPR/Cas9技术制备基因敲入大、小鼠,实验技术服务,行业ling先,年末尊享底价大优惠!
博舜联合医学实验ZX是一所由复旦大学,第二军医大学,华东师范大学,生命科学研究所,上海市调控生物学ZD实验室,ZG科学院上海药物研究所等同道精英共同打造的一站式医学实验服务平台。我们的顾问团队来自清华大学、复旦大学,交通大学,浙江大学、中山大学、华东师范大学、ZG科学院上海药物研究所、德克萨斯农工大学、哈佛医学院、贝勒医学院等知名高校和研究机构的生命科学领域专家、学者组成。
博舜长期从事基因敲除/敲入大、小鼠相关工作,团队成员在Nature Biotechnology、Nature Protocol、Nucleic Acids Research等国际知名杂志发表高水平文章。本公司可通过Cas9、TALEN技术进行基因敲除大小鼠及条件敲除小鼠的制备工作,获得Founder仅需2个月、获得稳定遗传的F1代仅Z快仅需4个月。如有需要咨询、交流。:
一、技术原理
Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats(CRISPR)是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制,其中II型CRISPR/Cas免疫系统依赖Cas9内切酶家族靶向和剪切外源DNA。在这一系统中,crRNA(CRISPR-derived RNA)通过碱基配对与tracrRNA(trans-activating RNA)结合形成双链RNA,此tracrRNA/crRNA二元复合体指导Cas9蛋白在crRNA引导序列靶定位点剪切双链DNA,其中Cas9的HNH核酸酶结构域剪切互补链,其RuvC-like结构域剪切非互补链。具体如下图所示:
二、CRISPR/Cas9技术特点
1、靶向精确性更高;RNA靶向序列和基因组序列必须完全匹配,Cas9才会对DNA进行剪切。
2、可实现对多个靶基因位点以及多个基因同时进行敲除。
3、试验周期短,获得F0代仅需2个月。
4、无物种和品系限制,可对大鼠和小鼠进行敲除、敲除、点突变等编辑。
三、服务流程及周期
1、靶向目标序列的Guide RNA设计、显微注射、F0代鉴定;
2、提供3只以上F1代小鼠
3、获得Founder仅需2个月,4个月即可获得F1代
获得F1代杂合子小鼠后,完成基因敲除及表达检测,提供不少于3只F1代杂合子小鼠,通知委托方领取小鼠。
部分案例展示
Gene Name | Strains | KO/KI | Methods |
Lepr | C57BL/6 | KO | TALEN |
Lepr | FVB/N | KO | TALEN |
Pak1ip1 | C57BL/6 | KO | TALEN |
Gpr55 | FVB/N | KO | TALEN |
Rprm | C57BL/6 | KO | TALEN |
Fbxo6 | C57BL/6 | KO | TALEN |
Smurf1 | C57BL/6 | KO | TALEN |
Tmem74 | C57BL/6 | KO | TALEN |
Wdr20a | C57BL/6 | KO | TALEN |
Dcaf13 | C57BL/6 | KO | TALEN |
Fam73a | C57BL/6 | KO | TALEN |
Th | FVB/N | KO | CRISPR-Cas |
Th | B6 | KO | CRISPR-Cas |
Rheb | B6 | KO | CRISPR-Cas |
Uhrf2 | FVB/N | KO | CRISPR-Cas |
Mc3r | Sprague-Dawley | KO | CRISPR-Cas |
Mc4r | Sprague-Dawley | KO | CRISPR-Cas |
Lepr | Sprague-Dawley | KO | CRISPR-Cas |
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