抗肿瘤坏死因子α小鼠杂交瘤细胞;7A8价格质量保证:
我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,进口来源,保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。 细胞到达客户手中,1个月内出现任何问题,导致细胞在冻存前死亡,我们公司都可以免费再向客户提供一次。
抗肿瘤坏死因子α小鼠杂交瘤细胞;7A8价格操作步骤:
1)贴壁细胞传代:提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内,吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞,加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用,用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。
2)悬浮细胞传代:将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min,弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液,将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
抗肿瘤坏死因子α小鼠杂交瘤细胞;7A8价格【温馨提示】细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和ZL。
细胞名称抗肿瘤坏死因子α小鼠杂交瘤细胞;7A8价格
形态特性 淋巴母细胞样
生长特性 半贴壁生长
特征特性 可产生单克隆抗体,抗原为肿瘤坏死因子α。
培养条件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
传代方法 保持细胞密度在1×105~1×106 cells/ml之间,每周换液2~3次
传代情况 不详
冻存条件 基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR -
同工酶
染色体
使用权限 A类
抗肿瘤坏死因子α小鼠杂交瘤细胞;7A8价格细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1、准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸钠 0.11g/L),90%;优质胎牛血清,10%。
2、培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3、冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1)弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3)按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4)将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3、细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM条件下离心4分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO后进行冻存。
Rottlerin (50 mg)(2E)-1-[6-[(3-acetyl-2,4,6-trihydroxy-5-methylphenyl)methyl]-5,7-dihydroxy-2,2-dimethyl-2H-1-benzopyran-8-yl]-3-phenyl-2-propen-1-one; Mallotoxin|NSC 94525|NSC 56346; Rottlerin
N-(2-chloropentyl) analog (1 mg)(1-(2-chloropentyl)-1H-indol-3-yl)(2,2,3,3-tetramethylcyclopropyl)methanone; N-(2-chloropentyl) analog
Ritonavir (50 mg)(4S)-4-hydroxy-12-methyl-9S-(1-methylethyl)-13-[2-(1-methylethyl)-4-thiazolyl]-8,11-dioxo-3S,6S-bis(phenylmethyl)-5-thiazolylmethyl ester-2,7,10,12-tetraazatridecanoic acid; A-84538|ABT-538|NSC 693184|RTV; Ritonavir
2,3-MDA (hydrochloride) (10 mg)α-methyl-1,3-Benzodioxole-4-ethanamine, monohydrochloride; 2,3-Methylenedioxyamphetamine; 2,3-MDA (hydrochloride)
Propylthiouracil (50 g)2,3-dihydro-6-propyl-2-thioxo-4(1H)-pyrimidinone; PTU|NSC 6498|NSC 70461|6-n-Propylthiouracil; Propylthiouracil
Indirubin (10 mg)3-(1,3-dihydro-3-oxo-2H-indol-2-ylidene)-1,3-dihydro-2H-indol-2-one; C。I。 73200|Indigopurpurin|Couroupitine B|NSC 105327; Indirubin
HMA (hydrochloride) (50 mg)4-(2-aminopropyl)-2-methoxy-phenol, monohydrochloride; 4-hydroxy-3-Methoxyamphetamine|NSC 172191; HMA (hydrochloride)
4-APB (hydrochloride) (5 mg)α-methyl-4-benzofuranethanamine, monohydrochloride; 4-(2-Aminopropyl)Benzofuran; 4-APB (hydrochloride)HMCL-011U2OSE6Tet6人骨肉瘤细胞1×1061ml/T751500 元
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Chloramphenicol (100 g)2,2-dichloro-N-[(1R,2R)-2-hydroxy-1-(hydroxymethyl)-2-(4-nitrophenyl)ethyl]-acetamide; CAF|CAM|CAP|NSC 3069; Chloramphenicol
PB-22 N-(4-hydroxypentyl) metabolite (10 mg)quinolin-8-yl 1-(4-hydroxypentyl)-1H-indole-3-carboxylate; PB-22 N-(4-hydroxypentyl) metabolite