Lip2000转染试剂 BL623B 现货

Lip2000转染试剂 BL623B 现货

Lip2000Transfection Reagent

产品编号 产品名称 规格

BL623A Lip2000Transfection Reagent 0.5ml

BL623B Lip2000Transfection Reagent 1ml 产品简介： Lip2000 是一种新型的阳离子脂质体转染试剂。适合于将核酸(DNA 和 RNA)转染入真 核细胞，具有低细胞毒性；对多种类型的细胞都具有高转染效率；转染时血清的存在不影响 转染效率的优点。 适用范围： 贴壁细胞和悬浮细胞（哺乳动物细胞系）的转染。 质粒 DNA 的转染：对大多数细胞来说，DNA(µg)与 Lip2000(µl)的比例为 1:2~1:3。转 染时高的细胞密度可以得到高的转染效率 和表达水平，并能减少细胞毒性。 1、以 24 孔板为例 贴壁细胞： 转染前一天，用 500µl 不含抗生素的培养基接种 0.5-2×10 5 细胞，使之第 二天能达到 70-90%汇合。 悬浮细胞：在准备 DNA-Lip2000 复合物之前，用 500µl 不含 抗生素的培养基接种 4-8×10 5 细胞即可。 2、对每个转染样品，进行以下操作 （1）在eppendorf管里分别加入50µl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 µg DNA， 轻柔混匀，制成 DNA 稀释液。 （2）在另一个 eppendorf 管里分别加入 50µl Opti-MEM I ReLipced Serum Medium 和 2.0µlLip2000（注意用前先混匀），轻柔混匀，制 成 Lip2000 稀释液，室温静置 5 分钟。 （3）将 DNA 稀释液和 Lip2000 稀释液混合，轻柔混匀，室温静置 20 分钟， 形成 DNA-Lip2000 复合物。DNA-Lip2000 复合物在室温下可稳定存在 6 小时。 3、将 DNA-Lip2000 复合物加入到接种好的细胞中，将培养板轻轻地前后摇动，使复合 物分散均匀。 4、在 37℃CO2培养箱中培养 4-6 小时后更换培养基,继续培养 18-48 小时。 5、如果要筛选稳定细胞株，则在转染 24 小时后将细胞按照 1:10 或更高的比例接种到

新鲜培养基中，第二天加 入选择性培养基进行筛选。 质粒 DNA 转染的优化：为达到Z高的转染效率和降低细胞毒性的影响，可以对 DNA 和 Lip2000 的比例以及细胞密度进行优化，一般在 1:0.5~1:5 的范围内优化 DNA (µg)和 Lip2000 (µl) 的比例。 不同细胞培养板中转染时培养基、核酸及 Lip2000 用量: 细胞培 养板 每孔面积 培养基用量 DNA 转染 siRNA 铺板培养 基用量 稀释培养 基用量 96-well 0.3 cm2 100 ul 2 × 25 µl 0.2µg 0.5µl 5 pmol 0.25µl 24-well 2 cm2 500 ul 2 × 50µl 0.8µg 2.0µl 20 pmol 1.0µl 12-well 4 cm2 1 ml 2 × 100µl 1.6µg 4.0µl 40 pmol 2.0µl 6-well 10 cm2 2 ml 2 × 250µl 4.0µg 10µl 100 pmol 5µl 60-mm 20 cm2 5 ml 2 × 0.5 ml 8.0µg 20µl 200 pmol 10µl 10-cm 60 cm2 15 ml 2 × 1.5 ml 24µg 60µl 600 pmol 30µl 保存条件： 2-4℃保存一年（避免冷冻）。

Lip2000转染试剂 BL623B 现货