GBICO美国胎牛血清26140-079
细胞培养用血清保存方法与解冻常见问题:
一、保存血清Z好的方法?
我们建议血清应保存在-5 ℃至-20 ℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。
二、如何解冻血清才不会使产品质量受损?
我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8 ℃冰箱使之融解,然后在室温下使之全融。但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。
三、血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理? GBICO美国胎牛血清26140-079
血清中沉淀物的出现有许多种原因,但Z普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400 g 稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。我们不建议您以过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能会阻塞您的过滤膜。
四、为什么要热灭HX清?
加热可以灭活补体系统。激活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,激活淋巴细胞和巨噬细胞。在免疫学 研究,培养ES 细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭HX清。
五、有必要做热灭活吗?
实验显示,经过正确处理的热灭HX清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会显著的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保血清的质量!
六、为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?
赛乐的胎牛血清没有预老化,储存在2-8 ℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。这应该不会影响血清的质量。推荐在-20 ℃储存胎牛血清,避免反复冻融。
七、如何避免沉淀物的产生?
我们建议您在使用血清的时候,注意下列的操作:
解冻血清时请按照所建议的逐步解冻法(-20 ℃至4 ℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20 ℃至37 ℃),
实验显示非常容易产生沉淀物。解冻血清时请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
•血清解冻Z好采用逐步解冻法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解冻过程中必须随时轻摇,使血清受热温度均匀。
•血清凝絮物,血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出,这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物,实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。
•热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活,请严格按照56℃30分钟(水浴)处理已解冻血清。
•常温状态下短期融化并不会影响血清质量。
•产品有效期,检定合格之日起有效期5年。