基因组提取试剂盒 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒
货号:D1250
规格:5T、20T、50T
保存:室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期 12 个月,2℃-8℃保存时间更长。
产品说明:
本试剂盒采用可以GX、专一结合 DNA 的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从聚丙烯酰胺凝胶上回收DNA 片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。使用本试剂盒回收的DNA 可适用于后续各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。
产品包装:
操作步骤:
*次使用前请先在15ml漂洗液中加入60ml无水乙醇, 所有离心步骤均可使用台式离心机在室温下离心。
1.将单一的目的 DNA 条带从聚丙烯酰胺凝胶中切下 (尽量切除多余部分) , 放入 1.5ml 离心管中, 称取重量,用研磨杵将胶尽量挤压碎。加入 2 倍体积的溶液 A 吹打混匀(每 100mg 胶加入 200ul 溶液 A) ,75℃水浴30 分钟。
2.用 1ml 的去尖吸头吸取混合物至过滤柱中(将胶一起吸入,溶液过多时可分次加入) 。13,000rpm 离心1分钟。将收集管中的滤出液转入新离心管中。
3. 取六倍体积溶液 B 加入原离心管中(每 100mg 胶加入 600ul) ,清洗管壁后加入过滤柱中(溶液过多时可分次加入),颠倒过滤柱或轻轻吹打几次混匀,13,000rpm 离心 1 分钟。将所有收集的滤出液混合。
4.将总滤出液混匀后加入吸附柱中(溶液过多时可分次加入) ,13,000rpm 离心 30-60 秒,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放入收集管中。
5.向吸附柱中加入 600μl 漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇) ,13,000rpm 离心 30-60 秒,倒掉废液,将吸附柱重新放入收集管中。
6.向吸附柱中加入 600μl 漂洗液,13,000rpm 离心 30-60 秒,倒掉废液。
7.将离心吸附柱放回收集管中,13,000rpm 离心 2 分钟,尽量除去漂洗液。将吸附柱开盖置于室温 1-2 分钟,彻底晾干,以防止残留的漂洗液影响下一步的实验。
8.将吸附柱放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量 65–70℃预热的洗脱缓冲液 20-30μl,室温放置 2 分钟。13,000rpm 离心 2 分钟收集 DNA 溶液。注意:①为了增加回收效率,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中13,000rpm 再次离心 1 分钟。②洗脱缓冲液体积不应少于 20μl,体积过小影响回收效率。③洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有很影响。若用水做洗脱液应保证其 pH 值在 7.0-8.5 之间。
9.DNA 回收产物直接后续实验或者-20℃保存。
注意事项:
1、电泳时好使用新的电泳缓冲液, 以免影响电泳和回收效果,如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
2、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
3、回收<100bp及>10kb的DNA片段时, 应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。
4、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗 脱体积越小,回收率越低。
5 、如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
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基因组提取试剂盒 聚丙烯酰胺凝胶DNA回收试剂盒订购说明:
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运输说明:
1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝专用的箱子,然后交付给合作快递,安全快速GX放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
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