超低分子量蛋白maker分子量是多少
货号 : PR1300
规格 : 15T (150 µ1)
保存 : -20℃保存,有效期为一年。
产品简介:
本产品包含3种多肽和2种低分子量蛋白质组成, 分子量范围为3. 3kD-20. 1kD。 可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品为蛋白质和多肽混合物的冻干粉,每种蛋白含量约为15-22.5ug,配有一支1×上样缓冲液。
使用说明:
1. 开封后,溶于150 µ1 1×上样缓冲液,于95℃水浴5分钟,可根据需要进行小量分装,每管10 µl,-20℃贮存,每次取一管使用,避免反复冻融。
2. 使用前取分装后的小管室温融化后,95℃预热5分钟即可上样电泳, 用考马斯亮蓝G-250染色后可见5条蛋白带(见下示意图) 。
凝胶的配置方法:
分离胶 | 分离胶 | 分离胶 | 分离胶 | 夹层胶 | 浓缩胶 |
| 20%/4.5ml | 16.5%/4.5ml | 15.5%/4.5ml | 10%/2ml | 4%/2ml |
49.5%T 3%C | / | / | / | 0.407ml | 0.160ml |
49.5%T 6%C | 1.82ml | 1.50ml | 1.395ml | / | / |
凝胶缓冲液 | 1.50ml | 1.50ml | 1.50ml | 0.667ml | 0.496ml |
甘油 | 0.48ml | 0.48ml | 0.48ml | / | / |
ddH 2 O | 0.70ml | 1.02ml | 1.125ml | 0.926ml | 1.344ml |
10%APS | 40µl | 40µl | 40µl | 20µ| | 20µ| |
TEMED | 5µl | 5µl | 5µl | 3µl | 3µl |
凝胶制备及染色注意事项:
1. 先配制分离胶,聚合后再配制夹层胶,后配制浓缩胶,3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时,30v跑1-2小时后,待指示前沿到达分离胶上沿时,把电压调至100v,至电泳结束,整个电泳过程大约需要6-8小时。
2. 由于多肽所含的氨基酸数目较少,因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性),则会影响其在SDS-PAGE 图上的条带迁移率,即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。
3. 由于 SDS-PAGE 的图谱上,蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为 15,000-200,000因此对于分子量小于 10000 的蛋白质或多肽的分子量,只能根据标准分子量进行估计,推断其是否落入预测的分子量范围。
4. 由于超低分子量多肽(3000 及 3000 以下) ,极易从凝胶上浸出,因此染色及脱色时间不宜太长,脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久,否则条带会消失。
5. 电泳之后可将胶置于固定液中固定20分钟,再进行染色,能得到较好的蛋白条带;如时间不允许,也可不进行固定直接染色。 如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性, 请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液(货号:P1300),该产品具有染色快,无毒,灵敏性高等特点,是常规染色液的替代品。
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P1300-500 考马斯亮蓝快速染色
附: 小分子蛋白质SDS-PAGE 电泳试剂配制
1. 49.5% T 3 % C (配制夹层胶和浓缩胶)
丙烯酰胺 48g
甲叉双丙烯酰胺 1.5g
用ddH 2 0溶解后定容至100ml
2. 49. 5 % T 6 % C (配制分离胶)
丙烯酰胺 46. 5g
甲叉双丙烯酰胺 3. 0g
用ddH 2 0溶解后定容至100ml
3. 凝胶缓冲液
Tris碱 182g
ddH 2 0 300ml
用HCl调节pH值至8.45
用ddH 2 0定容至 500ml
再加入SDS 1.5g
4 . 10×阳极缓冲液(下槽缓冲液〕
Tris碱 121. 1 g
ddH 2 0 400ml
用HCl调pH值至8.9
用ddH 2 0定容至 500ml
5. 阴极缓冲液(上槽缓冲液)
Tris碱 12 .11g
Tricine 17.92g
SDS 1g
用ddH 2 0定容至1000ml
此溶液不用调节pH值
6. 固定液
0.5% 戊二醛
30% 乙醇
用ddH 2 0定容至100ml
7. 染色液
50% 甲醇
10% 乙酸
0.2% 考马斯亮蓝G-250
用ddH 2 0定容至500ml
超低分子量蛋白maker分子量是多少订购说明:
1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
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5、请办理完货款后,将收据、底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。
运输说明:
1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝专用的箱子,然后交付给合作快递,安全快速GX放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝专用的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速GX放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速GX的快递保证产品快速送达您的手中。