如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残

如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残

    液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物，其具有GX、快速、灵敏的特点，在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而，在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时，由于行业特性，样品中的蛋白质残留，时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。

如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残
    在检测生物物质如血浆或血清等积累在反相色谱柱上，必须采用不同与其他物质的清洗方法。大部分情况下，纯有机溶剂如乙晴或甲醇不溶解多肽和蛋白质，因此不能有效地清洗柱子。反而，有机溶剂和缓冲液、酸、离子对试剂等的混合物则能有效地溶解。为确保液相色谱柱再生的效果，建议在使用溶剂冲洗色谱柱之前，了解色谱柱的填料类型以及确保使用的溶剂能与柱子的填料相容。硅胶基质的柱子通常来说都是相容的，但有机聚合物基质的柱子可能会在某些溶剂组合中膨胀或收缩，这样会影响色谱柱的柱效。
    在使用指定溶剂清洗反相色谱柱时，须对每个溶剂系统至少要冲洗20体积。由于有些溶剂系统黏性很大，冲洗的流速应该相应调整以确保不会超过泵压。当检测的是尿液等样品溶液时，至少应该用40～50体积的HPLC级水来冲洗柱子。