Lumitein™ 蛋白质凝胶染色试剂
极其灵敏、快速且操作简单的聚丙烯酰胺电泳蛋白质染色试剂
技术亮点
高灵敏度
可检测低至 1ng 或更少的蛋白,灵敏度至少和银染相当
简单且快速染色
30 分钟的快速染色即可获得良好的结果, 90 分钟的基本染色步骤可以获得超高的灵敏度。长时间染色不会造成过染
优越的光谱特性适合各种仪器
可以用 300nm 紫外光,蓝光 LED 或 450nm , 473nm , 488nm , 532nm 激光器激发;发射光波长为 610nm (见图 1 )
宽检测线性范围
至少三个数量级的线性范围
与下游分析完全兼容
可以配合各种 SDS- 聚丙烯酰胺凝胶和 2-D 凝胶使用;兼容各种 下游分析,包括质谱分析和序列分析等
稳定
100浓缩液和1X工作染色液在室温下至少可保存 1 年lumitein 蛋白质凝胶染料是美国Biotium公司专家专为 SDS-PAGE (聚丙烯酰胺凝胶电泳)实验蛋白质检测而设计的一种荧光染料。与 SYPRO Ruby 、考马斯亮蓝之类常用蛋白质凝胶染料相比,Lumitein 的染色过程极其简单,是集高灵敏度、快速染色、简单易用和兼容性好于一体的蛋白质凝胶染色剂。
和银染一样,Lumitein ™ 的超高灵敏度使其可以检测到低至1ng或更少的蛋白质(图1),但与一般银染不同的是Lumitein ™至少可以检测三个数量级的线性检测范围(图3)。
Coomassie(考马斯亮蓝)染色是蛋白质凝胶电泳中常用的一种染色方法,但一般情况下染色、脱色时间较长( 2 4 ~ 48h),而且凝胶在经多次漂洗换液的过程中,表面容易遭受污染。不同于考马斯亮蓝染料,Lumitein ™ 的染色过程非常简单而且快速,凝胶蛋白质染色和固定被整合在90分钟内完成,为使用者免去额外的为防止蛋白质扩散的固定步骤(表一)。事实上30分钟的快速染色即可获得良好效果。与考马斯亮蓝相比,Lumitein ™ 本底色极低(图4)。
此外,Lumitein ™ 蛋白凝胶染料兼容各种下游分析,包括质谱分析和基于 Edman 降解的序列分析。
Biotium 公司目前提供100高浓缩水溶液,可以使用常见的蛋白质凝胶固定溶液( methanol / acetic acid/water) 稀释至1X的工作溶液。
* Lumitein and its related technologies are covered by pending US and international patents.
** SYPRO is a registered trademark of Molecular Probes, Inc.
表 1. 染色操作步骤比较
试验步骤
SYPRO Ruby
Lumitein™固定步骤一
50 %甲醇 /7.5% 乙酸, 15 分钟
不需要固定步骤二
50 %甲醇 /7.5% 乙酸, 15 分钟
不需要染色
过夜
90 分钟(基本步骤)或 30 分钟(快速步骤)脱色
10 %甲醇 /7% 乙酸, 30 分钟
30 %甲醇 /15% 乙酸, 5 分钟(或无需脱色)漂洗步骤一
水, 5 分钟
单次水洗 5 分钟(无脱色步骤时水洗 20 分钟)漂洗步骤二
水, 5 分钟