XTY5113436 硝基呋喃类代谢物快速检测试剂盒

硝基呋喃类代谢物快速检测试剂盒

检测范围】 新鲜鱼、虾等水产品的肌肉组织。

【技术指标】 检测下限：1.0μg/kg。

【操作步骤】

1）提取：准确称取已搅碎的样品10.0g于50mL离心管中，依次加入提取剂1及提取剂2(液体20.0mL) ，振摇或旋涡混合1min后于35~40℃条件下超声15min取出；过滤或离心，取上清液10mL于50mL离心管；

﹡过滤：取一块脱脂棉，塞住漏斗上颈口，加入3mL净化剂润洗脱脂棉，用一次性吸管吸取上清液10mL过滤;

﹡离心：4000r/min离心5分钟后取上清液10mL；

2）衍生化：取2ml激活剂完全溶解衍生化试剂3备用；向“1”中收集的滤液中依次加入0.5mL衍生化试剂1(移液枪取)、0.85mL衍生化试剂2(移液枪取)，摇匀后再加入0.1mL衍生化试剂3(移液枪取)、0.5mL衍生化试剂4 (移液枪取)，摇匀后于35~40℃条件下超声衍生化30min；冷却至室温待过柱；

3）过柱：取固相萃取柱一支，依次加入3mL激活剂、2mL蒸馏水激活柱子后，加入全部衍生化样液【如果衍生化样液有浑浊或白色沉淀物时可加1mL净化剂，摇匀待样液清亮后再过柱】，以2～3mL/min速度过柱，弃去流出液并挤干；加入2mL洗涤剂弃去流出液并挤干；再加入0.6mL洗脱剂（移液枪取）洗脱，5mL离心管收集洗脱液；

4）萃取：

Ø向收集的洗脱液中加入1mL萃取剂1和1mL萃取剂3，剧烈振摇约1分钟，静置4min分层，弃去下层液体；

Ø再加入1mL萃取剂2和1mL萃取剂3，剧烈振摇约1分钟，静置4min分层，弃去上层液体；

Ø再加入2mL萃取剂3，剧烈振摇约1分钟，静置4min分层，弃去上层液体；

Ø再加入2mL萃取剂3，剧烈振摇约1分钟，静置4min分层，弃去上层液体；

Ø再加入2mL萃取剂3，剧烈振摇约1分钟，静置5min分层，待观察。

5）观察判断：用一次性吸管或移液枪吸取0.75mL下层（切忌取到上层）液体到点滴板的一个孔上, 加入120uL(移液枪)定性试剂混匀，同时用另一支吸管吸取0.75mL对照液到点滴板的另一个孔上；将点滴板放入硝代速测检测仪中对照观察，荧光强度强于或相同于对照液的荧光强度则样品中含有硝基呋喃代谢物大于或等于1.0μg/kg；荧光强度浅于对照液的荧光强度则样品中硝基呋喃代谢物的含量小于1.0μg/kg。

【注意事项】 过柱速度不能太快，萃取时振摇剧烈，静置时间一定要够长

1.衍生化试剂、洗涤和萃取剂在用前要先摇匀；

2.点滴板在使用前，先检查有无荧光干扰；

3.检测的样品必须是新鲜或冷冻无变质的；

4.搅碎后的样品及提取出来的样液必须当天检测不能隔夜放置；

5.萃取剂3是正己烷（色谱纯）易挥发用完立即塞紧瓶塞，有条件的话可自行准备。