硝酸还原酶(NR)检测测试盒 分光光度法
产品简介 :
NR( EC 1.7.1.3)广泛存在于植物中,是植物硝态氮转化为氨态氮的关键酶,也是诱导酶,对作物的产量和品质有影响。
NR 催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ+NADH+H+ →NO2ˉ+NAD + +H2O ;产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下, 与对氨基苯磺酸及α-萘胺定量生成红色偶氮化合物; 生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有大吸收峰,可用分光光度法测定。
试验中所需的仪器和试剂:
可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
产品内容 :
诱导剂储备液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
提取液:液体 50mL×1 瓶,4℃保存。
试剂一:液体 20mL×1 瓶,-20℃保存。
试剂二:液体 10mL×1 瓶,-20℃保存。
试剂三:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
试剂四:液体 25mL×1 瓶,4℃保存。
试剂五:标准储备液 1mL,-20℃保存。
诱导剂应用液的配制 :用时将诱导剂储备液稀释 10 倍,即取 10mL 诱导剂储备液加 90mL 蒸馏水,充分混匀。
0.1umol/mL 的标准液的配制:用时将试剂五稀释 100 倍,即取 0.1ml 试剂五加 9.9mL 蒸馏水,充分混匀。
操洽步骤 :
一 、 样品测定的前处理 :
1、取适量诱导剂于烧杯中,将新鲜标本洗净,滤纸吸干,放入诱导剂应用液中(淹没即可),浸泡 2h,取出样本,滤纸吸干后,-20℃冷冻 30min,取出样本,滤纸吸干。(根据需要进行诱导处理)
2、称取约 0.1g 样本,加入 1mL 提取液,冰浴研磨,4000g,4℃离心 10min,取上清冰上放置待测。
二 、NR 测定操作 :
按下表操作:
试剂名称(µL) 测定管 对照管 标准管 空白管
样本 100 100
0. 1µmol/mL NaNO2 100
双蒸水 500 100
试剂一 375 375 375
试剂二 125 125 125
混匀后, 37℃(哺乳动物)或 25℃(其他物种)水浴 30min
试剂三
250 250 250 250
试剂四
250 250 250 250
混匀,显色 20min,4000g 离心 10 min,取上清,用蒸馏水调零,540nm 下比色。
注意事项 :
样本、试剂一、试剂二和试剂五在冰上放置,用完立即放回- 20℃。
标准管和空白管只需测一次。
NR活性计算 :
(1)按样本鲜重计算:
单位定义:每小时每 g 鲜重样品中催化产生 1µ mol NO 2 ¯ 的量为一个 N R 活力单位。
NR(U/g 鲜重)= 0.1µmol/mL×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷反应时间(0.5h)÷样本鲜重(g/mL)=0.2×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷样本鲜重(g/mL)
(2)按样本蛋白浓度计算:
单位定义:每小时每 mg 组织蛋白催化产生 1µ mol NO 2 ¯ 的量为一个 NR 活力单位。
NR(U/g prot)= 0.1µmol/mL×(A 测定管-A 对照管)÷(A 标准管-A 空白管)÷反应时间(0.5h)÷样本蛋白浓度 (mg/mL) =0.2× (A 测定管-A 对照管) ÷ (A 标准管-A 空白管) ÷样本蛋白浓度 (mg/mL)
硝酸还原酶(NR)检测测试盒 分光光度法订购说明:
1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
2、部分非常用产品,需提前1-2日预订,海外期货则需要提前3-6周预订。
3、部分产品价格会因货期、批次等因素发生变化,若有变动以订货当日新价格为准。
4、每日订单截止时间为16点整,部分城市可到17点整,因超过截止时间造成当日不能发货的将于次日安排发货。
5、请办理完货款后,将底单等连同收货人的地址、姓名、等以传真、、短信、等形式通知我们。
硝酸还原酶(NR)检测测试盒 分光光度法运输说明:
极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝专用的箱子,然后交付给合作快递,安全快速GX放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝专用的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速GX放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速GX的快递保证产品快速送达您的手中。