普鲁士蓝染色试剂盒(Perls stain,伊红法)
产品简介 :
含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素,为金黄色或棕黄色颗粒,因其含铁、
金黄色,故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后,在溶酶体酶的作用下,血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。
Perls 普鲁士蓝反应(Prussian blue reaction)又称为含铁血黄素染色,即经过和稀酸处理后可以产生蓝色,常见于吞噬细胞内会间质内,主要显示三价铁盐。Perls 普鲁士蓝是非常
经典的组织化学反应,是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法,其染色原理为:亚铁溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来,三价铁与亚铁反应,生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁普鲁士蓝,所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁是一种很稳定的化合物,在反应后可用红色染色剂进行复染,如核固红、伊红、中性红等。
Perls stain 常用于显示局部组织内各种出血性病变, 常见于吞噬细胞内。 在判断含铁血黄素沉积时,用 Perls 反应可以得到证实,该染色方法可以很好的区分含铁血黄素和其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广、可以进行复染。普鲁士蓝染色试剂盒(Perls stain,伊红法) ,其复染液采用伊红染色液,也是常用的复染液,
该复染液染色时间较核固红染色液要短。
产品组成 :
规格 | 2×50ml | 2×100ml | Storage |
Perls stain A | 25ml | 50ml | RT 避光 |
Perls stain B | 25ml | 50ml | RT |
临用前,取 A1、A2 等量混合,即为试剂(A)Perls stain,不宜提前配制。 |
试 剂 (B): 伊 红 染 色液 | 50ml | 50ml | 100ml |
使用说明书 | 1 份 |
主要成分 :
试剂(A): 主要由亚铁、稀酸等组成。
试剂(B): 主要由伊红、防腐剂等组成。
自备材料:
1、10%的中性
2、系列乙醇
3、蒸馏水
4、4%的多聚甲醛
操洽步骤 ( 仅供参考 ) :
( 一 ) 石蜡切片染色
1、 切片脱蜡至水
① 二甲苯(Ⅰ) 5~10min
② 二甲苯(Ⅱ) 5~10min
③无水乙醇(Ⅰ)(可选) 3~5min
④无水乙醇(Ⅱ)(可选) 3~5min
⑤95%的乙醇 3~5min
⑥90%的乙醇 3~5min
⑦80%的乙醇 3~5min
⑧自来水或蒸馏水冲洗(Ⅰ) 1~3min
⑨自来水或蒸馏水冲洗(Ⅱ) 1~3min
2、染色
①切片入 Perls stain(见注意事项 6) 15~30min
②蒸馏水充分冲洗 5~10min
③伊红染色液淡染细胞核 15~30s
④自来水冲洗 1~5s
3、脱水、透明、封固
①90%乙醇 10~20s
②95%乙醇(Ⅰ) 1~2min
③95%乙醇(Ⅱ) 1~2min
④ 无水乙醇(Ⅰ) 2~3min
⑤无水乙醇(Ⅱ) 2~3min
⑥ 二甲苯(Ⅰ) 2~3min
⑦二甲苯(Ⅱ) 2~3min
⑧ 二甲苯(Ⅲ) 2~3min
⑨中性树脂封片。
( 二 ) 冰冻切片染色
1、 无需脱蜡,直接迅速用蒸馏水冲洗 2~3min。
2、 染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。
( 三 ) 细胞染色
1、4%多聚甲醛固定 10~20min。
2、自来水冲洗 2 次,每次 2min。
3、蒸馏水冲洗 2 次,每次 2min。
4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。
染?结果 :
含铁血黄素或三价铁 蓝色
细胞核、其他组织 红色
阴性对照 ( 可选 )
取相同连续切片脱蜡至水。置于 5%的草酸中,孵育 2-6h 后,经 Perla stain,需要步骤同上。
结果为阴性。
注意事项 :
1、 切片脱蜡应尽量干净。
2、 组织固定常采用 10%的中性,经普通长期固定后,组织会有损伤。
3、 临用前取 A1、A2 液等量混合,即为试剂(A) ,现配现用,不可提前配制。
4、整个操作过程中容器要干净,避免使用金属铁制品,洗切片和容器时以蒸馏水为宜,因普通水内含铁质。
5、避免使用酸性固定剂,铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。
6、Perls stain 染色时,应根据样品情况调整着色时间。
7、 所有检查切片都应使用同一个阳性对照切片,选择适合的对照非常重要.尸检肺组织是一个很好的对照,包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞).
8、95%乙醇、90%乙醇应经常更换新液.
9、 冰冻切片和细胞的染色,应根据具体情况摸索实验条件.
10、为了您的健康和安全,请穿实验服并戴一次性手套操作.
有效期 :12 个月
产品订购说明:
1、绝大部分产品备有现货,一般情况下都能订货当日发货。
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产品运输说明:
1、极低温产品:极低温产品运输过程中加装干冰运输。用干冰把产品包裹起来,再用泡沫盒密封,胶带层层粘住泡沫盒,放入索莱宝专用的箱子,然后交付给合作快递,安全快速GX放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
2、低温产品:低温产品运输过程中加装索莱宝专用冰袋运输。事先用冰袋把产品包裹起来,再使用泡沫盒密封,用胶带严实密封泡沫盒,再放入索莱宝专用的箱子(保温效果少可以持续一周),然后交付给合作快递,安全快速GX放心的送至客户的手中,保证产品的性质稳定如一,为您的实验保驾护航。
3、常温产品:常温产品运输过程中无需加冰或者特殊包装。产品由公司库房人员快速配货,准确快速GX的快递保证产品快速送达您的手中。