MitoView ™ 633,Rhodamine 123,DASPEI,DiIC1(5),MCB,JC -1 线粒体膜电位染料

美国biotium线粒体膜电位染料
线粒体膜电位的下降是细胞凋亡早期的一个标志性事件 .  它在凋亡过程中与 caspase 活化同时发生 并先于磷脂酰丝氨酸（PS）的外翻。基于以上研究， Biotium 研 发 了 各 种 的 新 型 的 萤 光 探 针 用 于 测 量 线 粒 体 膜 电 位 。
MitoView ™ 633
MitoView ™ 633  是一种新型的用于测量线粒体膜电位的深红染料  ( 激发光 / 发射光 622/648  nm).  使 用 NucView ™488 和 MitoView ™ 633  凋 亡检 测试 剂 盒 可 以 在 荧 光 显 微 镜  ( 图.1) 或 流 式 细 胞 仪  ( 图.2) 下 同 时 进 行 线粒 体 膜 电 位 和 caspase-3 活性的检测。( 见页 5)JC-线粒体膜电位检测试剂盒。

图 1. 使用 MitoView ™  633 进行活细胞染色 :Hela 细胞

图  2. 流式细胞仪分析：Jurkat 细胞一组用 CCCP 使线粒体去极化，另一组使staurosporine作为凋亡诱导剂。 使用 MitoView ™633 染色
JC -1
通常被用于检测细胞中线粒体膜电位的变 化。在健康细胞中,JC-1, 以聚合体 (J-aggregates)， 的形式存在在线粒体基质中，可以产生红色的荧光 ( 激发光 / 发射光  585/590  nm )。相反，在正在凋亡 或坏死的细胞中，JC -1 不能聚集在基质中，以单体 的形式存在，从而发出绿色的荧光 ( 激发光 / 发射光 510/527 nm)，这样可以使用流式细胞仪和荧光显微镜、 荧光计数仪通过测量荧光颜色的转变来检测线粒体膜 电位的变化。常用红绿荧光的相对比例来衡量线粒体 去极化的比例。通过 JC -1 从红色荧光到绿色荧光的转 变可以很容易地检测到细胞膜电位的下降，从而可以用于早期的细胞凋亡检测。

图 3. 流式细胞仪分析：对照（A）与经 staurosporine 处理 (B) 的 Jurkat 细胞 （JC-1 染色）. FL1  (x- 轴 ) 为绿色荧光 ; FL2  (y-轴 ) 为红色荧光。  (A 图 ) 较高的红绿荧光比例表明线粒体膜电位 未下降 .  （B 图）较低的红绿荧光比例说明： 由于 staurosporine 诱导了凋亡的发生，细胞的线粒体膜电位大幅下降 。
Rhodamine  123 
是一种绿色荧光染料 ( 激发光/ 发射光 505/534)，广泛用作检测线粒体膜电位 （流式细胞仪检测）6-8。TMRE  和 TMRM ：四甲基罗丹明乙脂或是甲基脂 , 是穿膜型的红色荧光探针 ( 激发光 / 发射光 548/573  nm)，它们很容易被线粒体摄取。这些荧 光探针常用于线粒体膜电位检测（流式细胞仪检测）。9, 10
DASPEI 
是一种红色的线粒体膜电位荧光染料 ( 激发光 / 发射光 461/589nm )，被广泛用于高通 量分析检测。11
DiIC1(5)
是一种深红的羟花青染料（激发光 / 发射光  638/658 nm), 常被用于检测凋亡细胞中 的线粒体膜电位。12
MCB 谷光苷肽检测试剂盒
在细胞凋亡事件的早期，细胞质中谷胱甘肽 （GSH）水平开始下降。细胞内 GSH 的排除非常活 跃时，细胞液就由还原环境转为氧化环境，这可能 导致了凋亡早期细胞线粒体膜电位的降低，从而使 细胞色素 C 从线粒体内转移到细胞液中，启动凋亡 效应器 caspase 的级联反应。13, 14
MCB     (Monochlorobimane) ( 激发光 / 发射光380/461  nm)
是一种荧光染料，在 GST 的作用下， 它可以与谷胱甘肽结合并会发出蓝色荧光。可以通 过荧光染料 monochlorobimane(MCB) 体外检测凋亡 细胞细胞质中谷光苷肽的减少来检测凋亡早期细 胞内氧化还原状态的变化。( 图  4).15

编号	产品名称
70055	Mitoview 633
30062	NucView 488 and MitoView 633 Apoptosis Kit
30001	JC-1 Mitochondrial Membrane Detection Kit
70010	Rhodamine 123
70016	Tetramethylrhodamine ethyl ester, perchlorate (TMRE)
70017	Tetramethylrhodamine methyl ester, perchlorate(TMRM)
70018	DASPEI
70015	DiIC1(5)
30019	MCB Glutathione Detection Kit

 

图 4.  Jurkat  细胞分别以 DMSO 处理（作为对照）以及  1  uM staurosporine 处理 ( 凋亡诱导 4 小时 ). 使用 MCB 谷光苷肽检测 试剂盒检测其谷胱甘肽（GSH）水平。
参考文献：
1) Science 281, 1309-12 (1998);
2) Cytometry 29, 97 (1997);
3) FEBS Lett 411, 77 (1997);
4) J Neurochem 70, 66 (1998);
5) Biochemistry 30, 4480 (1991);
6) Cytometry 17, 50 (1994);
7) Science 218, 1117 (1982);
8) J. Cell Biol. 88, 526 (1981);
9) Cytometry 71A, 668 (2007);
10) Cytom-etry 45, 151 (2001);
11) J Biomol Screen.5, 1071 (2010);
12) Cytometry 33, 333 (1998);
13) Faseb J. 12, 479 (1998);
14) Biochem Soc. Trans. 28, 56 (2000);
15)Cancer Res 46, 6105 (1986).