个旧肺鳞癌细胞
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细胞实验中,细胞模型的选择也很关键,因为很多商品化的细胞株可获得性强,研究方便,但Z好还是用原代培养的细胞,一方面说明工作量,另一方面原代细胞反应性比较好。细胞模型剂量的选择依据是:时效关系中出现Z显著差异,在继续增加剂量效用维持在该水平甚至下降。
细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室。
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外源基因进入细胞主要有四种方法:电击法、磷酸钙法和脂质体介导法和病毒介导法。电击法是在细胞上短时间暂时性的穿孔让外源质粒进入;磷酸钙法和脂质体法是利用不同的载体物质携带质粒通过直接穿膜或者膜融合的方法使得外源基因进入细胞;病毒法是利用包装了外源基因的病毒感染细胞的方法使得其进入细胞。但是由于电击法和磷酸钙法的实验条件控制较严、难度较大;病毒法的前期准备较复杂、而且可能对于细胞有较大影响;所以现在对于很多普通细胞系,一般的瞬时转染方法多采用脂质体法。( 白介素-2转染耐VP16http://www.lookbio.com/threestyle/lookbio/product/20037368.html)
ATCC——美国模式培养物集存库(American type culture collection),成立于1925年,是世界上Z大的生物资源ZX,由美国14家生化、医学类行业协会组成的理事会负责管理,是一家性、非盈利生物标准品资源ZX。ATCC向发布其获取、鉴定、保存及开发的生物标准品,推动科学研究的验证,应用及进步。
注意:细胞株的生物等级,由于有些细胞株及菌株属于管制品,所以从国外购货比较麻烦。
时间点的设定。在不同时间点的测定OD值,输入excel表,Z后得到不同时间点的YZ率变化情况,画出变化的曲线,曲线什么时候变得平坦了(到了平台期)那个时间点应该就是Z好的时间点(因为这个时候的细胞增殖YZ表现的Z明显)。
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