Protein A+G Agarose Protein A+G 琼脂糖凝胶
产品货号:R8280
英文名称:Protein A+G Agarose
中文名称:Protein A+G 琼脂糖凝胶
规格:2ml
供应商:北京索莱宝
产品简介
Protein A+G 琼脂糖凝胶为 Protein A 和 Protein G 共价交联到 4% Agarose beads 上的产物,并保存在含有 0.05%叠氮钠的 TBS 缓
冲液中,2 ml Protein A+G Agarose 中共含有 0.5 ml Agarose beads,约 2 mg 重组的 Protein A+G。主要用于免疫沉
(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP),也可以用于抗体的纯化。适用于免疫沉淀所有 Protein A Agarose 和
Protein G Agarose 单独可以免疫沉淀的抗体,包括 Mouse IgG1,IgG2a, IgG2b, IgG3, IgA, Rat IgG1, IgG2a, IgG2b,
IgG2c, Rabbit IgG, Rabbit and Goat polyclonal Abs,以及 Human IgG1, IgG2,IgG3 和 IgG4。本产品如果用于常规的
免疫沉淀,可以免疫沉淀 100 次。
Protein A+G 琼脂糖凝胶操作步骤
1. 免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP):
1.1. 蛋白样品的准备:
1.1.1 对于10 cm细胞培养皿中的贴壁细胞,吸除细胞培养液,PBS洗涤一次,然后加入500 μl至2 ml细胞裂解液裂解细胞。
1.1.2. 对于组织样品参考贴壁细胞使用裂解液的比例进行裂解。
1.1.3. 对于悬浮细胞,离心收集细胞后,PBS洗涤一次,然后参考贴壁细胞的裂解方法进行裂解。
注: 详细的裂解方法参考不同裂解液的详细使用方法。如果裂解获得的蛋白样品浓度过高,可以用裂解液或PBS适当稀释,如果蛋白样品
浓度过低,在以后的裂解过程中宜适当减少裂解液的用量。
1.2. 去除非特异性结合(可选做):
1.2.1. 取200 μl至1 ml蛋白样品,蛋白量约为200 μg至1 mg,加入约1微克和免疫沉淀时使用的IgG种属相同的普通IgG
和20 μl充分重悬的Protein A+G Agarose,4℃缓慢摇动30分钟至2小时。
1.2.2. 2500 rpm(约1000 g)离心5分钟,取上清用于后续的免疫沉淀。
注: 所谓种属相同的IgG是指,例如后续免疫沉淀时用的是小鼠IgG,则在本步骤中可以加入normal mouse IgG,如无normal IgG可以
加入其它不影响后续检测的其它mouse IgG类型的抗体。通过和normal IgG和Protein A+GAgarose的孵育,可以充分降低非特异性
的结合,降低背景。
1.3. 免疫沉淀:
1.3.1. 加入0.2-2 μg用于免疫沉淀的一抗,4℃缓慢摇动隔夜夜。
1.3.2. 再加入20 μl充分重悬的Protein A+G Agarose,4℃缓慢摇动1-3个小时。(为方便后续的洗涤操作可以把加入充
分重悬的Protein A+G Agarose的量调整为40微升。)
1.3.3. 2500 rpm(约1000 g)离心5分钟,或瞬时高速离心,小心吸除上清,注意宁可留下少量上清也不能吸掉Protein A+G
Agarose。
1.3.4. 用准备蛋白样品时的裂解液或PBS洗涤沉淀5次,裂解液或PBS的用量每次为0.5-1 ml。洗涤时离心条件和吸除
上清的要求同上面的步骤C3。
1.3.5. 完成后一次洗涤后,去除上清,加入20-40 μl 1XSDS-PAGE电泳上样缓冲液Vortex重悬沉淀,瞬时高速离心
把样品离心至管底。
1.3.6. 100℃或沸水浴处理3-5分钟,取部分或全部样品用于SDS-PAGE电泳,暂时不用的样品可以-20℃保存。
Protein A+G 琼脂糖凝胶注意事项
1. 请勿冷冻保存本产品。
2. Protein A+G Agarose 使用前一定要充分重悬,即充分颠倒若干次使混合均匀。
3. 从蛋白样品收集开始,所有步骤中蛋白样品都必须在 4℃或冰上操作。
4. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. 免疫共沉淀:
参考免疫沉淀的方法进行,但免疫共沉淀(CO-IP)通常必须使用未经冻存的新鲜蛋白样品。普通的免疫沉淀虽然可以使用
冻存的蛋白样品,但也宜用新鲜的蛋白样品为佳。
科研领域专用Protein A+G Agarose Protein A+G 琼脂糖凝胶北京索莱宝
备注:保证质量 负责售后 提供
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A8040 Albumin Egg 卵清蛋白 100g
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A8060 Abscisic acid (ABA) 脱落酸 25mg
A8060 Abscisic acid (ABA) 脱落酸 100mg
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A8290 ADPNa2 二磷酸腺苷二钠 500mg
A8290 ADPNa2 二磷酸腺苷二钠 1g
A8300 AMPNa2 5-单磷酸腺苷 1g
A8300 AMPNa2 5-单磷酸腺苷 5g
A8180 Ampicillin 氨苄青霉素 1g
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A8080 Acrylamide 丙烯酰胺 500g
A8080 Acrylamide 丙烯酰胺 1KG
A8080 Acrylamide 丙烯酰胺 5KG
A8081 Acrylamide 丙烯酰胺 100g
A8081 Acrylamide 丙烯酰胺 500g
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A8320 Adenine Sulfate 腺嘌呤硫酸盐 10g
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: 工作
目前直接使用单位:
北京大学、北京大学医学部、清华大学、北京林业大学、ZG人民解放军总医院(301医院)、ZG食品药品研究所(中检所)、ZG协和医科大学基础研究所(基础所)、北京协和医院、军科院、复旦大学、广东省农科院果树研究所、杭州师范大学、河南农业大学、黑龙江省农垦科研育种ZX、华东师范大学、华中农业大学、吉林省农科院生物技术ZX、吉林省农业科学院、吉林省农业科学院生物技术研究ZX、江南大学、江苏省农业科学院 、南京大学、南京农业大学、南京农业大学水稻研究所、内蒙古科技大学、山东师范大学、山西省农业科学院棉花研究所、上海辰山植物科学研究ZX、上海辰山植物园、上海大学、上海交通大学、上海隆平农业生物技术有限公司 、上海农科院、 上海应用技术学院、深圳华大基因研究院、沈阳农业大学、四川大学、四川农业大学生理院生化教研室、苏州大学、同济大学、潍坊科技学院、西北农林科技大学、扬州大学、浙江大学、浙江省农业科学院、ZG科学院动物研究所、ZG科学院青岛生物能源与过程研究所、ZG科学院微生物研究所、ZG农业大学、ZG农业科学院、ZG农业科学院生物技术研究所、ZG农业科学院油料作物研究所、ZG农业科学院油料作物研究所、ZG农业科学院植物保护研究所、ZG热带农业科学院生物技术研究所、ZG热带农业科学院橡胶研究所、ZG水稻研究所、中科院成都生物科研所、中科院上海计算生物学研究所和中科院植生所等单位
公司简介:
北京索莱宝科技有限公司始创于2000年,是一家集产品研发、生产、销售、服务
于一体的大型高科技生物企业。
公司总部坐落于北京中关村科技园区,拥有1200平米研发生产ZX,2000平米
仓储基地,并配有先进的物流系统。同时在全国30多个省市设有分公司及直销、分
销机构。服务网络覆盖全国,是国内大的生命科学研发试剂供应商之一。并通过
阿里巴巴国际将产品输入美、日、欧等发达国家,得到了国际市场的高度认可。
目前公司提供的产品近万种,超过5000种常备现货,涵盖分子生物学、细胞生
物学、免疫学、生物医学等相关领域,并不断推陈出新扩充种类,为用户提供优
秀、专业的产品。
公司拥有数十名由博、硕士组建的专业研发技术团队,并聘请了众多国内专
家担任技术顾问。严格按照GMP和ISO9000标准生产和管理,致力于为用户提供
先进的试剂,完善的解决方案,致力于打造国际*的民族品Pai。
“为科研服务,为生命尽责”。是每一个索莱宝人发自内心的服务理念。
同时,我们建立了一套先进的企业-高校合作模式,共同利用彼此平台和优势,
互通有无,并为高校学生提供各项实验技能培训,实现双赢。此时,我们也期待能
与更多科研单位深入合作,共同为ZG生命科学研究的发展而努力,互惠共赢。
Solarbio品Pai的诞生,是ZG民族企业在生命科学领域的一次大胆挑战,面对几
乎被外国企业垄断的市场,面对严酷的竞争环境,索莱宝人依然坚定不移的走自主品
Pai战略,立足国内,放眼,为ZG生命科学产业的发展默默的付出自己的努力。同
时,我们也相信,不久的未来ZG民族生物企业也一定能够屹立于世界高端!