Avidin/FITC荧光素标记亲合素广泛应用于IHC、WB、ELISA实验,质量保证,无效免费Anti退换,另外本公司生产经营各种标记二抗、免疫印迹常用试剂、免疫组化常用试剂,咨询!
名 称:Avidin/FITC荧光素标记亲合素浓 度: 1mg/1ml
抗体来源(宿主):兔源多抗、鼠源
克隆:单克隆抗体、多克隆抗体
适用:Human, Mouse, Rat, Chicken
抗体类型:一抗
研究领域:细胞生物、神经生物学等
性 状:冻干粉或液体
保存:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.相关标记:FITC、Gold 、HRP、PE PE-Cy3、PE-CY5、PE-CY5.5 、PE-CY7 、RBITC 、 Alexa Fluor 350、Alexa Fluor 488 、 Alexa Fluor 555 、Alexa Fluor 647、AP 、APC 、Biotin 、Cy3 、Cy5 、Cy5.5 、Cy7 。
储 存 液: Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4 or PBS with 0.1% sodium azide and 50% glycerol pH 7.3. -20oC, Avoid freeze / thaw cycles.
,相关抗体:
RS-1082R Anti-GRK1抗体,G蛋白偶合受体激酶1抗体
RS-1083R Anti-VEGFR3/FLt-4抗体,血管内皮细胞生长因子受体-3
RS-1084R Anti-PEG10抗体,肝癌高表达基因抗体
RS-1085R Anti-C-erbB-4/HER4/erbB-4 抗体,c-erbB-4癌基因抗体
RS-1086R Anti-Laminin alpha 5抗体,层粘蛋白α5抗体
RS-1087R Anti-ANGPTL4/ANG-4抗体,血管位蛋白样4抗体
RS-1088R Anti-Tβ10抗体,胸腺素β10抗体
RS-1089R Anti-B Raf抗体
RS-1090R Anti-CKⅠα/STK抗体,属丝/苏氨酸蛋白质激酶抗体
RS-1091R Anti-Nox-4/NADH抗体,NADPH氧化酶4抗体
RS-1092R Anti-MRP2抗体,多药耐药相关蛋白2抗体
RS-1093R Anti-CGP-39/YKL-40抗体,软骨糖蛋白39抗体
RS-1094R Anti-κOR 抗体,kappa型受体抗体
RS-1095R Anti-OXR抗体,食欲素受体抗体
RS-1096R Anti-Skp2抗体,细胞S相激酶相关蛋白抗体
RS-1097R Anti-PAX3抗体,配对盒基因3抗体
RS-1098R Anti-PLAU/uPA 抗体,尿激酶型纤溶酶原激活因子抗体
RS-1099R Anti-Calpain 1抗体,钙蛋白酶抗体
RS-1100R Anti-CD36/PAS-4抗体,CD36抗体
RS-1101R Anti-MCP-1/CCL2 抗体,单核细胞趋化蛋白1抗体(大、小鼠)
RS-1102R Anti-PAX9抗体,配对盒基因9抗体
RS-1103R Anti-B7-H1/PDL1/CD274抗体,程序性死亡配体1抗体
RS-1104R Anti-TBX2/T-box2抗体,新型抑癌基因抗体(一种新发现的抑癌基因)
RS-1105R Anti-Caspase-12抗体,半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗体(大、小鼠)
RS10088 胰蛋白胨大豆肉汤 250 85 用于金黄色葡萄球菌的MPN测定,增菌培养,NaCl浓度可根据需要而调整(GB、SN标准)
Trypticase (Tryptic) Soy Broth
RS10089 Baird-Parker琼脂基础 250 225 用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养(GB、SN标准)
Baird-Parker Agar Base
RS10090 亚碲酸盐卵黄增菌液 5ml*10 65 加入Baird-Parker琼脂基础中
Egg-Yolk lurite Emulsion
RS10091 兔血浆 0.5ml*20 130 用于金黄色葡萄球菌凝固酶试验
Rabbit Plasma
RS10092 DNA酶琼脂 100 360 用于核糖核酸酶检测
单克隆抗体制备方法: (一)杂交瘤细胞的大量繁殖
克隆化的细胞可以在体外进行大量培养,收集上清液而获得大量的单一的克隆化抗体。不过体外培养法得到的单克隆抗体有限,其不能超过特定的细胞浓度,且每天要换培养液。而体内杂交瘤细胞繁殖可以克服这些限制。杂交瘤细胞具有从亲代淋巴细胞得来的肿瘤细胞的遗传特性。如接种到组织相容性的同系小鼠或不能排斥杂交瘤的小鼠(无胸腺的裸鼠),杂交瘤细胞就开始无限地繁殖,直至宿主死亡。产生肿瘤细胞的小鼠腹水和血清中含有大量的杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体,这种抗体的效价往往高于培养细胞上清液的100~1 000倍。
利用免疫YZ剂,如降植烷、液体石蜡、抗淋巴细胞血清等,可以加速和促进肿瘤的生长。
1.材料
(1)经高压灭菌的降植烷。
(2)Balb/c鼠:5~8周龄。
(3)杂交瘤细胞:取对数生长期的细胞。
(4)RPMI—1640培养液
(5)新生牛血清
2.操作方法
(1) 于小鼠腹腔注射0.5ml降植烷,注射后1~9周内种植细胞。
(2) 收取对数生长期的杂交瘤细胞,用5%FCS—1640液洗涤一次,1 000r/min离心10min。
(3) 取样,用台盼兰染色,计活细胞数,重新用5%FCS—1640液配成1.0×107细胞/ml的悬液。
(4) 给注射了降植烷的小白鼠接种杂交瘤细胞,每只腹腔注射1ml(含1.0×107个细胞/ml)。
(5) 接种后10天左右时间肿瘤体积Z大,此时可由腹腔抽取腹水,每隔1~3天取1次,可取10次。血清可由腋下动脉或心脏采血后分离。
(二)单克隆抗体的提纯
1.材料
(1) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
20 mMol/L NaCl
(2) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
40mMol/L NaCl
(3) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
80 mMol/L NaCl
(4) 20mMol/L pH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液
(5) 饱和硫酸铵液
(6) DEAE—纤维素柱
2.操作方法
(1)小鼠腹水用冷PBS液稀释4倍后,于1.00×105转离心30min,去沉淀。
(2)在4℃于上清中缓缓滴加饱和硫酸铵液,边加边搅拌,使溶液Z终为50%硫酸铵浓度。
(3)此溶液置冰中30min~60min,然后5 000r/min离心10min,去上清。
(4)将沉淀溶于Tris-HCl缓冲液(40mMol/L NaCl)中(溶液可能混浊)。
(5)装入透析袋于Tris-HCl缓冲液(20 mMol/L NaCl)中透析除盐。
(6)离心去沉淀。
(7)溶液稀释(1:100或更高倍稀释)后,于280nm测蛋白含量,估计蛋白质含量
1A 280unit=0.8mg蛋白质
一般每ml腹水中,含有总蛋白约25mg~36mg。
(8)过DEAE—纤维素柱:纤维素柱高40cm,以20mMol/L NaCl Tris缓冲液平衡。透析样品以Tris缓冲液等量稀释。
样品进入柱床速度为1ml~2ml/min,以NaCl线形梯度洗脱。大部分单克隆IgG于40 mMol/L和80mMol/L NaCl洗脱,也有极少例外的单克隆抗体于120 mMol/L ~150 mMol/L NaCl洗脱。
测OD280nm收集蛋白峰,单克隆IgG保存备用。
杂交瘤产生各种免疫球蛋白,但主要是IgG和IgM,究竟是哪种为主,则决定于抗原的免疫程序。免疫一次,且3天后就取脾,多为产生IgM的B淋巴细胞。免疫多次的多为IgG。
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