大鼠17-羟皮质类固醇,17-OHCS,ELISA检测
在ELISA Kit 实验中可能会出现吸光度值偏低的情况 ,造成检测大鼠17-羟皮质类固醇,17-OHCS,ELISA 时吸光度值偏低可能的原因之一:靶蛋白在所用样品中未表达/靶蛋白在所用样品中低水平表达。
处理方法:检测靶蛋白的表达谱,确保它将会在样本中表达。如果存在低水平的靶蛋白表达,则要增加样品用量,或者可能需要更换为更为灵敏的测定方法。确定使用在测定方法的检测范围内的阳性对照。
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双抗体夹心法测抗原:双抗体夹心法是检测抗原常用的方法,操作步骤如下:
1.将特异性抗体与固相载体联结,形成固相抗体。洗涤除去未结合的抗体及杂质。
2.加受检标本,保温反应。标本中的抗原与固相抗体结合,形成固相抗原抗体复合物。洗涤除去其他未结合物质。
3.加酶标抗体,保温反应。固相免疫复合物上的抗原与酶标抗体结合。彻底洗涤未结合的酶标抗体。此时固相载体上带有的酶量与标本中受检抗原的量相关。
4. 加底物显色。固相上的酶催化底物成为有色产物。通过比色,测知标本中抗原的量。
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