DYRK2抗原,双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶DYRK2抗原
【规 格】:100ug,0.5mg,1mg,5mg,10mg
【浓 度】:1mg/ml
【纯 度】:98%
【纯化方法】:HPLC
【亚 型】:IgG
【性 状】:Lyophilized or Liquid
【产品应用】:SDS-PAGE
【研究领域】:肿瘤,细胞生物,免疫学,染色质和核信号,微生物学,细胞分化,表观遗传学
【保 存】:-20℃
【保 质 期】:2年
【相关标记抗原】:
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DYRK2抗原,双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶DYRK2抗原
抗原(antigen,缩写Ag)为任何可诱发免疫反应的物质。外来分子可经过B细胞上免疫球蛋白的辨识或经抗原呈现细胞的处理并与主要组织相容性复合体结合成复合物再活化T细胞,引发连续的免疫反应。
分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说,一个抗原决定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10 kD才有一个表位,因此分子太小的多肽或蛋白是很难有一个表位的。
外源性强。在个体形成的早期就对自身物质形成了免疫耐受,因此如果和机体内的物质完全一样或者是相似就很难引起机体的免疫应答。如果是利用免疫赦免区的成份(如大脑、眼球、睾万内部成份)则不必考虑外源性。
结构尽量复杂。简单重复的物质是不具有免疫原性的,拿明胶来说,它的分子量非常大,而且外源性也很强,但是组成明胶的氨基酸多为直链氨基酸,在体内容易被降解,因此它的免疫原性很弱。类似地,淀粉、核酸、多聚Lys的免疫原性也很弱。
可降解性好。作为抗原,必须是可以降解的,塑料、不锈钢等难降解的物质免疫原也很弱。由D-型氨基酸组成的物质免疫原性也很弱,同样是因为机体不能降解D-氨基酸组成的蛋白或多肽。纯化的天然蛋白质。 由于天然的蛋白存在修饰,而且结构比较复杂(除了线性表位还有结构表位),因此天然的蛋白质是很好的抗原。但是天然的蛋白很难达到较高的纯度,这给免疫和后面的纯化带来了不少麻烦,而且只适合在机体细胞内表达量比较高的蛋白。有一个很典型的例子就是大家使用的二抗,就是从一种动物血清中分离出抗体,然后用它作抗原(有的需要酶解分离出重链和轻链)免疫另一种动物。纯化的重组蛋白。相对于天然蛋白来说,重组蛋白比较容易获得得较高的纯度,而且鉴定也比较方便,整个生产过程更容易掌握。相信大家都做过重组蛋白,所以关于纯化我就不多说了,值得注意的是重组蛋白为了纯化的方便,通常需要带一段标签(如GST、6*His、Myc、MBP、Flag、Fc等),在免疫中动物体通常会产生这些标签的抗体,在后面的纯化过程中需要去掉这些标签的抗体,比如说可以使用对应的另一种标签的重组蛋白纯化抗体,或者先用纯标签蛋白吸附掉血清中的标签抗体,然后再用重组蛋白纯化目的抗体。6*His这个标签比较小,而且免疫原性弱,因此由它产生的抗体几乎可以忽略,如果用它作为重组蛋白标签就不需要考虑去掉由标签产生的抗体。另外,重组蛋白因为不存在修饰,也不存在高级结构,因此Z终生产出来的抗体可能无法识别天然蛋白,难以用于某些实验。
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人工合成多肽。很多蛋白属于家族蛋白,而这些家族内的蛋白相似度都很高,以Actin(肌动蛋白)家族来说,alpha-actin、beta-actin、gamma-actin之间的相似度都很高,相互之间只相差几个氨基酸,另外,不行物种之间的Actin同源性也极高,此时如果用对应的天然蛋白或者重组蛋白免疫动物往往不能产生出抗体,或者生产的抗体可以同时识别这三种肌动蛋白,此时Z好的解决办法就是人工合成它们之间不相同的区域作为抗原进行免疫。值得注意的是,根据前面说的,如果分子太小是很难引起机体发生免疫反应的,所以合成好多肽后还需要将多肽连在一个大的载体上以增加其免疫原性,常用的载体有:BSA(牛血清白蛋白),RSA(兔血清白蛋白),HSA(人血清白蛋白),OVA(卵清蛋白),GST(谷胱甘肽S转移酶),KLH(Knoweyhole Limpet Hemocyanin,钥孔戚血蓝蛋白),MAP(多价抗原肽,主要指多聚Lys)。
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