解脂复膜孢酵母（亚罗解脂酵母）培养

资源名称:  解脂复膜孢酵母（亚罗解脂酵母）培养

种属:Saccharomycopsislipolytica（YarrowYarrowialipolytica）
安全等级   1
模式菌株   yes
应用领域   模式菌株。由ATCC18942获得
培养方法   
培养基   144
生长条件   24℃

解脂复膜孢酵母（亚罗解脂酵母）培养注意事项：
1.  取细胞的过程中注意带好防冻手套，护目镜。此项尤为重要，细胞冻存管可能漏入液氮，解冻时冻存管中的气温急剧上升，可导致爆炸。
2.  冻存液的问题：冻存液的配置已是常识，在这里不作详述，但二甲基亚砜（DMSO）对细胞不是完全，在常温下，二甲基亚砜对细胞的毒副作 较大，因此，必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢，会造成细胞的损伤，二甲基亚砜（DMSO）Z好选择进口产品。
3.  离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高，注意加入少量培养液可稀释其浓度，以减少对细胞的损伤。
4.  离心问题：目前主要有两种见解。一种是解冻后的细胞悬液直接吹打均匀后分装到培养瓶中进行培养，第二天换液。因为离心的目的是两个，去除 DMSO，去除死细胞，这个是标准流程，但对一般人来说，把握不好离心转速和时间，转的不够活细胞沉底的少，细胞就全被扔掉了，转过了活细胞会受压过大， 死亡。此外在操作过程中容易污染，所以不推荐。另一种说法为细胞悬液中含有二甲基亚砜（DMSO），DMSO对细胞有一定的毒副作用，所以须将离心后的液 体前倒净，且一定倒干净。我在试验中按照常规的离心分装的方法进行复苏，结果无有异常。
5.  细胞贴壁少的问题：教科书中说明冻存细胞解冻时1ml细胞液要加10ml－15m培养液，而在我的试验中的经验总结为培养基越少细胞越容易贴附。
6.  复苏细胞分装的问题：试验中我的经验总结为复苏1管细胞一般可分装到1-2只培养瓶中，分装过多，细胞浓度过低，不利于细胞的贴壁。
7.  加培养基的量放入问题：这个量的多少的把握主要涉及到的问题是DMSO的浓度，从如果你加培养基的太少，那么DMSO的浓度就会比较大，就会影响 细胞生长，从以前的资料来看，DMSO的浓度在小于0.5%的时候对一般细胞没有什么影响，还有一个说法是1％。所以如果你的冻存液的浓度是 10％DMSO的话那么加10ml以上的培养基就恰好稀释到了无害浓度。

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检测方法： 
1．将病人标本和/或液状对照品放至室温（15-30℃），轻轻混匀。测试前从包装袋中取出检测卡平放。
2．将1根Binax样本拭子浸入要测试的标本中，完全浸没拭子头。如果拭子有滴水，将拭子靠在收集容器的边上，排去多余的液体。
3．检测卡内部的右手边有两个孔，将拭子插入底部的孔中（拭子孔），稳步向前推，使整个拭子头在上部的孔中可见，不要取出拭子。
4．垂直持放A试剂瓶，高出检测卡上方1/2到1英寸，慢慢向底部的孔中加入3滴A试剂。
5．立即从检测卡的右缘揭去粘附衬，封闭检测卡，过15分钟在窗口判读结果。15分钟后读取的结果可能不准确。然而，有些阳性病人不到15分钟就出现可见样品线。

人肺紫杉醇耐药株英文名称：A549/ Taxol
碱性L-G培养基基础/Alkaline L-G medium Base酸性物质处理的结核杆菌标本250克国产/进口
大鼠真成纤维细胞完全培养基100mL
葡萄糖铵发酵管BR20支国产/进口
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2-三甲硅噻唑英文名称：2-threetrimethylsilylthiazoleCAS号：79265-30-8分子式：157.31分子量：C6H11NSSi
二壬羰铁英文名称：TwoIironCAS号：15321-51-4分子式：363.78分子量：C9Fe2O9
液体石蜡英文名称：LiquidparaffinCAS号：8042-47-5分子式：分子量：
枸橼氯米芬分子式：598.08分子量：C32H36ClNO8英文名称：ClomiphenecitrateCAS号：50-41-9
锌试剂分子式：440.43分子量：C20H16N4O6S英文名称：ZincreagentCAS号：135-52-4
大豆苷分子式：416.3781分子量：C21H20O9英文名称：SoybeanglycosidesCAS号：552-66-9
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去氢木香内酯分子式：230.30222分子量：C15H18O2英文名称：DehydrocostuslactoneCAS号：477-43-0
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SKOV3 [SK-OV-3], 人卵巢腺细胞系
NCI-H2170(人肺鳞细胞)5×106cells/瓶×2