产品简介
本试剂盒是从琼脂糖凝胶中回收纯化DNA片段的试剂盒。试剂盒采用了特别的凝胶溶解Buffer,本试剂盒结合DNA制备膜技术,回收率高达60%~80%,具有GX、快速、方便之特点,整个操作只需30分钟便可完成。
试剂盒组成及储存
试剂盒组成 | 储存 | 体积50 preps) |
BD Buffer | 室温 | 20ml |
Wash Buffer1 | 室温 | 15ml |
Elution Buffer | 室温 | 5ml |
吸附柱 | 室温 | 50套 |
收集管 | 室温 | 50只 |
1Wash Buffer使用前加入60ml无水乙醇
注意事项
1.BD Buffer含有对皮肤有刺激性的成份,应避免与皮肤、衣物等接触。
2.纯化的DNA用于DNA序列分析时,Z好使用灭菌水洗脱DNA。
实验前准备
1.请自备ddH2O以及1.5 ml离心管。
2.Wash Buffer首次使用前加入60ml无水乙醇
3.洗脱结合于DNA制备膜上的基因组DNA时,将Elution Buffer或灭菌ddH2O加热至50-60℃使用将会提高基因组DNA的洗脱效率。
操作步骤
1.在紫外灯下切出含有目的DNA的琼脂糖凝胶,尽量减小凝胶体积,摒除不含DNA的凝胶,从而提高DNA回收率。
注:切胶时做好准备,动作迅速,不要将DNA长时间暴露于紫外灯下。
2.将胶块放入到事先称重的离心管中,并再次称重。
3.以灭菌枪头或灭菌牙签捣碎胶块。
4.加入与胶块同比例的BD Buffer(1mg凝胶对应加入1μL),50–65°C温育直至胶块完全熔解。
注:当分离小于400 bp 的DNA片段时,应在此溶液中再加入终浓度为20%的异丙醇。
5.将上述胶液加入到已放置在收集管上的吸附柱中,常温放置1分钟。
6.12,000 rpm离心1分钟,弃滤液。
注:如果胶液大于700 ul,可分多次进行,并重复步骤6。
7.向吸附柱中加入700 μl Wash Buffer,12,000 rpm离心1分钟,弃滤液。
8重复步骤7。
9.12,000 rpm离心1分钟,取出吸附柱置于新的1.5 ml离心管中。
10.打开吸附柱盖子,室温放置2分钟。
11.加入50-100 μl Elution Buffer (或者ddH2O)于吸附柱膜ZY,室温放置5分钟。
注:Elution Buffer (或者ddH2O)置于50℃预热,会提高DNA的回收效率。
12.12,000 rpm离心2分钟,纯化的DNA溶液即被收集在离心管中,纯化的DNA溶液即被收集在离心管中,即为获得提取到的纯化的DNA。
13.-20℃或4℃保存。